四種小血管吻合方法動物實驗比較研究

李永 黃玉鵬 劉明軍

(濮陽市人民醫院 骨科 河南 濮陽 457000)

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四種小血管吻合方法動物實驗比較研究

李永 黃玉鵬 劉明軍

(濮陽市人民醫院 骨科 河南 濮陽 457000)

目的 對比分析四種小血管吻合方法的應用效果。方法 80只Wister大鼠隨機分成4組，分別采用端端間斷吻合法、等距對稱分葉法、小血管褥式套接法以及三針縫合套入法等吻合方法，各20只。統計吻合時間及血管通暢率，并于術后不同時間采用光鏡觀察吻合口部的組織形態學改變。結果 4組術后血管吻合口即刻通暢率均為100%。遠期通暢率：間斷縫合組為94.05%，等距對稱分葉組為97.5%，褥式套接組為95%，三針縫合套入組為100%。組間差異無統計學意義(P>0.05)。三針縫合套入組吻合時間較其他三種吻合方法短，差異有統計學意義(P<0.05)。術后血管組織形態學改變：三針縫合套入組血管內膜損傷小、管壁各層次結構清晰、炎癥反應輕。結論 三針縫合套入法吻合小血管手術耗時短，術后血管壁損傷小、炎癥反應輕、恢復快。

小血管吻合；縫合技術；動物實驗；組織形態學

小血管吻合技術是顯微外科的基本技術，隨著顯微器械、顯微縫合材料及顯微鏡的發展和應用，小血管修復技術取得巨大的改進[1-2]。但目前顯微技術仍存在許多不足之處(技術要求高、操作耗神費時、縫合過程中血管內膜損傷較大等)，易導致吻合后血管狹窄或形成血栓，嚴重者更使血管腔閉塞而阻斷血流[3-4]。故如何提高小血管吻合質量是目前顯微外科面臨的一個重要問題。小血管吻合質量一方面要求施術者要有高度的操作技巧，另一方面要求保持技術質量的前提下簡化操作、縮短手術時間。本研究通過動物實驗對比分析四種小血管吻合方法的應用效果，以期為臨床血管吻合方法的選擇提供理論依據。

1 材料和方法

1.1 實驗儀器、藥品及實驗動物

1.1.1 主要儀器 顯微外科手術器械、LEICA-690手術顯微鏡、低溫冰箱(吉林冰箱廠)、光學顯微鏡。

1.1.2 藥品試劑 速眠新注射液1.5 ml/支，罌粟堿，肝素(2 ml∶12 500 u)

1.1.3 實驗動物 全部采用2～3月齡Wister大鼠，體質量為250～300 g，雌雄不限。

1.2 動物實驗分組與手術操作

1.2.1 動物分組 Wister大鼠80只，隨機分為4組。各組取大鼠左側股動脈、尾動脈各1個吻合口。其中股動脈共80根，血管外徑為0.7～0.9 mm，平均外徑0.8 mm，在股深動脈和腹壁淺動脈中間做吻合，用11-0無創縫合線吻合；尾動脈80根，血管外徑為0.4～0.6 mm，平均為0.5 mm，在尾動脈中間做吻合，用11-0無創縫合線吻合；共計160個吻合口。

1.2.2 吻合方法

1.2.2.1 端端間斷吻合組 采用兩定點等距縫合法，以11-0無創縫合線間斷縫合，股動脈縫合8針，尾動脈為6針；以8針為例，第1針縫合助手一側側壁，第2針縫合術者一側側壁，分別打結并留長線作牽引線，在第1、2針中點縫第3針，然后在第2、3針間及第1、3針間中點分別縫合第4及第5針，前壁縫合完畢后同法縫合后壁。

