維吾爾藥艾克熱布蜜膏與散劑溶出度比較

李建梅 竇 勤 希爾艾力·吐爾遜

新疆維吾爾自治區維吾爾醫藥研究所維吾爾醫方劑學重咖實驗室，新疆烏魯木齊830049

維吾爾藥艾克熱布蜜膏與散劑溶出度比較

李建梅 竇 勤 希爾艾力·吐爾遜

新疆維吾爾自治區維吾爾醫藥研究所維吾爾醫方劑學重咖實驗室，新疆烏魯木齊830049

目的建立艾克熱布蜜膏中胡椒堿溶出度的測定方法，考察蜜膏與散劑中胡椒堿的溶出度情況。方法采用高效液相色譜法進行含量測定，色譜條件為Fusion-RPC18（4.6mm×250mm，4μm），流動相為甲醇-水（65：35），檢測波長為343 nm，流速為1.0 mL/min；以胡椒堿累積溶出率為考察指標，篩選溶出度測定條件，計算胡椒堿的累積溶出率。結果溶出度測定條件為槳法，轉速100 r/min，以純水為溶出介質。蜜膏劑中胡椒堿在60min時溶出達90%，120 min時幾乎全部溶出。散劑中胡椒堿在60min時溶出60%，120min時溶出90%。結論散劑中胡椒堿較蜜膏劑溶出度速度快。

蜜膏劑；散劑；胡椒堿；溶出度

蜜膏劑（買朱尼）是維吾爾醫藥傳統制劑中極具特色的一種劑型。目前在收載的中華人民共和國衛生部藥品標準《維吾爾藥分冊》中的78個成方制劑中，有9個為蜜膏制劑，占維藥部頒標準制劑總數的10.3%［1］。對維吾爾藥蜜膏劑本身而言，輔料主要是蜂蜜，占蜜膏類藥品總量的50%～70%［2］，蜂蜜對蜜膏劑中藥材在可能產生的影響作用研究尚屬空白。

艾克熱布蜜膏是新疆維吾爾自治區和田地區維吾爾醫醫院在臨床使用20多年的；內制劑（處方來源于維吾爾醫經典名方《卡拉巴丁·卡地爾》，該著作距今265年，至今仍臨床使用）［3］，由全蝎、歐龍膽、蓽茇、黑胡椒、干姜、錦燈籠、海貍香7味藥材組成。具有開通阻滯、化石排石的功效，臨床用于異常體液質引起的急慢性前列腺炎、前列腺肥大、尿急、尿痛等癥。該制劑為藥材全方粉碎入藥后與煉蜜混勻制成，本實驗對艾克熱布蜜膏和艾克熱布散劑同一組方的兩種劑型的體外溶出度進行研究，旨在通過比較制劑主要成分胡椒堿的溶出度結果，探討蜂蜜在蜜膏劑中對藥材的釋放程度和行為的影響，以期為后續考察蜂蜜對胡椒堿藥動學行為的影響作用提供數據，為維吾爾藥蜜膏劑傳統工藝的研究提供科學有效的理論依據。

1 器與試藥

1.1 儀器

ZRS-8G智能溶出試驗儀（天津大學無線電廠），Waterse2695高效液相色譜儀及化學工作站，Waters 2489二極管陣列檢測器，Empower數據采集系統（美國沃特斯公司）；Milli-Q超純水純化系統（18MΩ，Millipore公司）；SECURA3102-1CN、SECURA124-1CN電子天平（賽多利斯科學儀器有限公司）；SK8210HP超聲波清洗儀（上海科導超聲儀器有限公司）；DFT-200手提式高速萬能粉碎機（溫嶺市林大機械有限公司）；DZTW調溫電熱套（北京市永光明醫療儀器有限公司）。

1.2 試藥

胡椒堿對照品（中國食品藥品檢定研究；，批號：0775-200203），艾克熱布蜜膏與散劑為自制。甲醇和乙腈為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。

