HPLC法測定安樂片中阿魏酸的含量

張 慧

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HPLC法測定安樂片中阿魏酸的含量

張 慧

目的 建立安樂片中阿魏酸的含量測定方法。方法 采用高效液相色譜法，色譜條件：乙腈-1%醋酸(14:86)為流動相；流速：1.0 ml/min，檢測波長：320nm。結果 阿魏酸進樣量在0.03648～0.32832μg范圍內，線性關系良好，r=0.9998；回收率在95.51～99.04%之間，RSD為1.61%。結論 該方法穩定，結果準確。

高效液相色譜法；安樂片；阿魏酸

安樂片為中華人民共和國衛生部藥品標準中藥成方制劑第二冊收載品種(書頁號：Z2-104；標準編號：WS3-B-0274-90)[1]。安樂片是由柴胡、當歸、川芎、茯苓、鉤藤、何首烏藤、白術(麩炒)、甘草等八味中藥材加工制成，具有疏肝解郁、定驚安神的作用。用于精神抑郁、驚恐失眠、胸悶不適、納少神疲。當歸、川芎為方中主藥，具有較強的協同作用。阿魏酸是當歸和川芎共有的有效成分之一，它是一種有機酸，可用高效液相色譜法測定其總量。經方法學考察，本方法的線性、精密度、穩定性、重復性、回收率試驗均符合規定，故確立本制劑的定量方法為高效液相色譜法測定阿魏酸的含量。

1 儀器與所用試劑

1.1 儀器 SHIMADZU-10Avp 液相色譜儀，N2000 工作站。

1.2 試劑 阿魏酸對照品由中國藥品生物制品檢定所提供(批號0773-9910)；安樂片由四川琦云藥業有限責任公司生產；乙腈為色譜純；其它試劑為分析純。

2 方法與結果

2.1 測定波長的確立 經繪制阿魏酸紫外吸收圖譜，阿魏酸在320nm處有最大吸收[2]，故確立320nm為本品中阿魏酸含量測定的波長。

2.2 流動相篩選 對比了乙腈-0.085% 磷酸溶液(17：83)[3]和乙腈-1%醋酸溶液(15：85)[4]對本品中阿魏酸分離的影響，乙腈-1%醋酸溶液(14：86)對阿魏酸分離的效果好于乙腈-0.085% 磷酸溶液(17：83)，因此確定乙腈-1%醋酸(14:86)為本實驗中阿魏酸含量測定的流動相。

2.3 色譜條件 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相：乙腈-1%醋酸(14:86)；流速：1.0 ml/min；檢測波長：320 nm。

2.4 對照品溶液的制備 精密稱取阿魏酸對照品18.24 mg，置10 ml棕色量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密吸取1 ml，置棕色100 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，制成每1 ml含18.24 μg的溶液。

2.5 供試品溶液的制備 取本品20片，除去包衣，研細，取約2 g，精密稱定，精密加入1%甲酸甲醇溶液25 ml，密塞，稱定重量，超聲處理30分鐘，再稱定重量，用1%甲酸甲醇溶液補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得[5]。

2.6 線性范圍考查 分別精密吸取對照品2μl、6μl、10μl、14μl、18 μl溶液，注入液相色譜儀中，測定色譜峰面積，以阿魏酸對照品進樣量為橫坐標，色譜峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，回歸方程為：y=2229986.29x+1899.10,r=0.9998。阿魏酸對照品進樣量在0.03648～0.32832μg范圍內線性關系良好。測定結果見表1。

表1 阿魏酸對照品線性范圍考察結果

2.7 精密度試驗考查 精密吸取對照品溶液10μl，連續進樣6次，測定色譜峰面積，阿魏酸對照品溶液精密度試驗符合規定。測定結果見表2。

2.8 穩定性試驗考查 精密吸取供試品液10 μl，每間隔1小時進樣1次，測定色譜峰面積，阿魏酸色譜峰峰面積積分值基本一致,RSD為1.13%。說明供試品在4小時內具有良好的穩定性。測定結果見表3。

表2 精密度試驗結果

表3 穩定性試驗結果

2.9 重復性試驗考查 取本品2 g，精密稱定，共取6份，分別按供試品溶液制備項下方法操作，測定色譜峰面積，計算含量，阿魏酸含量重復性試驗符合規定。測定結果見表4。

表4 重復性試驗結果

2.10 回收率試驗考察 取本品1 g，精密稱定，共取6份，精密加入阿魏酸對照品溶液(0.274 mg/ml)1 ml，按供試品溶液制備項下方法操作，測定色譜峰面積，計算，阿魏酸回收率在95.51～99.04%之間，RSD為1.61%，符合規定。測定結果見表5。

表5 回收率試驗結果

3 討論

本品采用高效液相色譜法測定阿魏酸的含量，方法穩定，結果準確，可作為該制劑的質量控制方法。

[1] 中華人民共和國衛生部藥典委員會. 中藥成方制劑[S].中華人民共和國衛生部，1990:104.

[2] 張玉愛，吳澤榕，鄭起平，等.HPLC測定養血當歸軟膠囊中阿魏酸的含量[J].中成藥，2006，28(4)：599-600.

[3] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部) [M].北京:中國醫藥科技出版社，2010:124.

[4] 謝先吉，王臨潤，吳文娟.通經口服液中阿魏酸含量測定方法的研究[J].藥物分析雜志，2005，25(8)：992-993.

[5] 容蓉，袁久榮，王學志.HPLC測定四物湯及其配伍組方中阿魏酸的煎出量[J]. 中國藥學雜志，2000，11，35(11)：767-768.

Content Determination of Ferulic Acid in Anle Tablet by HPLC

ZHANG Hui

(Department of Pharmacy, Shenyang Second Hospital of Traditional Chinese Medicine, Liaoning, Shenyang 110101, China)

Objective To develop a method for content determination of ferulic acid in Anle tablet. Method Using HPLC method, the mobile phase was a mixture of acetonitrile-1% acetic acid (14:86). The flow rate was 1.0ml/min with the detection wavelength at 320nm. Result The injection volume of ferulic acid was in the range of 0.03648 ～ 0.32832 μg. The linear relationship was good, r=0.9998. The recovery was between 95.51～99.04%. RSD was 1.61%. Conclusion The method was stable, and the result was accurate.

High performance liquid chromatography; Anle tablet; Ferulic acid

遼寧省沈陽市第二中醫醫院藥劑科(沈陽 110101)

10.3969/j.issn.1003-8914.2016.06.020

1003-8914(2016)-06-0796-02

?秀琴

2015-08-03)