種豬場豬瘟母源抗體消長規律與免疫策略

許光勇，王朝軍，周海深，徐利，盧紀和，麻文靜，趙曉旭，蘇敬良，任曉明

（1.北京養豬育種中心，北京海淀100194；2.中國農業大學動物醫學院，北京海淀100193；3.北京農學院動物科學技術學院，北京昌平102206）

種豬場豬瘟母源抗體消長規律與免疫策略

許光勇1，王朝軍1，周海深1，徐利1，盧紀和1，麻文靜1，趙曉旭1，蘇敬良2，任曉明3

（1.北京養豬育種中心，北京海淀100194；2.中國農業大學動物醫學院，北京海淀100193；3.北京農學院動物科學技術學院，北京昌平102206）

試驗主要通過前期調查母豬群豬瘟病毒感染情況和抗體保護水平，確定母豬群豬瘟疫苗免疫方式，然后選擇不同時間點觀察豬瘟母源抗體消長規律，從而確定仔豬豬瘟活疫苗首次免疫接種時間，繼而達到有效地避開疫苗與母源抗體發生中和反應，為科學制定免疫程序提供理論依據。

豬瘟；母源抗體；阻斷率；首免日齡；免疫策略

豬瘟（Classical Swine Fever,CSF）是由豬瘟病毒引起的一種高度接觸性傳染病，OIE（世界動物衛生組織）將其列為A類傳染病，在我國被歸為一類傳染病[1]。臨床上主要以發熱、全身如針尖點狀出血或脾梗死等為主要特征，妊娠母豬可表現出流產、產死木弱仔數增加。在全球，中國C株對豬瘟的控制與消滅做出過巨大貢獻。在中國，雖現階段豬瘟不呈現暴發式，但仍有零散發生，呈現溫和感染狀態，對豬場尤其是種豬場造成隱性危害。

規模化豬場豬瘟免疫效果差異較大，究其原因主要包括首免日齡不當導致母源抗體與疫苗抗原相互抵消或出現免疫空白期、母豬持續帶毒導致仔豬形成免疫耐受、其他免疫抑制性疾病存在、豬瘟疫苗質量問題或其他管理因素等[2]。本試驗根據豬瘟母源抗體消減變化情況來確定仔豬豬瘟活疫苗首免時間，從而避免盲目隨意接種疫苗誤區，為科學制定免疫程序提供理論依據，并形成一套可行性強的免疫程序調整及優化思路。

1 試驗豬場背景

試驗于北京養豬育種中心下屬兩個豬場開展，分別記為A和B種豬場。前期對試驗場母豬群豬瘟抗體水平和豬瘟病毒感染情況進行摸底調查。

1.1 試驗場母豬流產與產死木弱情況

對試驗A與B種豬場2014年和2015年母豬群的流產率與產死木弱數進行統計，其分布見表1。由表1可知，試驗A與B場母豬流產率在1.5%左右（2014年試驗B場除外），基本符合藍耳病陽性穩定場生產成績表現。

表1 試驗場母豬流產率與產死木弱數情況

1.2 試驗場母豬群豬瘟病毒感染情況

母豬群均勻分布于空懷、妊娠和哺乳階段并按5%比例采集扁桃體樣品進行豬瘟病毒檢測，試驗A與B場分別為30份和15份，通過提取樣品核酸、巢式PCR和凝膠電泳反應，其結果見圖1和圖2。圖1和圖2結果表明，試驗A與B場母豬群均無豬瘟病毒感染存在，整個母豬群保持豬瘟抗原陰性狀態。

圖1 試驗A場母豬群樣品PCR檢測豬瘟病毒結果

圖2 試驗B場母豬群樣品PCR檢測豬瘟病毒結果

1.3 試驗場母豬群豬瘟抗體水平分布

母豬群均勻分布于各個胎次中并按10%比例于妊娠中后期采血檢測豬瘟抗體，試驗A與B場分別為60份和30份，檢測結果見表2。由表2可知，試驗A與B場母豬群豬瘟抗體完全合格，具有良好的保護作用，說明母豬群于斷奶時免疫接種豬瘟疫苗即跟胎免疫是有效的。

