馬齒莧提取物對玉米蚜的拒食活性

鄒 玉， 邵 鳴， 王 濤， 許 龍,2*

(1.佳木斯大學生命科學學院，黑龍江佳木斯 154007；2.佳木斯大學應用昆蟲研究所，黑龍江佳木斯 154007)

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馬齒莧提取物對玉米蚜的拒食活性

鄒 玉1， 邵 鳴1， 王 濤1， 許 龍1,2*

(1.佳木斯大學生命科學學院，黑龍江佳木斯 154007；2.佳木斯大學應用昆蟲研究所，黑龍江佳木斯 154007)

[目的]探究不同條件下馬齒莧石油醚提取物對玉米蚜的拒食活性。[方法]采用單因素試驗和正交試驗，研究不同濃度、溫度和時間條件下馬齒莧提取物對玉米蚜的拒食率。[結果]提取物濃度為100 mg/mL、溫度為25 ℃、時間為48 h時馬齒莧提取物對玉米蚜的拒食活性最高。提取物濃度對馬齒莧拒食活性影響最大，其次為時間因素。[結論]試驗結果為開發以馬齒莧為原料的植物性殺蟲劑提供了理論依據。

馬齒莧；提取物；玉米蚜；拒食活性

馬齒莧(PortulacaoleraceaL.)屬馬齒莧科的肉質野生草本植物，又稱馬齒草、五行草、長命菜、螞蚱菜、馬舌菜等，在我國分布廣泛，是常見的中草藥之一。醫術記載，馬齒莧性味酸寒，具有清熱解毒、散學消腫、止痢之功效[1]，主治熱痢膿血、熱淋、帶下、痛腫惡毒、丹毒[2]。現代藥理試驗也證明了馬齒莧具有很強的抑菌作用[3]。此外，馬齒莧還有防治農業害蟲的功效，《中國土農藥志》中就有記載[4]。

玉米蚜[Rhopalosiphummaidis(Fitch)]為蚜科昆蟲，世界性害蟲，主要為害玉米、大麥、小麥等禾谷類農作物，其成、若蚜通過刺吸植物韌皮部汁液對農作物直接產生危害，同時也是玉米矮花葉病毒(MDMV)、玉米葉斑病毒(MMSV)、玉米花葉條紋病毒(MMSV)等植物病毒的傳播載體，取食時分泌的蜜露分布于植物葉片表面，影響植物光合作用的同時還能引起煤污病[5-9]。玉米蚜對玉米的危害始于抽雄前的雄穗苞內，多集中于雄穗苞、新抽出的雄穗、雄穗柄、旗葉基部和幼嫩的雌穗苞葉上對玉米產生危害，嚴重時，成、若蚜群集于新抽出和尚未抽出的雄穗上以及正在灌漿的雌穗上吸食，造成雄穗無法散粉，導致籽粒灌漿不實，影響玉米產量。玉米蚜繁殖力高、能遷飛且易產生抗性，防治較為困難。化學方法防治玉米蚜雖然效果顯著且使用方便，但會污染環境、破壞生態系統，且易使玉米蚜產生抗藥性，植物性殺蟲劑防治玉米蚜高效、作用機理多樣、不易誘發病蟲害抗藥性、與環境相容性好、選擇性高、對非靶標生物相對安全，已成為新型的無公害農藥。鑒于此，筆者研究了馬齒莧提取物在不同條件下對玉米蚜的拒食活性，以期為開發以馬齒莧為原料的新型植物殺蟲劑提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料 玉米蚜采自佳木斯郊區玉米地，經佳木斯大學羅志文副教授鑒定為蚜科玉米蚜(Rhopalosiphummaidis)，野生馬齒莧采自佳木斯大學校園內，經佳木斯大學程海濤副教授鑒定為馬齒莧科馬齒莧(Portulacaoleracea)。

1.2 方法

1.2.1 馬齒莧提取物的制備。將馬齒莧地上部分自然陰干后，置于干燥箱內50 ℃烘至發脆，用中藥粉碎機粉碎并過40目篩制成干粉，稱取干粉20 g，加入10倍量石油醚于50 ℃加熱3 h后，放入布氏漏斗中抽濾，重復3次，合并3次濾液，將濾液在旋轉蒸發儀內減壓濃縮成稠膏狀,然后將浸提稠膏用50%丙酮稀釋定容至60 mL(1 g干粉1 mL)，裝入磨口棕色廣口瓶密封，置于冰箱中備用。

