IFN-γ釋放實驗和結核抗體檢測在肺結核診斷中的臨床價值

范慧潔，張新麗

(河南省周口市中心醫院檢驗科 466000)

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·臨床研究·

IFN-γ釋放實驗和結核抗體檢測在肺結核診斷中的臨床價值

范慧潔，張新麗△

(河南省周口市中心醫院檢驗科 466000)

目的 探討IFN-γ釋放實驗(IGRA)和結核抗體檢測在肺結核診斷中的臨床價值。 方法 選取2015年4月至2016年3月該院確診的158例肺結核患者(肺結核組)及162例其他呼吸道疾病患者(對照組)為研究對象，進行IGRA實驗和結核抗體檢測，比較2種方法檢測2組患者的陽性率結果。結果 IGRA實驗和結核抗體檢測在肺結核組的陽性率分別為80.38%(127/158)和50.63%(80/158)，均高于對照組，差異有統計學意義(χ2分別為6.008和132.662,P<0.05)。IGRA實驗與結核抗體檢測結果的符合率為44.94%，IGRA檢測陽性率高于結核抗體檢測，差異有統計學意義(χ2=4.516,P<0.05)。IGRA實驗的靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值、準確率分別為80.38%、83.95%、83.01%、81.44%、82.19%，結核抗體檢測分別為50.63%、 62.96%、57.14%、56.67%和56.88%。 結論 2種檢測方法為肺結核診斷提供有效的實驗數據，IGRA實驗具有更高的靈敏度和特異度，但費用較高，尚不能大規模應用于臨床。

IFN-γ釋放實驗； 結核抗體； 肺結核

結核病由結核分枝桿菌引起的傳染性疾病，是影響公共健康的重大問題[1]。2014年全球新增結核感染病例960萬，病死率達150萬[2]。肺結核作為一種最常見的結核病，早期診斷和治療仍存在困難。現應用結核抗體檢測和IFN-γ釋放實驗(IGRA)進行實驗結果的對比分析，評估其在肺結核診斷中的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年4月至2016年3月該院確診的158例肺結核患者為研究對象(肺結核組)，男89例，女69例，年齡17～87歲，平均年齡(57.34±16.56)歲。對照組為其他呼吸道疾病患者162例，男72例，女50例，年齡15～85歲，平均年齡(52.94±15.64)歲，包括COPD、肺氣腫、慢性支氣管炎等。肺結核診斷依據臨床癥狀、體征、影像學、細菌學、血清學及抗結核療效并參照《內科學(第8版)》診斷標準[3]。

1.2 儀器及試劑 熱電酶標儀MK3購自南京貝登生物科技有限公司；結核抗體試劑有3種，即TB-CHECK試劑盒購自蘭州雅華生物技術有限公司，TB-DOT試劑盒購自北京貝爾生物工程有限公司，TB-Ab試劑盒購自濰坊市生物技術有限公司；IGRA試劑盒購自北京萬泰生物藥業股份有限公司。

1.3 結核抗體檢測 采集患者血清，TB-CHECK和TB-DOT 2種檢測方法均為膠體金法，肉眼判斷陰、陽性。TB-Ab采用ELISA法，使用酶標儀測出OD值，根據說明書結果判斷陰、陽性。3種抗體任意一種或多種為陽性時均為結核抗體檢測結果陽性。

1.4 IGRA實驗 采集人體肝素抗凝靜脈血4 mL以上，2 h內將全血標本輕柔顛倒混勻3～5次后依次分裝到“N”、“T”、“P”3種培養管中，1毫升/管。將培養管輕柔顛倒混勻后放入37 ℃水浴箱中(22±2)h，取血漿按照說明書進行ELISA檢測。每例患者3種培養血漿各1孔，校準品各雙孔，空白對照1孔，分別在相應孔中加入樣品稀釋液20 μL(空白對照孔除外)，然后分別在相應孔中加入待測標本或校準品50 μL(空白對照孔除外)，輕輕震蕩混勻，封板至37 ℃溫育60 min。每孔加入酶標試劑50 μL(空白對照孔除外)，輕輕震蕩混勻，封板至37 ℃溫育60 min。洗板機洗板5遍，最后1次甩干，每孔加入顯色劑A、B各50 μL，輕輕振蕩混勻，37 ℃避光顯色15 min。每孔加終止液50 μL，輕輕振蕩混勻，10 min內使用酶標儀波長450 nm處，用空白孔調零后檢測各孔OD值，計算判斷陰陽性。