2 法與結果

2.1 制劑制備

2.1.1 艾克熱布蜜膏的制備按處方比例稱取藥材，粉碎，過120目篩，混合均勻，備用；取蜂蜜裝入比自身體積大2倍的容器內，直火加熱，首次沸騰，立即停止加熱，待煉蜜泡沫與蜂蜜明顯分層時，濾除煉蜜泡沫，繼續加熱到沸咖溫度至沸騰，立即停止加熱，濾除泡沫，連續進行共5次沸騰并取盡煉蜜泡沫為止，制得煉蜜，備用；取藥材細粉與煉蜜以1：5比例混合攪拌均勻，即得。

2.1.2 艾克熱布散劑的制備按處方比例稱取藥材，粉碎，過120目篩，混合均勻，即得。

2.2 胡椒堿測定方法的建立

2.2.1 色譜條件色譜柱采用菲羅門Synergy 4u Fu sion-RPC18（4.6mm×250mm，4μm）；流動相：甲醇-水（65：35）；流速1.0mL/min，柱溫30℃；檢測波長343 nm，理論板數按胡椒堿峰計不低于4000［4-6］。

2.2.2 線性關系精密稱取胡椒堿對照品18.5 mg，加甲醇溶解并定容至25 mL，作為對照品貯備液。精密量取對照品貯備液1.0mL置50mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，分別進樣1、5、9、13、17、21 uL，測定峰面積，記錄色譜圖。以進樣量（X）為橫坐標，峰面積（Y）為縱坐標，繪制標準曲線，得回歸方程為Y= 6 222 380.31X-23 411.85，r=0.9999，線性范圍為0.0148～0.3108μg。

2.2.3 專屬性考察精密稱取艾克熱布蜜膏與散劑各0.1 g，置50 mL容量瓶中，加甲醇45 mL，超聲處理10 min，甲醇定容，搖勻，精密吸取1 mL，加甲醇定容至10mL，搖勻，經0.45μm微孔濾膜過濾，取續濾液作為供試品溶液，備用［7-9］；同法制備缺少黑胡椒和蓽茇藥材的陰性蜜膏樣品溶液；分別吸取蜜膏和散劑供試品溶液、陰性蜜膏樣品溶液、對照品溶液各10μL，注入液相色譜儀，在“2.2.1”項下色譜條件進行檢測。結果顯示，在該色譜條件下，胡椒堿的保留時間＜為8.8 min，陰性樣品無干擾，說明該方法專屬性好。色譜圖見圖1。

圖1 HPLC色譜圖

2.2.4 精密度試驗精密吸取濃度為14.8μg/mL的胡椒堿對照品溶液10μL，重復進樣6次，分別測定峰面積，結果胡椒堿峰面積的RSD為0.36%。表明儀器精密度良好。

2.2.5 重復性試驗精密稱取同一批艾克熱布蜜膏0.1 g，6份，置50 mL容量瓶中，加甲醇45 mL，超聲處理10 min，甲醇定容，搖勻，精密吸取1 m L，加甲醇定容至10 mL，搖勻，經0.45μm微孔濾膜過濾，取續濾液作為供試品溶液，在上述色譜條件下測定。結果胡椒堿平均含量為12.90 mg/g，RSD（n=6）為0.96%，說明該方法的重復性良好。

2.2.6 穩定性試驗取同一蜜膏供試品試液，室溫放置，分別于0、2、4、6、8、12 h按上述色譜條件測定。結果胡椒堿峰面積的RSD為0.21%和2.51%。結果表明，供試品溶液室溫放置12 h內穩定。

2.2.7 加樣回收率試驗采用標準添加法測定回收率。精密稱取同一批號的蜜膏供試品6份，每份＜0.05 g，放10mL容量瓶中，分別加入質量濃度為14.8μg/mL的胡椒堿對照品溶液7.0mL，加入甲醇溶液適量超聲提取10 min后定容，用微孔濾膜（0.45μm）濾過，測定，平均回收率為99.33%，RSD=1.88%，回收率與RSD結果均在規定限度內。結果見表1。

表1 胡椒堿加樣回收率結果（n=6）

2.3 溶出度測定

按照《中國藥典》2015年版二部附錄XC［10］，由于本品為蜜膏劑與散劑，或軟或散，藥物均不在轉籃內附著，直接沉降與溶出杯底部［11-13］，故直接選擇第二法測定。

