P53在結節性甲狀腺腫合并甲狀腺癌中的表達及其相關性研究

沈育鋒 胡 海

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P53在結節性甲狀腺腫合并甲狀腺癌中的表達及其相關性研究

沈育鋒 胡 海

目的 探討結節性甲狀腺腫合并甲狀腺癌患者中P53的表達及其臨床意義。方法 對70例結節性甲狀腺腫合并甲狀腺癌標本,采用免疫組織化學SP法檢測P53表達，并與同期77例單純結節性甲狀腺腫組織的P53表達情況進行對比分析。結果 在甲狀腺腫合并甲狀腺癌中P53陽性表達率為47.14%(33/70)，單純結節性甲狀腺腫中其陽性表達率為10.39%(8/77)，兩組差異有顯著性(P<0.05)。在單純結節性甲狀腺腫組及甲狀腺腫合并甲狀腺癌組中，年齡<50 歲與>50歲者P53陽性率比較均無顯著性差異(P>0.05)。甲狀腺腫合并甲狀腺癌70例患者中腫瘤直徑<3 cm及>3 cm的患者P53陽性率分別為39.02%、58.62%，有淋巴結轉移與無淋巴結轉移患者P53陽性率分別為59.26%、39.53%，兩者均無顯著差異性(P>0.05)。結論 P53表達在結節性甲狀腺腫患者的甲狀腺癌發生發展過程中具有特異性作用，對于結節性甲狀腺腫合并甲狀腺癌的診療具有重要意義。

P53；結節性甲狀腺腫；甲狀腺癌

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:1590～1592)

我國結節性甲狀腺腫發病率一直處于較高的水平，其中結節性甲狀腺腫與甲狀腺癌并存的報道越來越常見。本研究對P53本研究對70例甲狀腺腫合并甲狀腺癌患者P53的表達及其與臨床特征的相關性進行分析，探討P53在甲狀腺腫合并甲狀腺癌患者的診治中的臨床意義。

1 材料與方法

1.1 研究對象

收集我院 2013年1月至2015年6月的甲狀腺腫合并甲狀腺癌患者手術的石蠟包埋病理標本70 例，所有患者均經病理檢查證實，且前均未接受行放、化療治療。其中男性23例，女性47例。年齡22～75歲，平均(46.1±10.4)歲。其中乳頭狀癌37例、濾泡狀癌10例、混合型癌11例、未分化癌12例。腫瘤 TNM 分期：Ⅰ、Ⅱ期共49例，Ⅲ、Ⅳ期21例。選取同期良性結節性甲狀腺腫取得手術病理標本 的75例患者作為對照組，其中20例男性，55例女性，年齡 24～73歲，平均(52.12±17.87)歲。

1.2 方法

采用組織鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶法(SP法)免疫組化染色，其中試劑盒來自福州邁新生物技術公司，嚴格按照說明書進行操作。將組織標本制備成4連續切片，經烘烤、二甲苯脫蠟、3%過氧化氫滅活內源性過氧化物酶后微波修復抗原、封閉。滴加特異性一抗，4 ℃孵育過夜；依次滴加生物素標記的二抗、鏈霉菌抗生物素蛋白過氧化酶復合物三抗。采用二氨基聯苯胺 (DAB)顯色10 min 后蘇木精復染、梯度酒精脫水、二甲苯透明[1]。中性樹膠封片，顯微鏡下觀察 。

1.3 療效評價標準[2]

P53 表達于胞核，以出現棕黃色為陽性，以陽性細胞數百分比進行等級區別，采用雙盲閱片法半定量觀察。陽性細胞百分比<25%為(+)，25%～50% 為(++)，>50% 為(+++)，無陽性細胞或陽性細胞百分比<5%為(-)。

1.4 統計學分析

應用SPSS 21.0統計軟件進行數據整理及數據分析， 定性檢測陽性表達率采用百分比表示，組間比較采用檢驗，P<0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 2組患者P53表達陽性率的比較

P53mRNA 在甲狀腺腫合并甲狀腺癌中陽性表達率為47.14%(33/70)，在甲狀腺腫合并甲狀腺癌中陽性表達率為10.39%(8/77);兩組P53表達率比較差異有顯著性(P<0.05)，乳頭狀癌、濾泡狀癌、混合型癌、未分化癌陽性表達率分別為13.52%、80.00%、81.82%、91.66%，見表1。