1.5 統計學處理 采用SPSS18.0統計軟件進行數據分析，計數資料以率表示，組間比較使用χ2檢驗或Fisher精確檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 2種方法檢測2組患者的結果比較 結核抗體檢測和IGRA實驗檢測肺結核組的陽性率分別為50.63%(80/158)和80.38%(127/158)，均高于對照組，差異有統計學意義(χ2分別為6.008和132.662,P<0.05)。見表1。

表1 2種方法檢測2組患者的結果比較[n(%)]

2.2 2種檢測方法的結果比較 IGRA實驗與結核抗體檢測肺結核組患者的結果符合率為44.94%，IGRA實驗的陽性率高于結核抗體檢測，差異有統計學意義(χ2=4.516,P<0.05)，IGRA實驗和結核抗體檢測的靈敏度分別為80.38%和50.63%，特異度為83.95%和62.96%，陽性預測值為83.01%和57.14%，陰性預測值為81.44%和56.67%，準確率為82.19%和56.88%。見表2、3。

表2 2種檢測方法的結果比較(n)

注：χ2=4.516，P=0.034。

表3 2種檢測方法的性能比較(%)

3 討 論

結核抗體主要檢測血清中結核特異分泌抗原抗體、結核特異外膜抗原抗體和結核分枝桿菌抗體免疫球蛋白G(IgG)，具有簡便、快速、低成本低特點，是臨床常用輔助項目。IGRA實驗通過檢測經結核分枝桿菌特異性抗原刺激特異性效應T細胞產生的γ-干擾素(IFN-γ)水平，從而判斷是否具有針對結核分枝桿菌的特異性T細胞免疫反應，具有較高的靈敏度和特異度[3-5]。

機體受結核分枝桿菌感染時，針對其不同的抗原可產生特異性的免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白A(IgA)和IgG抗體，而IgG是構成結核抗體的主要部分。Feng等[6]研究報道，活動性肺結核患者血清IgG陽性率在46.2%～65.7%之間，與本研究結果大致相同。血清學結核抗體檢測存在假陰性和假陽性，有以下幾種情況：(1)新感染患者還未在體內產生抗體或抗體水平較低，未達到檢測限，導致假陰性。(2)免疫缺陷患者產生抗體的能力較低，也會造成假陰性。(3)接種疫苗或曾經感染結核但已痊愈的患者體內仍有結核抗體，檢測結果為陽性，但不能認為存在結核現癥感染。(4)結核分枝桿菌與其他細菌存在交叉抗原決定簇，也可導致假陽性。本研究有2種結核抗體檢測采用膠體金法，人工操作和結果判讀存在某種程度的人為誤差，提示結核抗體檢測存在一定的局限性，必須與其他檢測結合。

IGRA實驗的靈敏度和特異度均高于結核抗體檢測，且不受卡介苗接種及機體免疫狀況的影響，可用于新肺結核感染和隱匿性肺結核感染的輔助診斷[7]。IGRA實驗為非創傷性體外實驗，方便、快速，最低檢出量為2 pg/mL，并針對特異性的結核分枝桿菌抗原，具有較高的靈敏度和特異度。張宏宇等[8]研究報道，T-SPOT TB實驗在肺結核診斷方面的靈敏度和特異度均高于PPD、涂片鏡檢法、痰培養法和結核抗體檢測，與本實驗結果一致。本研究使用的是T-SPOT TB實驗的優化，與美國FDA認證的同類試劑QFT具有較高的符合率，可用于結核感染的輔助診斷，但其結果不能代替痰涂片、培養或影像學等較為經典的結核分枝桿菌感染的診斷方法，也不作為臨床診斷的唯一證據。

綜上所述，IGRA實驗優于結核抗體檢測，但費用昂貴，并不適合臨床結核分枝桿菌感染患者的篩查，所以結核抗體檢測仍需繼續開展。2種方法聯合檢測可減少誤診和漏診，更好地服務于臨床。

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[8]張宏宇，陳春華，王懷誠，等．結核感染T淋巴細胞檢測試驗在結核病快速診斷中的應用及意義[J]．重慶醫學，2014，43(27)：3634-3636．

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.20.058

A

1673-4130(2016)20-2931-03

2016-02-21

2016-04-15)

△通訊作者，E-mail:zhangxinli198@163.com。