冷沉淀制備過程質控及其臨床應用效果探討

蔣永紅

吉林省琿春市無償獻血中心采制科，吉林琿春 133300

冷沉淀制備過程質控及其臨床應用效果探討

蔣永紅

吉林省琿春市無償獻血中心采制科，吉林琿春 133300

目的 探討冷沉淀制備全程中的質量控制方法及在嚴格質控條件下去冷沉淀血漿可達到的臨床應用效果。方法 回顧性分析該站2014年全年2 062份冷沉淀制備成功率，并總結出一套冷沉淀全程質控方案，將實施后2015年全年2 271份冷沉淀制備成功率與實施前2014數據進行對比，分析質控方案效果。采取同一血樣分為3份，分別制備為新鮮冷凍血漿、普通冷凍血漿以及去冷沉淀血漿；分別測定3樣本中的凝血因子FV、FⅦ、FⅧ、FⅨ，纖維蛋白原及總蛋白數值并進行對比分析。結果 質控組冷沉淀制備合格率為99.91%，對照組冷沉淀制備合格率為75.02%，質控組冷沉淀制備合格率為99.91%，顯著高于對照組，P<0.01；新鮮冷凍血漿中FⅧ （64.3± 11.2）%、FⅨ（83.9±9.6）%、纖維蛋白原（2.8±0.9）g/L及總蛋白（59.8±5.7）g/L均明顯高于去冷沉淀血漿，P<0.05，普通冷凍血漿中FⅧ（59.6±15.2）%、FⅨ（80.3±11.5）%纖維蛋白原（2.6±0.7）g/L及總蛋白（58.6±4.8）g/L均明顯高于去冷沉淀血漿，P<0.05。 結論 冷沉淀制備過程全程嚴格質量控制可有效提高制備合格率，去冷沉淀血漿與新鮮冷凍血漿、普通冷凍血漿中的凝血因子FV、FⅦ、FⅧ、FⅨ，纖維蛋白原及總蛋白數值差異較大，因此去冷沉淀血漿在臨床應用中無法達到新鮮冷凍血漿、普通冷凍血漿的臨床效果，臨床上應根據具體情況選擇應用。

冷沉淀；全程質控；去冷沉淀血漿

冷沉淀是臨床中一種常見的血液制品，主要含有凝血因子FV、FⅦ、FⅧ、FⅨ，纖維蛋白原五項成分[1]。主要用于先天或繼發性的甲型血友病、手術與創傷后凝血功能障礙以及部分低纖維蛋白原血癥患者的臨床治療當中[2]。現將該院2014年1月—2015年12月間的冷沉淀制備數據進行具體分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

以該站2014年全年進行的2062份冷沉淀制備樣本作為對照組，總結2014年冷沉淀制備經驗后制定出一套全程質控方案，實施1年后以2015年全年進行的2 271份冷沉淀制備樣本作為質控組，對比兩組制備的冷沉淀制備成功率。同時隨機抽取45份符合《獻血者健康檢查要求》的全血樣本[3]，樣本每份300 mL，全部樣本采集過程順暢無污染，采集后以血液保存液Ⅱ行抗凝處理，采集后6 h內完成該次研究的全部后續操作。

1.2 設備試劑

凝血因子系列檢測使用CA-1 500全自動型凝血儀及專用試劑進行檢測，蛋白檢測使用NSA-400全自動型生化儀及專用試劑檢測，低溫融化設備使用科瑞特Cyto Therm CT-4 T的6℃低溫融化箱；新鮮冷凍血漿使用血漿速凍機制備，普通冷凍血漿使用低溫冰箱制備。

1.3 質控制備方法

確保全程冷鏈系統完備，樣本采集后置于2～6℃冰箱內儲存，需運輸的使用降溫后的血液專用保溫冷藏箱保存。于6 h內分離200 mL新鮮血漿，再取2份15 mL樣本，其中1份置入血漿速凍機內速凍至-50℃制備為新鮮冷凍血漿樣本，第2份置于4℃的低溫冰箱之中制備為普通冷凍血漿樣本，全過程中盡量避免或縮短樣本暴露時間。次日將200 mL新鮮冷凍血漿置入1～6℃的Cyto Therm CT-4T低溫融化箱中快速融化，以離心法進行血漿平衡離心。融化過程控制在99～120 min，觀察血漿融化至直徑2～3 cm左右、厚度約為1 cm左右冰塊時取出樣本，于4℃離心溫度下以4 000 r/離心15 min，分離取得上清去冷沉淀血漿，取20 mL白色沉淀物即為冷沉淀，迅速置入血漿速凍機冷凍，同時取15 mL去冷沉淀血漿樣本置入零下20℃冰箱內儲存。檢測新鮮冷凍血漿、普通冷凍血漿、去冷沉淀血漿中的凝血因子FV、FⅦ、FⅧ、FⅨ，纖維蛋白原及總蛋白含量，同時檢測冷沉淀當中的FⅧ及纖維蛋白數值。