1.2.2.2 等距對稱分葉法 等距縱行剪開將要吻合的小血管吻合口，剪開深度為管壁厚度的2倍，兩斷端剪開部位要對稱，分葉數根據血管口徑的大小決定，本實驗在股動脈需要縫合8針則分4葉，尾動脈需要縫合6針則分3葉。縫合時采用兩定點法，先縫合分葉部，邊距等于葉深度+管壁厚度，打結時由助手鑷夾提起分葉的管壁，以確保其完全外翻，后縫合兩葉之間的管壁，此時的邊距等于管壁的厚度，使縫線處于同一平面。

1.2.2.3 褥式套接法 采用雙針11-0無創縫合線，共縫合4針，第1針縫合兩點鐘位置，取血管縱軸方向縫合前壁套入端，縫合外膜及中層，邊距0.1～0.2 mm，在套端相對應位置出針，邊距是血管外徑；第2針縫合4點鐘位置，針距0.2～0.3 mm，縫合套入端外膜及中層，邊距0.1～0.2 mm。再于套端相對應位置出針，邊距同血管外徑，先不打結，留雙線備牽引，完成前壁褥式縫合后將血管夾翻轉180°，第3針和第4針的套入端與套端的進出針距與操作方法同第1、2針(第3針縫合8點鐘位置，第4針縫合10點鐘)，縫合后壁后剪除一段雙針線。

1.2.2.4 三針縫合套入法 血管吻合從后壁開始，三針縫合順序為6點、10點、2點或8點、4點、12點方向。套入血管(動脈為近心端，靜脈為遠心端)長度與受套血管機械擴張后的外徑之比為1～1.5∶1，受套血管全層縫合，被套入血管外、中層縫合。

吻合完畢后去除血管夾，觀察吻合口無明顯漏血后，行血流通暢實驗，證實血管通暢后關閉創口，動物清醒后送入動物房飼養，術后即刻作勒血實驗[5]。觀察術后第7天血流是否通暢，在24 h、72 h、14 d、30 d后隨機抽取部分動物吻合血管做組織學觀察比較。

2 結果

2.1 吻合時間 三針縫合套入法吻合時間較其他3種吻合方法短，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 4種吻合方法吻合時間比較

注：與其他3組比較，aP<0.05。

2.2 術后吻合口通暢情況 術后即刻血管通暢率：間斷縫合組為100%(40/40)，等距對稱分葉組為97.5%(39/40)，褥式套接組為95%(38/40)，三針縫合套入組為100%(40/40)；術后第7天血管通暢率：間斷縫合組為95%(19/20)，等距對稱分葉組為90%(18/20)，褥式套接組為90%(18/20)，三針縫合套入組為95%(19/20)。四組術后即刻血管通暢率和術后第7天血管通暢率比較，差異無統計學意義(P>0.05)。等距對稱分葉組和褥式套接組各出現1例血管阻塞。

2.3 組織形態學觀察 常規H-E染色光學顯微鏡觀察吻合口部修復過程中組織變化。在吻合后24 h內，4組吻合口處均損傷嚴重，由于三針縫合套入組的針數較少，故其對管壁的損傷也較其他組為輕。72 h內三針縫合套入法對內膜損傷小，吻合口處的內皮細胞再生較其他方法要早。14 d內，三針縫合套入組：吻合口處內膜連續覆蓋吻合口，中膜平滑肌細胞層及內彈力膜均恢復良好，逐漸按血流方向塑形，彈力纖維增生明顯，管腔規則。30 d內，三針縫合套入組：吻合口處血管壁連續性已完全恢復，內膜完整，光滑、流暢。中膜平滑肌細胞層及內彈力膜層均恢復良好，已基本按血流方向排列。組織形態學結果：三針縫合套入組的管壁損傷輕，吻合口處組織修復較其他方法好，內皮細胞再生較早，吻合口處內膜相對更加光滑，中膜平滑肌細胞層及內彈力膜排列更加規則。