表1 2組患者P53表達陽性率的比較/例

2.2 2組P53表達水平與患者年齡的關系比較

在單純結節性甲狀腺腫組中年齡<50 歲和>50歲P53陽性率分別為 12.50%和 8.10%，兩者比較無顯著性差異(P>0.05);甲狀腺腫合并甲狀腺癌上述兩個年齡患者P53陽性率分別為47.37%和46.88%，兩者差異亦無顯著性(P>0.05)，具體見表2。

表2 兩組患者P53表達水平與患者年齡的關系/例

2.3 P53表達與腫瘤大小的關系

70例甲狀腺腫合并甲狀腺癌組患者中腫瘤直徑<3 cm及>3 cm患者P53陽性率分別為39.02%、58.62%，兩者比較差異無顯著性(P>0.05)；有淋巴結轉移與無淋巴結轉移患者P53陽性率分別為59.26%、39.53%，兩者差異亦無顯著性(P>0.05)，見表3。

表3 P53表達與腫瘤大小及淋巴結轉移的關系/例

3 討論

結節性甲狀腺腫已經不僅僅被認為是1種良性甲狀腺病變，許多研究證實結節性甲狀腺腫與甲狀腺惡性病變之間的關系明顯，甚至在結節性甲狀腺腫增生的結節中可觀察到惡性病變的發生[3-4]。近年來關于結節性甲狀腺腫合并甲狀腺癌的報道也不在少數。然而，由于甲狀腺癌患者在早期并沒有非常明顯的癥狀，且其主要臨床表現與結節性甲狀腺腫相似，超聲檢查對于結節性甲狀腺腫合并甲狀腺癌的早期確診中無特異性，確診率比較低[5]。致使部分已經合并甲狀腺癌的結節性甲狀腺腫患者常因手術范圍不夠而需接受2次手術。臨床上對于結節性甲狀腺腫的惡性轉化的早期確定非常重視，因此有必要尋找鑒別診斷結節性甲狀腺腫合并甲狀腺癌的特異性標志物。P53 基因定位于17號染色體短臂1區3.1帶，幾乎表達于所有有核細胞，以編碼特定的磷酸核蛋白，但均是處于較低水平，而在癌細胞和轉化細胞中可達100倍。P53基因可以通過激活或抑制一系列基因,使腫瘤細胞周期阻滯,抑制腫瘤細胞放射損傷的修復,促進腫瘤細胞的凋亡，抑制癌細胞生長。

結節性甲狀腺腫增生結節的促甲狀腺激素長期刺激引起甲狀腺內部分濾泡上皮增生或乳頭狀增生，可能發生惡化[6]，研究指出在甲狀腺腫增生結節中出現RET/PTC重排和RAS突變[7]。因此，結節性甲狀腺腫伴增生結節很有可能是甲狀腺癌的癌前病變。當結節性甲狀腺腫癌變一段時間后甲狀腺癌快速生長，發展為結節性甲狀腺腫合并甲狀腺癌。多項研究已經明確證明了P53 基因在DNA復制水平上調節細胞的正常生長的重要作用，是細胞生長的重要的調節因子。本研究發現，結節性甲狀腺腫合并增生結節P53的陽性率明顯高于單純結節性甲狀腺腫，提示結節性甲狀腺腫合并增生結節時已經開始進行細胞增殖，進而通過演變轉化為惡性，有助于判別良性與惡性甲狀腺腫瘤[8]。

P53基因有野生型和突變型兩種，前者在細胞周期的調控、維持正常細胞生長及抑制腫瘤增殖方面具有重要意義，但當野生型P53過渡表達時則激活相關基因使其轉變為突變型P53基因，失去其原有的抑制細胞生長的作用[9]。結節性甲狀腺腫惡變的機制可能與TSH等因子刺激促使正常細胞成為潛伏性瘤細胞，最終形成克隆。克隆之后在多種刺激信號導致P53基因的過度表達與轉化， P53表達過渡上升，反而促進細胞轉化與增殖生長，導致腫瘤的發生逐步形成惡性表型。P53表達與患者年齡、腫瘤直徑、淋巴結轉移等臨床特征無關，這與相關研究結果一致[10],提示結節性甲狀腺腫患者的甲狀腺組織異型增生、早期惡變的傾向與患者臨床特征的相關性不大。