表2 試驗場母豬群豬瘟抗體合格率

綜合上述結果可知，試驗A與B場母豬群未受豬瘟病毒感染風險，各階段母豬群豬瘟抗體水平良好，母豬群于斷奶時采取跟胎免疫可行且利于仔豬豬瘟首免日齡確定。

2 材料與方法

2.1 試驗動物

各選擇50頭剛出生哺乳仔豬，每窩2頭，共25窩，試驗于北京養豬育種中心下屬A與B豬場完成。

2.2 試驗用試劑盒

豬瘟病毒抗體檢測試劑盒（批號：99-43220，F081），購自北京愛德士元亨生物科技有限公司。

2.3 試驗處理

仔豬豬瘟活疫苗首免時間確定試驗：試驗A與B場分別挑選的50頭剛出生哺乳仔豬，分別編號為A1～A50、B1～B50，100頭仔豬不免疫任何豬瘟疫苗直至試驗采血結束，分別于7、14、21、28、35、42、49和63日齡采血檢測豬瘟抗體阻斷值。

2.4 試驗方法

具體操作完全按照IDEXX豬瘟病毒抗體檢測試劑盒說明書進行。

3 統計分析

檢測結果數據用Excel進行統計分析處理。

4 試驗結果

試驗A與B場所選100頭試驗豬分別于7、14、21、28、35、42、49和63日齡進行8次采血工作，其中試驗B場有1頭仔豬于31日齡死亡，故剔除掉編號B25試驗豬，最后A與B場參與檢測的血樣數量每次分別為50和49份，對所有血樣檢測值進行統計分析，其結果見圖3。

圖3 試驗A場仔豬豬瘟母源抗體消長情況

阻斷率均值為試驗A場所有參與試驗采血仔豬豬瘟抗體阻斷率的平均值，為方便分析，圖3中所表現出的阻斷率均值記為豬瘟抗體阻斷率的平均值除以100；合格率為阻斷率值大于等于40數量除以每次檢測總數；阻斷率值≤30比例為阻斷率值小于等于30數量除以每次檢測總數。

由圖3可知，未接種任何豬瘟疫苗的仔豬，其豬瘟母源抗體水平隨著時間推移逐漸降低，阻斷率均值由7日齡0.75降至63日齡0.02；豬瘟抗體合格率也隨著時間推移逐漸降低，呈現先慢后快再慢的下降趨勢，在14日齡前，豬瘟抗體合格率均維持在90%以上且穩定；阻斷率值≤30比例隨著仔豬日齡增大而逐漸升高，至63日齡達100%。仔豬豬瘟活疫苗首免日齡確定原則為：當豬瘟母源抗體阻斷率值小于等于30所占比例達到40%（一般為20%～40%）時即為豬瘟活疫苗首次免疫接種時間。依據此原則可知，試驗A場仔豬豬瘟活疫苗首次免疫時間為35日齡。

圖4中阻斷率均值、合格率和阻斷率值≤30比例所代表意義同圖3。由圖4可知，未接種任何豬瘟疫苗的仔豬，其豬瘟母源抗體水平隨著日齡增大逐漸降低，阻斷率均值由7日齡0.65降至63日齡0.04；豬瘟抗體合格率呈現先慢后快再平緩的下降趨勢，不同于A場的是，在21日齡前豬瘟抗體合格率均較高；阻斷率值≤30比例隨著仔豬日齡增大也逐漸升高，至63日齡達100%。按豬瘟首免日齡確定原則同理可知，試驗B場仔豬豬瘟活疫苗首次免疫時間大約為38日齡。