1.4 質量標準

遵照GB18469-2012《全血及成分血質量要求》中冷沉淀凝血因子之相關質量標準執行，制備的每200 mL冷沉淀中FⅧ水平≥80 IU，纖維蛋白原水平≥150 mg，容量為標示量mL的±10%。

1.5 統計方法

使用SPSS 18.0統計學軟件進行數據計算，全部數據中計數資料采取χ2檢驗，用[n（%）]表示，計量資料采取均數t檢驗，用（±s）表示。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 質控方案實施前后對比

實施全程質控方案后質控組冷沉淀制備合格率為99.91%，實施前的對照組冷沉淀制備合格率為75.02%，質控組冷沉淀制備合格率顯著高于對照組，P＜0.01，差異有高度統計學意義。見表1。

表1 質控方案實施前后冷沉淀制備合格率統計對比[n（%）]

表2 3種血漿標本各項指標統計對比（±s）

表2 3種血漿標本各項指標統計對比（±s）

注：去冷沉淀血漿分別與其它兩種樣本對比，*為P＜0.05。

普通冷凍血漿去冷沉淀血漿89.7±11.8 86.9±13.9 96.1±12.9 93.2±11.5 (59.6±15.2)* 16.7±5.1 80.3±11.5 76.3±9.8 (2.6±0.7)* 2.0±0.5 (58.6±4.8)* 55.1±5.6

2.2 3種血漿標本各項指標統計對比

經測定新鮮冷凍血漿中FⅧ、FⅨ、纖維蛋白原及總蛋白含量明顯高于去冷沉淀血漿，P<0.05，差異有統計學意義；普通冷凍血漿中FⅧ、纖維蛋白原及總蛋白含量均明顯高于去冷沉淀血漿，P<0.05，差異有統計學意義。具體數據見表2。

2.3 冷沉淀檢測

經測定冷沉淀當中的FⅧ含量為(394.2±72.8)%，纖維蛋白原含量為(6.8±0.8)g/L。

3 討論

冷沉淀于二十世紀六十年代時被美國科學家Pool首先發現，當時主要應用于血友病的臨床治療當中[5]。近些年來冷沉淀的臨床應用已不再局限于纖維蛋白原與凝血因子缺乏導致的出血類疾病、傳統的甲型血友病等，在術后創傷、腫瘤手術、多發外傷、自發性氣胸、彌散性血管內凝血DIC、黏膜與皮膚病、糖尿病足以及深度燒傷等的臨床中也被廣泛應用，且應用效果理想[6]。冷沉淀是臨床上維持患者生命力不可或缺的一項治療手段[7]。冷沉淀當中的FⅧ因子十分不穩定，FⅧ在體內的生物半衰期具有較大變化，通常約為8～12 h，活性極易喪失。新鮮冷凍血漿融化后12 h內FⅧ活性可逐漸喪失42%，24 h后則可喪失44%[8]。冷沉淀正被越來越廣泛的應用于臨床治療當中[9]，因此冷沉淀的制備質量也越來越突顯其重要性。冷沉淀的制備過程中須進行嚴格質量把控。全血采集后應立即置于2～6℃條件下冷藏。新鮮血漿袋的容量應控制在<250 mL范圍內并統一容量，避免因容量不同使融化時間及速凍效果產生差異。采集后6 h內冰凍。低溫融化箱與離心機均應嚴格控制溫度，應于使用前達到要求溫度。

該次研究中新鮮冷凍血漿中FⅧ（64.3±11.2）%、FⅨ（83.9±9.6）%、纖維蛋白原（2.8±0.9）g/L及總蛋白（59.8±5.7）g/L均明顯高于去冷沉淀血漿，P<0.05，普通冷凍血漿中FⅧ（59.6±15.2）%、纖維蛋白原（2.6± 0.7）g/L及總蛋白（58.6±4.8）g/L均明顯高于去冷沉淀血漿，P<0.05。說明冷沉淀血漿中各項指標的含量與新鮮冷凍血漿、普通冷凍血漿差異較大。黎美君等[10]在相關研究中指出去冷沉淀血漿中FⅧ水平為（16.0± 5.3%、FⅨ水平為（75.5±9.9）%、纖維蛋白原為（2.1±0.3）g/L、總蛋白為（55.4±4.7）g/L，與該次研究結果去冷沉淀血漿中 FⅧ水平為（16.7±5.1）%、FⅨ水平為（76.3± 9.8）%、纖維蛋白原為（2.0±0.5）g/L、總蛋白為（55.1± 5.6）g/L相符。因此在臨床治療中如需補充FⅧ、FⅨ、纖維蛋白原及總蛋白時使用去冷沉淀血漿則無法達到治療效果，應用將去冷沉淀血漿與普通冰凍血漿區別標識，在臨床應用時區別使用。