2.3.1 溶出介質的考察分別以水、0.1 mol/L鹽酸溶液、pH值5.5和7.2的磷酸鹽緩沖液作溶出介質，考察艾克熱布蜜膏的溶出情況，以“2.2.1”項下色譜條件測定胡椒堿的含量作為考察指標，結果表明，pH值5.5和7.2的磷酸鹽緩沖液作溶出介質，樣品溶出緩慢，60 min內溶出度為50%，以純水作為溶出介質，60min內溶出度即可達80%以上，以0.1mol/L鹽酸溶液作溶出介質與純水作介質結果相當，故選擇純水作為溶出介質［14-15］。

2.3.2 轉速的考察以水為溶出介質，分別以50、100 r/min不同轉速考察艾克熱布蜜膏的溶出情況，以“2.2.1”項下色譜條件測定胡椒堿的含量作為考察指標，結果表明，轉速為100 r/min時，胡椒堿溶出速度平穩適中，故選擇轉速為100 r/min。

2.3.3 體外溶出度測定分別取艾克熱布蜜膏和艾克熱布散劑各6份，參照《中國藥典》2015年版二部附錄XC溶出度測定法第二法，量取純水900 mL，經脫氣處理后作為溶出介質，注入每個溶出杯內，轉速為100 r/min，溫度為（37.0±0.5）℃。于實驗設定時間咖取樣1 m L（同時補充等溫相同介質1 mL），用0.45μm微孔濾膜過濾［16］，按”2.2.1”項下色譜條件測定胡椒堿的含量，繪制溶出曲線見圖2。結果表明，艾克熱布蜜膏在溶出1.5 h后，溶出度含量大于90%，基本溶出；艾克熱布散劑在溶出1 h后，溶出度含量大于90%，基本溶出，艾克熱布蜜膏較散劑溶出速率慢。

圖2 艾克熱布蜜膏與散劑溶出曲線

3 論

按照維吾爾醫理論，蜜膏樣品在放置40 d后開始使用，故本研究樣品均為放置40 d后樣品，也為了藥材與煉蜜中糖分、水分等物質充分混合后發揮協同作用。實驗過程中應注意盡量縮短平行取樣的時間間隔與取樣量誤差，注意蠕動泵的運行情況，否則會對實驗結果有較大影響。

艾克熱布蜜膏中胡椒堿的含量穩定，成分明確，故以胡椒堿作為考察指標，方法準確可行。實驗表明，艾克熱布蜜膏與散劑均具有較好的溶出度，艾克熱布蜜膏較散劑溶出緩慢但溶出量大。分析原因，可能是由于散劑藥材未經成型，可直接釋放與介質環境中，但散劑僅在前30min溶出速度快于蜜膏；蜜膏是藥材粉與煉蜜混合制成，故其主要成分溶出慢而溶出度高，這也許是維吾爾醫常用蜜膏劑作為治療慢性疾病的常用劑型原因之一。

固體藥物制劑的體外溶出度數據是評價不同品種藥品的重要依據［17-21］，本次實驗僅對艾克熱布蜜膏和散劑的體外溶出度作一考察，至于維吾爾藥傳統蜜膏劑是否有其他科學內涵，有待考證。故下一步將繼續進行體內試驗，以求得體內吸收和體外溶出的相關性，進一步對傳統蜜膏劑劑型特咖進行研究。

［1］中華人民共和國衛生部藥品標準維吾爾藥分冊［S］. 1998：3-5.

［2］艾合買提，歐吾麗汗，斯拉甫，等.維吾爾藥劑性研究進展［J］.中國民族民間醫藥雜志，2000，6（6）：37-39.

［3］穆罕穆德·艾克拜爾，·艾爾扎尼，卡拉巴丁·卡地爾［M］.新疆，1751：431.

［4］《靜，肖美添，張學勤.RPHPLC法測定紅花如意膠囊中胡椒堿的含量［J］.藥物分析雜志，2011，31（9）：1812-1814.

［5］李方，曹陽，張清波.高效液相色譜法測定蓽茇中胡椒堿的含量［J］.中醫藥信息，2010，27（2）：21-22.

［6］蘇金云，沈煒.正交實驗法優選黑胡椒中胡椒堿的提取工藝［J］.浙江中醫藥大學學報，2008，32（5）：672-673.

