清腦片對小鼠轉輪及轉棒平衡能力的影響

謝國旗，郝少君，蘇 峰，黎丹東，張正臣

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清腦片對小鼠轉輪及轉棒平衡能力的影響

謝國旗，郝少君，蘇 峰，黎丹東，張正臣*

目的 觀察清腦片對小鼠轉輪平衡能力及轉棒平衡能力的影響。方法 取小鼠50只，隨機分為5組，即模型組，暈痛定組，大、中、小劑量清腦片組，每組10只。分別灌服大、中、小劑量清腦片混懸液、暈痛定膠囊混懸液及同體積的生理鹽水，每天給藥1次，連續給藥7 d，于末次給藥后第2天進行轉輪實驗。將小鼠放在轉輪上，轉速調至20 r/min，每只小鼠重復測定3次，記錄小鼠在滾軸上持續運動不掉落的時間(以秒計數)，并取其最長停留時間及三次停留時間的總和作為觀察指標；另取小鼠50只，按上述方法分組、給藥，連續給藥10 d，于末次給藥后1 h進行轉棒平衡實驗。結果 與對照組比較，大劑量清腦片組最長停留時間明顯延長(P<0.05)，中、小劑量清腦片組的最長停留時間略有延長(P>0.05)；大劑量清腦片組三次停留時間總和明顯延長(P<0.05)；與對照組比較，清腦片組小鼠體重明顯增加(P<0.05)；大、中、小劑量清腦片組小鼠在轉棒上停留時間略有延長(P>0.05)。結論 大劑量清腦片可延長小鼠最長停留時間及三次停留時間總和，顯著增加小鼠體重。

清腦片；小鼠；平衡能力；暈痛定膠囊

0 引言

目前，我國18～65歲人群中，頭痛、頭暈的發病率為23.8%，且80%的頭痛頭暈患者中，有3.68%的患者因就醫而引發嚴重的心腦血管病及抑郁自殺行為。每年有1% (98.1萬)的頭痛、頭暈患者死于該病引起的嚴重疾病。頭痛、頭暈的治療藥物雖然多，但效果均不理想；而西藥雖見效快但持續時間短，且不良反應大。本研究自擬清腦片的主要成分為白芷、當歸、川芎、勾藤、細辛、龍骨、薄荷等8味中藥，具有活血、行氣通竅、止痛、清利頭目的功效，用于頭痛、頭暈、腦震蕩后遺癥。為驗證其療效原理，筆者觀察并分析了清腦片對小鼠的轉輪平衡能力及轉棒平衡能力的影響[1-8]，現報道如下。

1 實驗材料

1.1 藥物試劑 清腦片(主要成分：白芷、當歸、川芎、勾藤、細辛、龍骨、薄荷；功能主治：活血、行氣通竅、止痛、清利頭目，用于頭痛、頭暈、腦震蕩后遺癥的治療；用法用量：3次/d口服，3～5片/次)，我院自制。制法：取白芷50 g、當歸75 g及川芎75 g粉碎成100目細粉備用。剩余白芷、當歸、川芎及其余各味藥材粉碎成10目粗粉，加8倍水煎煮2次，首次2 h，二次2 h，合并煎煮液，濾過。濾液濃縮至相對密度1.15～1.30 (80 ℃)。加入上述細粉、淀粉適量，混勻，干燥成干膏，粉碎，用稀糖漿經14～16目篩制粒，50～60 ℃烘干，用14目篩整粒，加入1%硬脂酸鎂混勻，壓片(每片0.3 g)，包衣，制成1 000片。批號：20141125。暈痛定膠囊(河南龍都藥業有限公司，批號：150309)。生理鹽水(河南雙鶴華利藥業有限公司，批號：130909 06B)，醫用乙醇(新鄉市三偉消毒制劑有限公司，批號：20140105)，純凈水(新鄉娃哈哈食品有限公司，批號：20130811)。