1.2.2 拒食活性的測定。將供試樣品(1 g干粉1 mL)用吐溫-80水溶液分別稀釋成12.5、25.0、50.0、75.0、100.0 mg/mL，并用吐溫-80水溶液稀釋后的丙酮溶液作為對照，選取4.5 cm2的玉米葉在處理和對照溶液中分別浸3 s，取出晾干，在其葉背轉接20頭3～4齡無翅玉米蚜，將以上處理的接蟲玉米葉放入培養皿，葉背朝下，滴入蒸餾水保濕，置于恒溫培養箱采用不同溫度飼養，分別在6、12、24、36和48 h后檢查各處理葉片上玉米蚜的棲息數，每次處理重復3次，結果用t檢驗分析處理與對照組之間的差異顯著性，并用SPSS軟件對拒食率進行顯著性分析。拒食率=(對照葉片蟲數-處理葉片蟲數)/對照葉片蟲數×100%。

1.2.2.1 拒食活性單因素試驗。拒食活性測定單因素試驗包括提取物濃度、飼養溫度和飼養時間，提取物濃度(A):12.5、25.0、50.0、75.0和100.0 mg/mL、飼養溫度(B):15、20、25、30和35 ℃、飼養時間(C):6、12、24、36和48 h。每個影響因子進行3次重復性試驗，分別計算拒食率，選用3次平均值作為試驗參數，確定各因素對試驗影響，篩選出單因素試驗條件及參數。

1.2.2.2 拒食活性測定正交試驗。按照單因素試驗結果，選取提取物濃度(A)、培養溫度(B)、培養時間(C)3個因素進行拒食活性測定正交優化試驗，采用L9(33)正交表設計試驗(表1)。

表1 正交試驗因素與水平

2 結果與分析

2.1 單因素試驗結果2.1.1 提取物濃度對玉米蚜拒食活性的影響 。由表2可知，濃度為12.5～100.0 mg/mL時，處理組與對照組之間均有顯著差異，表明該濃度范圍內馬齒莧提取物對玉米蚜拒食活性良好，隨著馬齒莧提取物濃度逐漸升高，其對玉米蚜的拒食活性逐漸增強，當濃度為100.0 mg/mL時，拒食率達83.89%。

表2 不同濃度馬齒莧提取物對玉米蚜的拒食活性a

Table 2 Different concentrations of purslane extract on the antifeedant activity of corn aphida

提取物濃度Extractconcen-tration∥mg/mL處理蟲數Insectnumberoftreatment∥頭對照蟲數Insectnumberofcontrol∥頭拒食率Antifeedantrate∥%12.58.30**23.6763.4625.05.00**15.7067.2350.06.30**22.0069.4075.03.27**14.6377.53100.04.07**25.3183.89

注：a表示飼養時間為24 h、溫度為20 ℃時的拒食活性；**表示與對照相比P<0.01。

Note: a stands for antifeedant activity of feeding time 24 h, temperature 20 ℃; ** stands forP<0.01 compared with control.

2.1.2 飼養時間對玉米蚜拒食活性的影響。由表3可知，飼養時間為6 h時，處理與對照組之間差異不顯著，表明該時間內馬齒莧提取物對玉米蚜拒食活性較差。時間為24～48 h時，處理與對照組之間均有顯著差異，表明該時間范圍內馬齒莧提取物對玉米蚜拒食活性良好，隨著飼養時間逐漸增加，馬齒莧提取物對玉米蚜拒食活性逐漸增強，時間為48 h時，拒食率為81.99%。

2.1.3 溫度對玉米蚜拒食活性的影響。由表4可知，當溫度為15～30 ℃時，處理組與對照組之間有顯著差異，在該溫度范圍內，馬齒莧提取物對玉米蚜拒食效果較好，當溫度為35 ℃時，處理組與對照組之間差異不顯著，可能由于該提取物對溫度敏感，導致其穩定性降低。

表3 不同飼養時間下馬齒莧提取物對玉米蚜拒食活性a

Table 3 Purslane extract in different time on the antifeedant activity of corn aphida

時間Timeh處理蟲數Insectnumberoftreatment∥頭對照蟲數Insectnumberofcontrol∥頭拒食率Antifeedantrate∥%613.0021.3339.17126.00*11.0050.45246.30**26.7076.33365.00**23.6778.20483.00**16.6081.99

注：a表示提取物濃度為75 mg/mL、溫度為20 ℃時的拒食活性；*表示與對照相比P<0.05,**表示P<0.01。

Note: a stands for antifeedant activity of extract concentration 75 mg/mL, temperature 20 ℃; * stands forP<0.05, ** stands forP<0.01 compared with control group.

