重癥監護病房病原微生物培養及藥敏分析

毛 煒， 黃春華， 賴永才

·論著·

重癥監護病房病原微生物培養及藥敏分析

毛 煒， 黃春華， 賴永才

目的 了解重癥監護病房（ICU）患者感染主要病原菌株及其藥敏情況，為臨床合理應用抗菌藥物提供依據。方法 對2013年1月－2015年10月ICU送檢的5 263份患者標本進行培養和菌株分析。使用法國生物梅里埃VITEK 2- Compact全自動、ATB-Expression半自動細菌鑒定及藥敏分析儀進行鑒定及藥敏試驗。結果 共培養出1 307株菌株。其中革蘭陰性菌1 061株（81.2 %），革蘭陽性菌191株（14.6 %），真菌55株（4.2 %）；其中以腸桿菌科細菌和葡萄球菌為主。結論 ICU患者感染以革蘭陰性菌為主，可早期針對性用藥。

微生物培養； 病原菌微生物； 藥敏試驗； 重癥監護病房

感染性疾病是臨床常見且治療比較棘手的疾病類型，血流感染更是臨床比較嚴重的感染性疾病，國內外報道近年呈上升趨勢[1-2]。感染性疾病的細菌種類根據不同地域和不同時間而發生變化，實際工作中同時結合臨床表現和多種檢測指標可以更好判斷感染[3]。在醫院統計中，重癥監護病房（ICU）細菌耐藥率明顯高于普通病房[4]。為了解我院ICU在一定時間范圍內細菌感染的分布特點和耐藥情況，為臨床醫師特別是ICU醫師規范、合理使用抗菌藥物提供依據，本研究對簡陽市人民醫院ICU送檢的培養標本，系統回顧分析細菌檢出種類及其耐藥情況。結果如下。

1　材料與方法

1.1標本來源

2013年1月－2015年10月，我院ICU送檢的有感染癥狀患者的培養標本5 263份，共檢出病原菌1 307株，陽性率24.8 %（剔除重復培養菌株）。

1.2細菌培養和鑒定

根據《全國臨床檢驗操作規程》（第3版）[5]和美國臨床和實驗室標準化協會（CLSI）要求，規范采集各種樣本送檢，非血培養標本接種后放入二氧化碳培養箱進行相應病原菌培養。使用血培養儀進行血液培養、細菌鑒定及藥敏分析系統進行菌株鑒定及藥敏試驗，根據CLSI標準判斷藥敏試驗結果[6]。

質控菌株為腐生葡萄球菌ATCC 75713、金黃色葡萄球菌（金葡菌）ATCC 25923、產酸克雷伯菌ATCC 700324和大腸埃希菌ATCC 25922。

1.3儀器及試劑

BACT/ALERT 3D全自動血培養儀，VITEK 2-Compact全自動、ATB-Expression半自動細菌鑒定及藥敏分析儀均為法國生物梅里埃公司產品，梅里埃公司配套鑒定、藥敏試劑卡。

血瓊脂平皿、麥康凱瓊脂平皿、萬古霉素巧克力瓊脂平皿、HIN巧克力瓊脂平皿、血培養瓶為法國生物梅里埃公司產品。藥敏紙片為杭州天和試劑公司產品。

1.4統計分析

數據采用WHONET 5.6進行分析。

2　結果

2.1細菌構成

5 263份標本培養出菌株1 307株，陽性率為24.8 % ， 其中，革蘭陰性菌1 061株（81.2 %），革蘭陽性菌191株（14.6 %），真菌55株（4.2 %）。檢出菌以腸桿菌科細菌和葡萄球菌為主。所有陽性標本經分離培養均為單一細菌感染。主要送檢標本以痰、血液、分泌物和尿液為主，檢出細菌構成主要為鮑曼不動桿菌、大腸埃希菌等，見表1。

2.2藥敏結果

檢出的主要革蘭陰性菌、陽性菌的耐藥結果見表2、表3。由統計可知，革蘭陰性菌耐藥率較高，尤其是鮑曼不動桿菌和銅綠假單胞菌對頭孢唑林、頭孢替坦和頭孢曲松耐藥率在80 %以上，對氨芐西林和部分頭孢菌素類100 %耐藥。鮑曼不動桿菌對頭孢他啶和頭孢吡肟耐藥率也高達85.0 %，對碳青霉烯類、氟喹諾酮類、酶抑制劑復合制劑、氨基糖苷類耐藥率均較高，基本大于80 %，僅對左氧氟沙星和甲氧芐啶-磺胺甲唑耐藥率低于25 %。銅綠假單胞菌對頭孢他啶和頭孢吡肟耐藥率低于10 %，對氨基糖苷類、氟喹諾酮類、碳青霉烯類耐藥率在40 %左右。大腸埃希菌和腸桿菌屬對氨芐西林、氨芐西林-舒巴坦、頭孢曲松耐藥率在50 %以上，對頭孢他啶耐藥率低于40 %，對碳青霉烯類耐藥率低于10 %。奇異變形桿菌對頭孢曲松、環丙沙星、亞胺培南、呋喃妥因、甲氧芐啶-磺胺甲唑耐藥率高于50 %。在革蘭陽性菌中金葡菌和凝固酶陰性葡萄球對常用抗菌藥物青霉素、紅霉素、克林霉素的耐藥率超過70 %，金葡菌對氟喹諾酮類耐藥率低于凝固酶陰性葡萄球菌，但對甲氧芐啶-磺胺甲唑耐藥率近60 %，高于凝固酶陰性葡萄球菌，未發現耐萬古霉素菌株。腸球菌屬對青霉素類、氟喹諾酮類、大環內酯類耐藥率大于70 %，對呋喃妥因、替卡西林耐藥率低，未發現萬古霉素耐藥腸球菌（VRE）。