圖4 試驗B場仔豬豬瘟母源抗體消長情況

5 討論

雖說豬瘟病毒感染對養豬業危害較之前輕，呈現溫和型臨床表現，但如果細算細分，豬瘟病毒對養豬業危害仍不可忽視，故在國務院與農業部頒發的《國家中長期動物疫病防治規劃（2012—2020年）》文件中強調控制豬瘟重要性，同樣在開展“十三五規劃”中提出凈化豬瘟方向。對于企業工作者來說，如何預防與控制豬瘟發生是重中之重，而走凈化之路還需廣大科研工作者提供更好的技術支持，例如開發豬瘟疫苗毒與野毒鑒別技術等。

豬瘟疫苗免疫效果受諸多因素影響，其中包括母源抗體中和反應、豬群健康度、精液帶毒、免疫抑制性疾病干擾、免疫耐受性存在、疫苗質量與運輸冷鏈等。本試驗主要針對豬瘟母源抗體對仔豬疫苗免疫效果影響展開，通過觀察豬瘟母源抗體消減規律來確定仔豬首免日齡。

前期對兩個試驗豬場豬群健康度進行摸底調查，由圖1和圖2結果可以確定母豬群未受豬瘟病毒感染，由表2結果可知母豬群豬瘟抗體保護率均達到100%，由表1數據可知，豬場母豬群流產率處于1.5%左右水平（2014年B場除外），2014年B場豬群藍耳病保持抗原抗體雙陰性狀態，故其母豬流產率僅為0.15%，該生產成績應該屬于藍耳病陽性穩定場或藍耳病某幾個階段保持陰性狀態的結果，與豬瘟病毒感染應該沒有關聯。通過兩個豬場母豬群流產率、產死木弱數、豬瘟病毒感染狀態和豬瘟抗體保護情況可知，該兩個試驗豬場均未感染豬瘟病毒，母豬群采取的斷奶時跟胎免疫方式效果良好，且豬瘟跟胎免疫能夠保證哺乳母豬奶水中豬瘟抗體水平穩定，不會導致仔豬吃母乳時出現母源抗體水平參差不齊的問題，仔豬豬瘟母源抗體消長有很強規律性，有利于仔豬豬瘟疫苗首免時間的確定。因此，規模化豬場要確定或優化仔豬豬瘟疫苗免疫程序，首先得確定母豬群豬瘟疫苗免疫方式，這樣才能更準確地制定仔豬豬瘟疫苗免疫程序。就目前來看，豬瘟采取跟胎免疫固然精準，但同時也會出現一些問題，例如奶媽豬、妊娠期流產母豬等會出現漏免或免疫間隔時間過長的問題，這就要求豬場的管理更加精細化。雖然一刀切免疫方式省時省力，且母豬群抗體水平不受影響，但通過母乳傳遞給仔豬的母源抗體水平參差不齊，對仔豬豬瘟疫苗免疫程序制定帶來很大影響。仔豬豬瘟疫苗免疫過早出現母源抗體與疫苗抗原發生中和，從而導致免疫無效，增加成本；免疫過晚仔豬出現免疫空白期，增加豬瘟病毒感染風險。因此，在制定或調整豬群豬瘟免疫程序時，務必先確定母豬群的豬瘟免疫方式，后期才能有的放矢。

圖3結果顯示，試驗A場仔豬豬瘟母源抗體阻斷率平均值隨著日齡增大逐漸降低，7日齡仔豬阻斷率均值為0.75，28日齡阻斷率均值為0.43，推測大約30日齡阻斷率均值降至0.40；試驗A場豬瘟抗體合格率隨著仔豬日齡增大也逐漸降低，并呈現先慢后快再慢的下降趨勢，不難發現，仔豬于14日齡前合格率維持在90%以上，在14～42日齡階段，其下降速度之快，抗體合格率由14日齡的90%迅速降至42日齡的10%，僅4周時間降低80個百分點，63日齡抗體合格率已為0；試驗A場豬瘟抗體阻斷率值小于等于30所占比例隨著仔豬日齡增加逐步升高，并于35日齡達到38%，而63日齡達到100%。從圖3中發現，35日齡仔豬的豬瘟抗體合格率為40%，豬瘟抗體阻斷率值小于等于30所占比例為38%，按照阻斷率值小于等于30比例在20%～40%區間內定為豬瘟疫苗首免時間的原則，我們將A場仔豬豬瘟疫苗首次免疫時間定為35日齡。