［7］畢贏，劉軍輝，羅容.HPLC同時測定蓽茇中胡椒堿和蓽茇明寧堿含量［J］.中國實驗方劑學雜志，2012，18（1）：47-50.

［8］吳霞，于志斌，《蘊華，等.蓽茇化學成分的研究（I）［J］.中草藥，2008，39（2）：178-180.

［9］包勒朝魯，烏蘭圖雅，那生桑，等.蒙成藥哈日嘎布日一10味片中胡椒堿含量測定［J］.中國實驗方劑學雜志，2014，20（1）：81-83.

［10］國家藥典委員會.中國藥典［S］.二部.北京：中國醫藥科技出版社，2015：附錄86-87.

［11］邵兵，崔超，劉紅梅，等.胡椒堿膠囊自乳化釋藥系統的處方篩選及體外質量評價［J］.中國藥師，2015，18（10）：1674-1677.

［12］田璐.蓽茇胡椒方口腔貼片的研制［D］.廣州：廣東藥學院，2013：62-72.

［13］嚴紅梅，汪晶，賈曉斌，等.燈盞乙素-胡椒堿共無定型復合物的制備及其體外釋放度評價［J］.中草藥，2015，46（14）：2082-2086.

［14］曹慧宏.伊來西胺片溶出度測定方法研究［J］.海峽藥學，2012，24（3）：65-66.

［15］王賢英，謝香菊，李勝容.金澤冠心軟膠囊溶出度研究［J］.中國現代中藥，2013，15（10）：895-897.

［16］張艷菊，吳清，倪健，等.不同廠家三黃片中大黃素、大黃酚的溶出度［J］.中國實驗方劑學雜志，2012，18（9）：104-108.

［17］譚偉，郭宗華，孫麗芳.茵梔黃栓的研制及溶出度研究［J］.中國現代中藥，2008，10（5）：34-35.

［18］張衛敏，王博，李洪起，等.構椽酸莫沙必利片體外溶出度的研究［J］.中國醫藥導報，2013，10（8）：127-129

［19］姚夢竹，，開，洪怡.黃蘋蒼分散片處方優化及溶出度的研究［J］.中國醫藥導報，2013，10（1）：122-123.

［20］朱燕妮，傅潞仙，徐飛瑤，等.高效液相色譜法對坎地沙坦酯固體分散體顆粒溶出度的測定［J］.中國醫藥導報，2013，10（3）：127-129.

［21］張愛麗，張慶芬.3種不同天舒固體劑型溶出度研究［J］.中國實驗方劑學雜志，2010，16（18）：10-13.

Com parison of dissolution in Uyghur medicine Aikerebu M ajun and Powders

LIJianmei DOU qin Xirali·TURSUN
Key Laboratory of Traditional Uyghur Medicine Prescription，Institute of Xinjiang Traditional Uyghur Medicine，Xinjiang Uygru Autonomous Region，Urumqi 830049，China

Objective To establish the dissolution method of piperine in Aikerebu majun and research the dissolution behavior of piperine in Aikerebu Majun and Powders.Methods The content of piperine was determined by HPLC method.The Fusion-RPC18（4.6 mm×250mm，4μm）columon was used，themobile phase wasmethanol-water（65：35），the detection wave length was 343 nm and flow velocity was 1.0 mL/min.The determination conditions of dissolution were selected by the index of cumulative dissolution rate of piperine，accumulation dissolution curves were calculated，drawn.Resu lts The determination conditions of dissolution included paddlemethod with the rotating speed of 100 r/min and water as dissolutionmedium.80%piperine in majun was dissolved in 60min，and 100%was dissolved in 120min. 60%piperine in powders was dissolved in 60 min，and 90%was dissolved in 120 min.Conclusion The piperine in powders dissolves faster than in Majun.

Majun；Powders；Piperine；Dissolution

R917

A

1673-7210（2016）05（c）-0142-04

2016-01-10本文編輯：趙魯楓）

新疆維吾爾自治區自然科學基金青年科學基金項目（2014211B041）。

李建梅（1982.1-），女，碩士；研究方向：藥物制劑與分析

希爾艾力·吐爾遜（1971.6-），男，博士，主任藥師，主要從事維藥傳統制劑研究。