肺炎支原體肺炎合并肺外表現(xiàn)患兒外周血輔助性T細胞表達水平分析

陳小庚, 魏杰淼, 閆虹

?

臨床研究

肺炎支原體肺炎合并肺外表現(xiàn)患兒外周血輔助性T細胞表達水平分析

陳小庚, 魏杰淼, 閆虹

目的 分析肺炎支原體肺炎(MPP)合并肺外表現(xiàn)患兒外周血輔助性T細胞表達水平。方法 選擇2015年1月至12月在沈陽市兒童醫(yī)院門診就診或住院治療的MPP患兒97例，入選對象均在開始治療前接受了外周血輔助性T細胞(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)檢測，并與同期體檢結論正常兒童(對照組，35例)相同測試結果比較。結果 MPP組外周血CD3+、CD4+表達強度及CD4+/CD8+比值均明顯低于對照組，而CD8+水平則明顯高于后者，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。97例MPP患兒中，合并肺外表現(xiàn)者43例(44.33%)，合并肺外表現(xiàn)組外周血CD3+、CD4+水平、CD4+/CD8+比值均明顯低于無肺外表現(xiàn)組，而CD8+水平則明顯高于后者，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結論 MPP患兒存在著明確的外周血輔助性T細胞表達異常，合并肺外表現(xiàn)者變化更為顯著。

肺炎支原體肺炎； 肺外表現(xiàn)； 輔助性T細胞； 兒童

肺炎支原體(mycoplasma pneumoniae，MP)是中國兒童呼吸道感染極為常見的病原體，好發(fā)于幼兒及學齡前兒童。MP感染不但帶來了呼吸系統(tǒng)病變，還會引發(fā)肺外臟器損傷，甚至出現(xiàn)諸多臟器、系統(tǒng)共同受累，后者更易使肺炎支原體肺炎(mycoplasma pneumoniae pneumonia，MPP)病情呈現(xiàn)多元化、復雜化，發(fā)生臨床上的誤診、誤治[1-2]。新近認為[3-5]，MP發(fā)生和進展與人體內細胞免疫關系密切，MPP患兒是否合并肺外損傷的免疫學機制也有所不同，但迄今為止，國內專項涉及這方面內容報道不多。筆者連續(xù)選擇近一年在沈陽市兒童醫(yī)院門診就診或住院治療的MPP患兒97例，他們均在治療前接受了外周血輔助性T細胞(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)檢測，并按是否合并肺外損傷進行分組，并與同期體檢結論正常兒童(對照組，32例)相同檢查結果比較，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2015年1月至12月在沈陽市兒童醫(yī)院門診就診或住院治療的MPP患兒97例，其中男58例，女39例；年齡1～14歲，平均(6.03±2.94)歲。選取同期在本院健康體檢結論正常兒童35例為對照組，其中男22例，女13例；年齡1～14歲，平均(6.29±2.61)歲。兩組兒童的年齡和性別比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 診斷標準 參照《實用小兒呼吸病學》中MPP診斷標準[6]。

1.3 納入標準 (1)符合上述MPP診斷標準；(2)年齡≤14歲；(3)患兒家屬知情同意。

1.4 排除標準 (1)近期急、慢性感染性疾病患兒；(2)有心、肝、腎及神經(jīng)系統(tǒng)疾病史患兒；(3)近3個月接受激素或免疫抑制劑治療患兒。

1.5 外周血輔助性T細胞表達水平測定 入選對象均在空腹8 h后抽取靜脈血8 mL，高速離心10 min后，分離血清，保存于超低溫冰箱待檢。機器采用美國FC-500-MPL流式細胞儀，外周血輔助性T細胞(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)測定由海豐翔生物科技有限公司提供試劑盒，按照使用說明書規(guī)定步驟操作。

1.6 觀察指標 CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+比值。

2 結果

2.1 兩組對象外周血輔助性T細胞表達水平比較 見表1。

表1 兩組對象外周血輔助性T細胞表達水平比較

表1結果表明，MPP組外周血CD3+、CD4+表達強度及CD4+/CD8+比值均明顯低于對照組，而CD8+水平則明顯高于后者，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

2.2 有無肺外表現(xiàn)MPP患兒外周血輔助性T細胞表達水平表達水平比較 97例MPP患兒中，合并肺外表現(xiàn)者43例(44.33%)，無肺外表現(xiàn)者54例(55.67%)。有無肺外表現(xiàn)MPP患兒外周血輔助性T細胞表達水平比較見表2。