1.2 實驗儀器 JM 1000電子秤，余姚記銘稱重校驗設備有限公司；AL204電子天平，梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司；HHS-21-8型電熱恒溫水浴鍋，上海博迅實業有限公司醫療設備廠；BCD-248T型冰箱，新飛電器有限公司；ZB-200疲勞轉棒儀。

1.3 實驗動物 KM小鼠，雌雄各半，18～22 g，級別：SPF，轉輪實驗合格證號：3700920000904，轉棒實驗合格證號：3700920000903。提供單位：山東魯抗醫藥股份有限公司，許可證號：SCXK魯20130001。實驗動物使用許可證：SYXK(豫)2015-0005。恒溫23 ℃，濕度60%，人工照明12 h，白天與12 h黑夜交替，給予常規的實驗室飲食，不限制飲水。

1.4 試液配制 空白組用藥：蒸餾水；給藥組用藥：藥粉+蒸餾水。配制方法：將清腦片碾碎打粉，按臨床劑量的7.5、15、30倍稱取藥粉，均按0.1 mL/10 g的灌胃體積。儲存方法：冷藏，用時隔水溫熱。

2 實驗方法與結果

2.1 對小鼠轉輪平衡能力的影響 取昆明種小鼠50只，體重18～21 g，雌雄各半，實驗室正常飼養3 d，隨機分為5組，即模型組、暈痛定組及大、中、小劑量清腦片組，每組10只(雌雄各半)。分別灌服大、中、小劑量清腦片混懸液(2.24、1.12、0.56 g/kg，0.22、0.11、0.056 g/mL，0.1 mL/10 g)、暈痛定膠囊混懸液(0.9 g/kg，0.09 g/mL，0.1 mL/10 g)及同體積的生理鹽水(0.1 mL/10 g)，每天給藥1次，連續給藥7 d，于末次給藥后第2天進行轉輪實驗。將小鼠放在轉輪上，轉速調至20 r/min，每只小鼠重復測定3次，記錄小鼠在滾軸上持續運動不掉落的時間，并取其最長停留時間及3次停留時間的總和作為觀察指標。由表1所示，與模型組比較，大劑量清腦片組及暈痛定膠囊組的最長停留時間明顯延長(P<0.05)，中、小劑量清腦片組略有延長(P>0.05)；大劑量清腦片組的3次停留時間總和明顯延長(P<0.05)，暈痛定組3次停留時間總和延長(P<0.01)，中、小劑量清腦片組3次停留時間略有延長，但差異無統計學意義(P>0.05)。

2.2 對小鼠轉棒平衡能力的影響 取昆明種小鼠50只，體重18～21 g，雌雄各半，實驗室正常飼養3 d，隨機分為5組，即模型組、暈痛定組及大、中、小劑量清腦片組，每組10只。分別灌服大、中、小劑量清腦片混懸液(2.24、1.12、0.56 g/kg，0.22、0.11、0.056 g/mL，0.1 mL/10 g)、暈痛定膠囊混懸液(0.9 g/kg，0.09 g/mL，0.1 mL/10 g)及同體積的生理鹽水(0.1 mL/10 g)，每天給藥1次，連續給藥10 d，于末次給藥后1 h進行轉棒平衡實驗。先將疲勞轉棒儀調整到訓練狀態，放上小鼠進行適應性訓練10 min，然后調整疲勞轉棒儀于測試狀態，轉速為30 r/min，將訓練過的小鼠依次放在轉棒上，記錄小鼠在疲勞轉棒儀上停留的時間。由表2可見，各組初始體重比較差異無統計學意義(P>0.05)，說明分組均勻。第10天，與模型組比較，清腦片組和暈痛定組可增加小鼠體重(P<0.05)；暈痛定組小鼠在轉棒的停留時間明顯延長(P<0.05)，清腦片組小鼠在轉棒上停留時間略有延長，但差異無統計學意義(P>0.05)。