P53具有調控細胞生長、促進腫瘤細胞的凋亡，抑制癌細胞生長的作用。P53的表達在結節性甲狀腺腫患者的甲狀腺癌發生發展過程中具有特異性標志作用，在結節性甲狀腺腫合并甲狀腺癌患者中的表達明顯增加，對于結節性甲狀腺腫合并甲狀腺癌的診療具有重要意義。

[1] 應 蓉,趙詠桔,李鳳英.P53、P73蛋白在甲狀腺乳頭狀癌中表達的意義〔J〕.診斷學理論與實踐,2009,8(3):325-328.

[2] 徐美榮,許建成,陳 云,等.RASSF1A、CK19 和P53在甲狀腺良惡性病變中的表達及臨床意義〔J〕.實用癌癥雜志,2010,25 (6):583-586.

[3] 張鴿文,朱斯維,王志明.結節性甲狀腺腫合并甲狀腺癌的診斷與治療〔J〕.中國普通外科雜志,2010,19 (5):467-470.

[4] 米泰宇,劉開坤.結節性甲狀腺腫合并甲狀腺癌的臨床分析〔J〕.中國普通外科雜志,2011,20(9):979-980.

[5] 吳曉徽,陸漢魁,高云朝.甲狀腺球蛋白的測量及臨床應用價值〔J〕.標記免疫分析與臨床,2008,15(5):325-327.

[6] 馮聯忠,于吉人,李 斌,等.結節性甲狀腺腫并存甲狀腺癌86例回顧性分析〔J〕.全科醫學臨床與教育,2011,9 (1):63-65.

[7] Arora N,Scognamiglio T,Zhu B,et al.Do benign thyroid noduleshave malignant potential An evidence-based review〔J〕.World J Surg,2008,32(7):1237-1246.

[8] 張麗華,侯振江.P53基因在肺癌研究中的進展〔J〕.臨床肺科雜志,2006,11(1):59-60.

[9] 張緒良，黃丹青，周俊偉.VEGF和P53在甲狀腺癌中的表達及臨床意義〔J〕.臨床和實驗醫學雜志,2015,14(18):1509-1511.

[10] 裘良斌,王軍森,王 平.P53和ret在不同類型甲狀腺腫瘤中的表達及其臨床意義〔J〕.腫瘤學雜志,2012,18(8):618-621.

(編輯：吳小紅)

P53 Expression in Nodular Goiter with Thyroid Cancer and Their Correlation

SHENYufeng,HUHai.

ShanghaiEastHospitalAffiliatedtoTongjiUniversity,Shanghai,200120

Objective To explore the expression of p53 and clinical significance in the nodular goiter complicated with thyroid carcinoma.Methods Selected 70 cases of nodular goiter with thyroid cancer,and use immunohistochemical SP method to detect P53 expression.And it was analyzed and compared with P53 expression of 77 cases of nodular goiter.Results The p53 mRNA positive expression rate in goiter complicated with thyroid carcinoma group was 47.14%(33/70),while the positive rate in the pure nodular goiter group was 10.39%(8/77),and there was significant differences between the 2 groups (P<0.05).In pure nodular goiter group and thyroid goiter merger carcinoma group,the difference of P53 positive rate between patients less than 50 and over 50 was not significant (P>0.05).Among 70 cases of patients with goiter with thyroid carcinoma,the P53 positive rates of patients with diameter of tumor less than or equal to 3 cent and more than 3 cent were 39.02% and 58.62% respectively.The P53 positive rates of patients with lymph node metastasis and without were 59.26% and 39.53% respectively,the differences were no significant (P>0.05).Conclusion The p53 expression of nodular goiter with thyroid carcinoma has a specific role in the process of disease progression,which is of great significance for the diagnosis of nodular goiter with thyroid cancer.

P53;Nodular goiter;Thyroid cancer

200120 上海同濟大學附屬東方醫院

胡 海

10.3969/j.issn.1001-5930.2016.10.007

R73-36

A

1001-5930(2016)10-1590-03

2015-09-07

2016-06-20)