表2 有無肺外表現(xiàn)MP患兒外周血輔助性T細胞表達水平比較

表2結果表明，合并肺外表現(xiàn)組外周血CD3+、CD4+水平、CD4+/CD8+比值均明顯低于無肺外表現(xiàn)組，而CD8+水平則明顯高于后者，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

3 討論

各種T淋巴細胞是人體內免疫系統(tǒng)中發(fā)揮重要作用的細胞群，輔助性T細胞主要發(fā)揮免疫調節(jié)功能，其中CD4+協(xié)調B細胞完成分化，并產生抗體，而CD8+則抑制這類抗體合成、分泌及刺激T細胞增殖。迄今為止，MPP發(fā)病確切機制不完全明了，目前主要傾向于免疫調節(jié)紊亂學說，發(fā)生了免疫抑制及免疫逃逸現(xiàn)象。MP是介于細菌與病毒之間沒有細胞壁的一種原核細胞微生物，隨著各種診斷技術完善及提高，MPP患病率明顯上升，其主要癥狀為發(fā)熱、頭痛、咽痛及劇烈干性嗆咳，部分患者還伴有多系統(tǒng)及多器官肺外并發(fā)癥，且較多累及血液、消化、心臟、泌尿以及神經(jīng)系統(tǒng)。已有大量資料[7-10]證實，輔助性T細胞及其分泌的炎性細胞因子體內表達失常在MP呼吸道感染過程中扮演重要角色，并直接引發(fā)了患者呼吸系統(tǒng)免疫損傷；另一方面，MP抗原與人體宿主的心、肺、肝、腦、腎各主要臟器及平滑肌組織擁有相同抗原，MP入侵后產生了自身相應抗體，結合后形成免疫復合物，導致肺及肺外靶器官發(fā)生病變，加重了MPP病情。筆者連續(xù)選擇近一年在沈陽市兒童醫(yī)院門診就診或住院治療的MPP患兒為觀察對象，他們均在治療前接受了外周血輔助性T細胞(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)檢測，并按是否合并肺外損傷進行分組，并與同期體檢結論正常兒童(對照組，35例)相同檢查結果比較，研究發(fā)現(xiàn)，MPP組外周血CD3+、CD4+表達強度及CD4+/CD8+比值均明顯低于對照組，而CD8+水平則明顯高于后者；同時，合并肺外表現(xiàn)者外周血CD3+、CD4+水平、CD4+/CD8+比值均明顯低于無肺外表現(xiàn)組，而CD8+水平則明顯高于后者。這些數(shù)據(jù)均提示，MPP患兒存在著明確的外周血輔助性T細胞表達異常，其中，CD3+、CD4+及CD4+/CD8+表達明確低下，而CD8+表達增強，合并肺外表現(xiàn)者上述變化更為顯著。一些國內同行[11-14]通過免疫熒光和補體介導方法發(fā)現(xiàn)，急性期及肺外并發(fā)癥組MPP患兒體內CD3+、CD4+表達水平呈一過性降低，CD4+/CD8+比值顯著下降，抑制性T細胞(CD8+)表達明顯加強，這都說明，MPP患兒體內負免疫調節(jié)機制消弱，導致發(fā)生過度免疫反應。另幾位作者發(fā)現(xiàn)，將兩組缺少T細胞的SCID小鼠和免疫功能正常小鼠感染分別感染相同數(shù)量MP，后者的肺部癥狀明顯強于前者，這些提示決定MPP病情主要因素不是病原體本身而是T淋巴細胞功能狀態(tài)[15]。

總之，MPP患兒，特別是合并肺外表現(xiàn)者存在明顯的外周血相關輔助性T細胞表達低下或絕對量不足，這也可能是MPP發(fā)生機制之一，由此推論通過各種途徑補充及刺激機體增加輔助性T細胞，促進他們在體內表達平衡，就可能減輕患兒體內炎癥反應，并保護自身及清除病原，同時，這些細胞免疫體內表達狀態(tài)也可能成為MPP確診標識和評估療效參照指標。

[1]蔣健飛，趙德育.兒童肺炎支原體肺炎及其肺外并發(fā)癥[J].臨床肺科雜志，2011，16(5):750-752.

[2]PatraPK,ThirunavukkarasuAB.UnusualcomplicationofMycoplasmapneumoniaeinafive-year-oldchild[J].AustralasMed,2013,6(2):73-74.

[3]郁園園，陳志敏.肺炎支原體致病機制的研究進展[J].國際兒科學雜志,2008,35(3):222-224.

[4]張世杰,吳鳴.肺炎支原體感染與細胞因子變化研究進展[J].浙江中西醫(yī)結合雜志,2015,25(2):214-216.