3 討論

清腦片方中白芷，辛、溫，具有解表散風、通竅止痛的作用，為君藥。當歸，辛、溫，歸肝、心脾經，具有補血、活血、止痛的作用；川芎，辛、溫，具有活血行氣、祛風止痛的功效；鉤藤，性味甘、微寒，具有息風止痙、清熱平肝之功效；細辛，性味辛、溫，具有祛風散寒、通竅止痛的功效。四藥合用為臣藥。龍骨，性味甘、澀、平，歸心、肝、腎經，具有鎮驚安神、平肝潛陽、收斂固澀的作用，為佐藥。薄荷，性味辛、涼，具有疏散風熱、清利頭目之功效，為使藥。以上七藥合用，具有活血、行氣、通竅止痛、清利頭目的作用，用于治療頭痛、頭暈、腦震蕩后遺癥。臨床研究顯示，清腦片的療效較好[9]；范莉莉等[10]也對其藥劑進行了研究。本研究結果表明，大劑量清腦片可延長最長停留時間及3次停留時間總和，顯著增加小鼠體重，大、中、小劑量清腦片僅使小鼠在轉棒上停留的時間略有延長(P>0.05)，提示自擬清腦片有抗平衡失調的作用，為臨床應用墊定了基礎。

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01

表2 清腦片對小鼠轉棒平衡能力的影響(g)

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01

志謝：本實驗在河南中醫學院苗明三教授指導下完成，特此致謝！

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[3] 陸榮柱,陳自強,金復生.丙烯腈對大鼠神經行為功能的影響[J].工業衛生與職業病,2002,28(3):137-140.

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[5] 馬依努爾·拜克力,陳君,阿吉艾克拜爾·艾薩.玫瑰花多酚抗小鼠軀體疲勞研究[J].中國藥理學通報,2015,31(3):441-442.

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[7] 耿秀麗，趙京生，王希東.抗眩顆粒對小鼠耳廓細靜脈管徑及細動脈管徑的影響[J].實用藥物與臨床,2015,8:904-905.

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[10]范莉莉,王靈,李文俊,等.清腦片中阿魏酸的HPLC含量測定方法[J].河南中醫,2015,4:909-911.

Effect of Qingnao tablet on the balance of wheel running and rotating rod of mice

XIE Guo-qi,HAO Shao-jun,SU Feng,LI Dan-dong,ZHANG Zheng-chen*(the 371 Chinese People′s Liberation Army Hospital of Xinxiang,Xinxiang 453000,China)

Objective To observe the effect of Qingnao tablets on the balance of rotating rod and wheel running of mice.Methods Fifty mice were randomly divided into 5 groups:model group,yuntongding group and high,middle-and low-dose Qingnao tablet group,10 mice in each group.High,middle and low dose of Qingnao tablet suspension,Yuntongding capsule suspension and the same volume of physiological saline were intragastrically administered for 7 d of continuous administration,once daily;all the mice were given wheel running on the second day after the last dose of medication.The mice were put in the runner,and the rotating speed was adjusted to 20 r/min,and each mice was repeated for 3 times.The time of mice rolling without falling was recorded,and the longest residence time and the sum of three residence time were recorded as the observation index.Fifty mice were grouped and administered through the same method for 10 d,and the rotating rod balance experiment was given at 1 h after the last administration.Results Compared with control group,the longest residence time in high dose Qingnao tablet group was longer (P<0.05),and the time in middle-and small-dose of Qingnao tablet group was slightly longer (P>0.05);the sum of three residence time of Qingnao tablet group was longer (P<0.05);the body weight of mice in Qingnao tablet groups increased (P<0.05);The time of mice staying on the rotating rod in Qingnao tablet groups was slightly longer (P>0.05).Conclusion High-dose Qingnao tablet can significantly prolong the longest residence time and the sum of three residence time,and increase the body weight of mice.

Qingnao tablet;Mice;Balance;Yuntongding capsule

2016-03-23

中國人民解放軍第三七一醫院，河南 新鄉 453000

河南新鄉市重點科技項目(ZG11014)

10.14053/j.cnki.ppcr.201610005

*通信作者