圖4結果顯示，試驗B場仔豬阻斷率均值隨著日齡增大逐漸下降，且1周齡以內阻斷率均值僅為0.65，28日齡為0.47，35日齡為0.36，故推測大約在30日齡阻斷率均值達到0.40，這和試驗A場基本保持一致；試驗B場豬瘟抗體合格率也呈現先慢后快再平緩的下降趨勢，21日齡前均維持在90%左右或以上水平，較A場推遲1周時間，但21～49日齡出現快速下降過程，49日齡降至2%；試驗B場豬瘟抗體阻斷率值小于等于30所占比例隨著仔豬日齡增加也逐步升高，前3周較穩定，35日齡達到31%，42日齡升至61%，63日齡達到100%。從圖4結果發現，大約在38日齡時，豬瘟抗體合格率達40%，豬瘟抗體阻斷率值小于等于30所占比例也為40%，同理我們將B場仔豬豬瘟疫苗首次免疫時間定為38日齡。這樣既避免疫苗抗原和母源抗體中和反應發生，又不會出現過長免疫空白區，能夠有效地讓仔豬得到母源抗體或疫苗抗體的保護。

通過圖3和圖4結果比較可知，試驗A與B場阻斷率均值、合格率和阻斷率值小于等于30比例的變化趨勢基本一致，即不同豬場仔豬豬瘟母源抗體消長規律基本一致。同時也存在差異，B場仔豬前期阻斷率均值低于A場，B場豬瘟抗體合格率維持較高水平時間較A場多1周時間，這些有可能與不同豬場所飼養種豬品種差異、豬群健康度或生產管理水平等因素有關。從上述兩個場結果可知，高豬瘟母源抗體水平至少能維持兩周時間，21～42日齡為母源抗體迅速下降階段，仔豬63日齡幾乎或完全沒有母源抗體保護，大約在30日齡阻斷率均值達到40，26～38日齡階段豬瘟抗體阻斷率值小于等于30所占比例在20%～40%，35～38日齡階段豬瘟抗體合格率維持在40%左右。

總之，要提高豬瘟疫苗免疫效果，消除母源抗體干擾只是一方面，還需從排查帶毒豬尤其是后備豬群，控制或消滅其他免疫抑制性疾病，嚴格監管疫苗質量和冷鏈運輸保存環境，加強生物安全和飼養管理等方面進行綜合管理。

6 結論

通過試驗A與B場結果表明，高的豬瘟母源抗體水平一般能維持2～3周時間，21日齡后，豬瘟母源抗體迅速下降，49～63日齡已經處于很低保護力。試驗A與B場豬瘟活疫苗首次免疫接種時間分別為35和38日齡。

[1]王春花，孫元，仇華吉.新型豬瘟疫苗研究進展[J].生物工程學報，2013，29（7）：880-890.

[2]寧宜寶，吳文福.我國豬瘟流行新特點與疫苗免疫研究[J].中國獸藥雜志，2011，45（8）：33-37.

（編輯：郭玉翠）

S858.285.3

A

1002-1957(2016)04-0105-03

2016-05-26

北京三元種業科技股份有限公司自立課題（SYZYZ2015 0005）

許光勇（1985-），男，江西金溪人，獸醫師，執業獸醫師，在讀博士研究生，主要從事規模化豬場生產管理和豬病防控研究. E-mail：vetbbsc@163.com