表4 不同溫度下馬齒莧提取物對玉米蚜拒的食活性a

Table 4 Purslane extract under different temperature on antifeedant activity of corn aphida

溫度Temperature℃處理蟲數Insectnumberoftreatment∥頭對照蟲數Insectnumberofcontrol∥頭拒食率Antifeedantrate∥%154.97**17.6770.09204.27**15.9372.30253.00**17.2378.59306.00**19.3071.16353.3011.1772.45

注：a表示提取物濃度為75 mg/mL、時間為24 h時的拒食活性；**表示與對照相比P<0.01。

Note: a stands for antifeedant activity of extract concentration 75 mg/mL, time 24 h; ** stands forP<0.01 compared with control group.

2.2 正交試驗結果 通過正交試驗得出，影響馬齒莧提取物對玉米蚜拒食活性的因素順序為A>C>B,即對玉米蚜拒食活性影響最大的因素為提取物濃度，其次為時間，溫度對拒食活性影響較小，通過試驗確定在A3B2C3條件下，馬齒莧干粉提取物對玉米蚜拒食活性最高，即提取物濃度為100 mg/mL、溫度為25 ℃、時間為48 h時拒食活性最高(表5)。

表5 正交試驗設計與結果

3 結論與討論

試驗結果表明，馬齒莧提取物對玉米蚜具有良好的拒食活性，其作為植物性殺蟲劑具有良好的開發前景。

影響馬齒莧對玉米蚜拒食活性的因素主要有提取物濃度、時間、溫度等因素。通過正交試驗得出，提取物濃度對其拒食活性影響最大，其次是時間因素，溫度對拒食活性影響較小，當提取物濃度為100 mg/mL、溫度為25 ℃、時間為48 h時對玉米蚜拒食活性最高。

植物性殺蟲劑的活性成分通常為來源于植物體的次生代謝產物，但由于植物次生物質種類多,結構復雜,該試驗得到的對玉米蚜具有拒食活性的物質為一類混合物，馬齒莧殺蟲活性單體物質和殺蟲機理仍有待深入研究。此外，馬齒莧具有殺蟲活性的物質對熱不穩定，易受環境因素影響，提高其穩定性也是開發利用馬齒莧的關鍵。

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[3] 俞佩芳.三種常見藥用植物抗菌作用的探討[J].華東師范大學學報(自然科學版),1994(3):89-93.

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Purslane Extract on the Antifeedant Activity of Corn Leaf Aphid

ZOU Yu1, SHAO Ming1, WANG Tao1, XU Long1,2*

(1. School of Life Sciences, Jiamusi University, Jiamusi, Heilongjiang 154007; 2. Institute of Applied Insect, Jiamusi University, Jiamusi, Heilongjiang 154007)

[Objective] The aim was to study on antifeedant activity of purslane petroleum ether extract on corn leaf aphid under different conditions. [Method] Using single factor and orthogonal test, the antifeedant activity of purslane petroleum ether extract on corn leaf aphid under different concentration, temperature and time was studied. [Result] The results showed that under concentration of 100 mg/mL, temperature 25 ℃, time 48 h, the antifeedant activity of purslane petroleum ether extract was the highest. Extract concentration was the key factor influencing the antifeedant activity, followed by time factor. [Conclusion] The study provides theoretical basis for development of vegetable insecticide with purslane as raw material.

Purslane; Extract; Corn leaf aphid; Antifeedant activity

佳木斯大學研究生科技創新項目(LZR2015-008)。

鄒玉(1991- )，女，黑龍江佳木斯人，碩士研究生，研究方向：資源昆蟲開發與應用。*通訊作者，副教授，碩士生導師，從事昆蟲學研究。

2016-08-25

S 435.132

A

0517-6611(2016)31-0094-03