綜上所述，在冷沉淀制備過程中可導致制備結果差異的環節很多，應嚴格執行操作規程及質量控制要求。有鑒于去冷沉淀血漿中各項指標與新血冷凍血漿的差異較大，應將不同血漿區別標識，臨床應用時應根據血漿內各項指標的含量特點區別應用，以提高臨床療效。

[1]曹鴻霖,劉詠梅,陳秀娟,等.冷沉淀制備過程中的關鍵因素探討[J].臨床輸血與檢驗,2015,17（2）:172-173.

[2]張湘.冷沉淀制備方法的改進[J].吉林醫藥學院學報,2012, 33（4）:256-257.

[3]袁小玲,吳杰敏,林桂芳,等.冷沉淀制備技術改進與臨床應用情況的研究[J].實驗與檢驗醫學,2014,32（3）:350-352.

[4]蘇紅,譚愛玲,許少英,等.冷沉淀制備的關鍵控制環節[J].中國醫學創新,2012,10（10）:144-145.

[5]郭博,陳麗,管政.冷沉淀的臨床應用[J].蚌埠醫學院學報, 2011,36（7）:765-766,769.

[6]魏曉娟.冷沉淀在臨床中的應用[J].檢驗醫學與臨床, 2013,10（2）:255-256.

[7]熊榮.冷沉淀的臨床應用分析[J].齊齊哈爾醫學院學報, 2014,35（19）:2893-2894.

[8]王萬仲,張雪,王艷.冷沉淀制備技術在血液成分制備中的臨床應用效果淺析[J].中國實用醫藥,2013,8（3）:268-269.

[9]王光敏,任思嫡,馬怡然,等.冷沉淀在心臟外科手術中的作用[J].血栓與止血學,2011,17（6）:269-271.

[10]黎美君,馬姍姍,夏代全,等.冷沉淀制備過程的質量控制和去冷沉淀血漿的臨床應用價值探討[J].檢驗醫學與臨床,2015,12（6）:819-820.

Quality Control of Preparation Process of Cold Precipitation and its Clinical Application Effect

JIANG Yong-hong
The Center and the Department of Blood Donors in Jilin City of Hunchun，Jilin Province，Hunchun，Jilin Province，133300 China

Objective To investigate the effect of cryoprecipitate preparation and clinical application of the quality control method of the whole.Methods A retrospective analysis of 2 062 cold precipitation for the year 2014 production success rate,and summed up a set of cryoprecipitate quality control scheme.Will be implemented after 2015,the year of 2 271 cold precipitation comparing with 2014 data prior to the preparation and implementation success rate,analysis quality control plan.Take the same blood sample was divided into three parts,respectively,for the preparation of fresh frozen plasma.The common cold and frozen plasma to precipitate plasma;three samples of coagulation factor FV,were measured by the FⅤ,FⅦ,FⅧ,FIX,fibrinogen and total protein values were compared and analyzed.Results The control group of cryoprecipitate preparation qualified rate is 99.91%,the control group cold precipitation preparation qualified rate is 75.02%,the control group,cryoprecipitate preparation qualified rate was significantly higher than the control group,P<0.01;In fresh frozen plasma FⅧ(64.3±11.2)%,FⅨ (83.9±9.6),fibrinogen(2.8±0.9)%g/L,and total protein (59.8±5.7)g/L were significantly higher than last year precipitation cold plasma,P<0.05,normal frozen plasma FⅧ(59.6±15.2)%,FⅨ（80.3±11.5）%fibrinogen（2.6±0.7）g/L and total protein（58.6±4.8）g/L content Were significantly higher than those in plasma cryoprecipitate.The conclusion of the P<0.05.Conclusion of cryoprecipitate preparation process of strict quality control can effectively improve the qualified rate,cryoprecipitate plasma and fresh

Cold sediment；Total quality control；Cold plasma；Plasma

R47

A

2096-1782（2016）11－0022-03

蔣永紅（1971.9-），朝鮮族，女，吉林琿春人，中專，主管護師，主要從事采血成分制備工作。

2016-08-15）

10.19368/j.cnki.2096-1782.2016.11.022

frozen plasma,ordinary frozen plasma coagulation factor FV,FVII,FⅧ,FIX,protein fiber and total protein numerical differences larger,and therefore to plasma cryoprecipitate in clinical application to fresh frozen plasma.The clinical effect of ordinary frozen plasma,clinical should be chosen according to the specific circumstances.