[5]ShiF,KongBW,SongJJ,etal.UnderstandingmechanismsofvitiligodevelopmentinSmythlineofchickensbytranscriptomicmicroarrayanalysisofevolvingautoimmunelesions[J].BMCImmunol,2012,5(13):13-18.

[6]江載芳.實用小兒呼吸病學[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2010：240-246.

[7]ChoiIS，ByeonJH，YooY，etal.Increasedseruminterleukin-5andvascularendothelialgrowthfactorinchildrenwithacutemycoplasmapneumoniaandwheeze[J].PediatrPulmonol，2009，44(5)：423-428.

[8]王建國,鄢文海,蘇愛芳,等.肺炎支原體感染兒童細胞免疫功能的變化及其意義[J].臨床薈萃,2009,24(2):130-131.

[9]XinLH,WangJ,WangZ,etal.EffectofMycoplasmapneumoniaeinfectiononfunctionofTlymphocytesinbronchoalveolarlavagefluidofasthmaticchildren[J].ZhongguoDangDaiErKeZaZhi,2014,16(3):277-80.

[10]WangJY,ZhengJ,XingHY,etal.DeterminationofTh9cellsandIL-9inchildrenwithMycoplasmapneumoniaeinfection[J].中國當代兒科雜志,2015,17(4):308-311.

[11]王縛鯤，安黎云，陳晶，等.肺炎支原體肺炎患兒輔助性T細胞亞群和細胞因子檢測的臨床意義[J].臨床薈萃，2011，26(15):1329-1330.

[12]雷曄飛，譚金亮，陳曼平，等.肺炎支原體肺炎T細胞亞群免疫球蛋白水平變化的研究[J].中國當代兒科雜志，2005，7(4):329-330.

[13]李月華，雷宏濤，安文莉，等.支原體肺炎肺外并發(fā)癥患兒外周血紅細胞免疫功能及T細胞亞群改變[J].中國兒童保健雜志，2012，10(2):85-86.

[14]SunX,JonesHP,DobbsN,etal.DendriticcellsarethemajorantigenpresentingcellsininflammatorylesionsofmurineMycoplasmarespiratorydisease[J].PLoSOne,2013,8(2):e559-e564.

[15]DobbsNA,ZhouX,PulseM,etal.Antigen-pulsedbonemarrow-derivedandpulmonarydendriticcellspromoteTh2cellresponsesandimmunopathologyinlungsduringthepathogenesisofmurineMycoplasmapneumonia[J].JImmunol,2014,193(3):1353-1363.

(本文編輯：李志文)

Expression of T helper cells in peripheral blood of children with Mycoplasma pneumonia complicated with extrapulmonary manifestations

CHENXiaogeng，WEIJiemiao，YANHong.

TheChildrenHospitalofShenyang，Shenyang110032，China.

Objective To analyze the expression level of T helper cells in peripheral blood of children with Mycoplasma pneumonia complicated with extrapulmonary manifestations.Methods We detected the peripheral T helper cells(CD3+,CD4+,CD8+,CD4+/ CD8+)in the blood of the 97 selected continuous cases of children with Mycoplasma pneumoniae pneumonia before starting treatment,who received treatment in the Children Hospital of Shenyang from Jan.to Dec.2015,and compared with the results of the normal children on the medical conclusions at the same test in the same period(control group,n=35).Results The expression intensity of the peripheral CD3+,CD4+, and ratio of CD4+ /CD8+ of the Mycoplasma pneumoniae pneumonia group were significantly lower than the control group,while that of CD8+ was higher (P<0.05～ 0.01).In the 97 children with Mycoplasma pneumoniae pneumonia,43 cases had extrapulmonary manifestations(44.33%), and the CD3+level,the CD4+ level,CD4+ /CD8+ ration in the group with extrapulmonary manifestations were obviously lower than the group without extrapulmonary manifestations,while the CD8+ level was higher than the latter(P<0.05～0.01).Conclusion Peripheral blood helper T cells are abnormally expressed in children with Mycoplasma pneumonia;these abnormalities are more obvious in the patients complicated with extrapulmonary manifestations.

Mycoplasma pneumoniae pneumonia; Extrapulmonary manifestations; T helper cells； Child

110032沈陽,沈陽市兒童醫(yī)院內二科(陳小庚,閆虹),內五科(魏杰淼)

陳小庚(1978-),女,主治醫(yī)師。研究方向:小兒感染性肺疾病診斷及治療

陳小庚,E-mail:13889380301@163.com

10.3969/j.issn.1674-3865.2016.05.022

R725.6

A

1674-3865(2016)05-0525-03

2016-05-12)