表1　1 307株微生物的菌種構成Table 1 Distribution of 1 307 strains of microorganisms isolated from infections

3　討論

我院ICU病原菌檢出率為24.8 %，陽性率低于相關報道[7]，可能與送檢標本類型占比相關。主要以革蘭陰性菌為主，與河南、山東等報道一致[8-9]。其中，細菌在血培養中的陽性檢出率在15 %左右，與浙江地區ICU血流感染情況相比略低或相近[10-11]，略低于遼西地區ICU血培養陽性率[12]。主要致病菌與遼西地區報道相近，與浙江地區存在一定差異[10，13]。早年有文獻指出主要致病菌國內國外不同，而且檢出菌種的構成比隨年代推移也會出現變化[14]。在本組血培養陽性細菌中，大腸埃希菌為最常見檢出細菌（68株，29.7 %），其次為凝固酶陰性葡萄球菌（62株，27.1 %），與國外ICU報道主要病原菌一致[15]。我院ICU中，引起感染的主要致病菌是鮑曼不動桿菌和大腸埃希菌；凝固酶陰性葡萄球菌也明顯高于其他菌種。鮑曼不動桿菌和銅綠假單胞菌對大多數頭孢菌素類抗菌藥物耐藥，鮑曼不動桿菌在ICU中檢出率較高，且耐藥情況嚴重，與抗菌藥物大量應用，患者免疫力低下，呼吸道防御屏障受損相關[16]。大腸埃希菌對氨芐西林、甲氧芐碇 -磺胺甲唑耐藥率已超過75 %，未發現對亞胺培南耐藥大腸埃希菌。而按照衛生行政部門對抗菌藥物使用的預警機制[17]，在革蘭陰性桿菌感染的經驗性用藥時應引起高度重視。革蘭陰性桿菌的耐藥率接近相關文獻報道[18]。

表2　主要革蘭陰性菌對抗菌藥物的敏感率和耐藥率Table 2 Susceptibility of gram negative bacteria to antibiotics（%）

表3　主要革蘭陽性菌對抗菌藥物的敏感率和耐藥率Table 3 Susceptibility of gram positive bacteria to antibiotics（%）

在革蘭陽性病原菌中金葡菌和凝固酶陰性葡萄球菌對青霉素、紅霉素的耐藥率超過70 %，且凝固酶陰性葡萄球菌耐藥率高于金葡菌，與相關文獻報道血培養病原菌耐藥情況接近[2,19]，尚未發現耐萬古霉素的葡萄球菌。耐藥分析可見，檢出病原菌對青霉素、苯唑西林、氨芐西林、紅霉素這些常用抗菌藥物耐藥率較高，表明這些藥物不宜作為首選治療藥物。而耐藥率較低的氨基糖苷類和碳青霉烯類因其不良反應一般不首選用于臨床抗感染，但針對多重耐藥菌株所致的重度感染，仍是較好選擇。因此，要合理規范使用抗菌藥物，須在使用抗菌藥物前采集標本進行細菌培養及藥敏試驗。同時，在細菌培養結果出來之前，可根據本院微生物實驗室發放的相關細菌耐藥情況統計，有針對性地進行經驗治療，合理應用抗菌藥物，減少耐藥菌的產生。微生物實驗室也應在第一時間通知臨床，有效縮短臨床醫師使用有效抗菌藥物的時間延遲[20]，定期為臨床提供細菌耐藥數據及分析對臨床合理使用抗菌藥物起著至關重要的作用。

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Culture and?antimicrobial susceptibility of pathogenic microorganisms in ICU

MAO Wei, HUANG Chunhua, LAI Yongcai. （Department of Laboratory Medicine, Jianyang People's Hospital, Jianyang Sichuan 641400, China）

Objective To investigate the profi le of pathogenic microorganisms and their susceptibility pattern in intensive care unit. Methods The microbiological data of 1 307 positive cultures in ICU of our hospital during the period from January 2013 to October 2015 were analyzed. The pathogens were identifi ed and subjected to susceptibility testing with VITEK 2- Compact or ATBExpression. Results Of the 5 263 samples, 1 307 bacterial strains were isolated, including 1 061 strains of gram-negative bacteria (81.2 %), 191 strains of gram-positive bacteria (14.6 %), and 55 strains of fungus (4.2 %). Conclusions Gram-negative bacteria, especially Enterobacteriaceae, are the main pathogens of infection in ICU. We can use antimicrobial agents empirically to target such pathogens.

microbiological culture; pathogenic microorganism; antimicrobial resistance; intensive care unit

R378

A

1009-7708 ( 2016 ) 06-0747-04

10.16718/j.1009-7708.2016.06.012

四川省簡陽市人民醫院檢驗科，四川簡陽 641400。

毛煒（1980—），男，學士，主管檢驗師，主要從事臨床微生物檢驗。

毛煒，E-mail：312399429@qq.com。

2015-11-09

2016-04-29