3 討論

現在最常用的顯微血管吻合方法還是單純間斷吻合法，但此法技術要求高、吻合時間長、不宜深部操作，且縫合針對血管壁的損傷及血管腔內縫線殘留都易導致血栓形成[6]。吻合時縫合針數過少或邊距太小加之張力較大時可造成吻合口漏血、甚至內膜乃至全層斷裂。這些損傷均可通過間隙形成血栓；縫合針數過多或邊距過大可造成過多的縫線異物反應或血管兩端邊緣隆起形成堤狀，向血管內壓迫而致管腔狹窄、血栓形成，使遠期通暢率下降。

1982年陳中偉[7]加以改進，使之成為管壁縫合。該縫合法血管內膜損傷機會小，血管腔內無縫線暴露，而吻合技術也較端端常規吻合法容易，但他認為該法指征嚴格，在端端縫合中不適合血管長度不足、口徑相差太大的情況。因為套入部應有足夠的長度，一般要超過血管外徑，否則通血后血管壓力升高會將套入血管推出，對于外徑為1 mm的血管，縫合針數至少為3針。在實際臨床工作中，長時間持續的工作致使體力過分消耗，常使施術者在進行精細的顯微操作時感到力不從心。本研究通過動物實驗，篩選出三針縫合套入法作為端端吻合的首選方法。其操作簡便、易掌握、手術用時少、術后血管栓塞和血管危象發生率及動脈瘤發生率低，為臨床應用三針縫合套入法進行血管吻合提供了理論依據。

[1] 侯春林.中國顯微外科發展經歷[J].中華創傷骨科雜志,2005,7(1):6-18.

[2] 陳奇鳴,洪小芳,楊福周,等.不同方式的顯微外科手術治療手指皮膚軟組織脫套傷[J].中國實用醫藥,2009,4(15):67-68.

[3] 張旭,李果山,劉志賢,等.斷指再植19例治療體會[J].中華顯微外科雜志,2015,38(5):494-497.

[4] 裴國獻.中國顯微外科50年[J].中華顯微外科雜志,2013,36(1):4-6.

[5] 高偉陽,黃佳溫.三針縫合套入法顯微血管吻合的臨床研究[J].中華骨科雜志,1995,3(6):335-338.

[6] 張潤,張全旺.斷指再植56例治療體會[J].內蒙古中醫藥,2011,30(2):38.

[7] 陳中偉.創傷骨科與顯微外科[M].上?？茖W技術出版社, 1995.

Comparative study of four kinds of small vessel anastomosis methods in animal experiment

Li Yong, Huang Yupeng, Liu Mingjun

(DepartmentofOrthopaedics,People’sHospitalofPuyang,Puyang457000,China)

Objective To compare the effects of four kinds of small vessel anastomosis methods in animal experiment.Methods 80 Wister rats were randomly divided into four groups, 20 cases in each group. The end of the interrupted suture method, equidistant symmetrical lobulation, small vascular mattress suture and three-pin suture method and other anastomosis were used respectively. The time of anastomosis and the patency rate of blood vessel were observed. The histomorphological changes of the anastomotic region were observed by light microscope at different time.Results The immediate patency rates of the four groups after operation all were 100%. The long-term patency rate was 94.05% in the interrupted suture group, 97.5% in the equidistantly lobulated group, 95% in the mattress suture group and 100% in the three-pin suture group. There was no statistical difference (P>0.05). The average anastomosis time: anastomosis time of three-pin suture group was shorter than the other three methods of anastomosis, and there was a statistical difference(P<0.05). The morphological changes of the vascular tissue after the operation: in three-pin suture group, vascular intima injury was light, the wall of each layer was clear, and the inflammatory reaction was mild.Conclusion Three-pin suture method is a good choice for small vessel anastomosis, with short operation time, light vascular intima injury, mild inflammation and fast recovery.

small vessel anastomosis; suture technique; animal experiment; histomorphology

R-332

10.3969/j.issn.1004-437X.2016.11.004

2016-06-18)