HBME-1、CK19和CD117在甲狀腺乳頭狀癌表達的臨床病理意義

曾 錚,李瑞平,趙 敏,魏艷華,施中元

(江蘇省中西醫結合醫院/江蘇省中醫藥研究院病理科 210028)

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·論 著·

HBME-1、CK19和CD117在甲狀腺乳頭狀癌表達的臨床病理意義

曾 錚,李瑞平,趙 敏,魏艷華,施中元

(江蘇省中西醫結合醫院/江蘇省中醫藥研究院病理科 210028)

目的 通過檢測HBME-1、CK19和CD117在甲狀腺乳頭狀癌、濾泡性腺瘤和橋本甲狀腺炎組織學標本的表達，探討3種抗體在甲狀腺乳頭狀癌鑒別診斷中的臨床價值。方法 收集該科2013年1月至2015年12月85例甲狀腺腺葉切除標本，進行HBME-1、CK19和CD117免疫組織化學染色，并對不同病變的染色結果進行分析。結果 HBME-1、CK19和CD117在甲狀腺乳頭狀癌的陽性表達率分別為87.3%、98.2% 和 7.3%，三者陽性表達率在良性組與惡性組之間比較，差異有統計學意義(P<0.05)，K值分別為0.582、0.551和0.874。結論 甲狀腺乳頭狀癌與良性病變的鑒別診斷，CD117檢測優于HBME-1和CK19，實際工作中適于聯合使用。

甲狀腺癌； 免疫組織化學； HBME-1； CK19； CD117

甲狀腺癌是最常見的內分泌系統惡性腫瘤，其發病率呈逐年上升趨勢，其中大部分為乳頭狀癌[1]。許多實驗報道使用免疫組織化學染色方法進行鑒別診斷，包括對多種抗體的聯合運用，推薦HBME-1和CK19作為鑒別診斷抗體之一[2-4]。實際運用中發現有一定程度的假陽性和假陰性，現檢測HBME-1、CK19和CD117在甲狀腺乳頭狀癌、濾泡性腺瘤和橋本甲狀腺炎組織學標本的表達，探討3種抗體在甲狀腺乳頭狀癌鑒別診斷中的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇該科2013年1月至2015年12月甲狀腺腺葉切除標本85例，術后標本經組織學診斷為甲狀腺乳頭狀癌55例，包括45例經典型和10例濾泡型；甲狀腺濾泡性腺瘤15例；橋本甲狀腺炎15例。所有組織學切片均經2名高年資醫師重復確認。診斷標準參照WHO《內分泌器官腫瘤病理學與遺傳學(2004年版)》標準。

1.2 方法 腫瘤標本經10%中性福爾馬林固定，石蠟包埋，4 μm切片。抗體CD117購自Dako公司，1∶600稀釋；抗體HBME-1和CK19購自邁新公司，即用型。采用Envision 2步法免疫組織化學染色法，操作步驟嚴格按說明書進行。

1.3 判定標準 HBME-1陽性定位于腫瘤細胞質，為淡黃色至棕黃色胞漿或周邊毛刷樣著色；CK19陽性呈細胞膜棕黃色線樣著色；CD117陽性定位于腫瘤細胞的細胞質和細胞膜，為棕黃色胞質細胞顆粒或包膜線樣著色。選取有代表性的區域，按陽性細胞數占腫瘤細胞的比例分級，<5%為陰性(-)，5%～25%為弱陽性(+)，26%～50%為中等陽性(++)，>50%為強陽性(+++)。

1.4 統計學處理 使用SPSS16.0統計軟件進行數據分析，計數資料組間比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義；診斷學一致性檢驗應用Kappa一致性檢驗，K值越大，吻合度越高，K≥0.7表示吻合度較強，0.4≤K<0.7表示吻合度一般，K<0.4表示吻合度較弱。

2 結 果

2.1 HBME-1在3種組織標本的表達結果比較 45例經典型甲狀腺乳頭狀癌中HBME-1陰性6例，弱陽性4例，中等陽性9例，強陽性26例。濾泡型甲狀腺乳頭狀癌中HBME-1陰性1例，弱陽性2例，中等陽性2例，強陽性5例。15例濾泡型腺瘤，HBME-1陰性12例，弱陽性2例，中等陽性1例，強陽性0例。15例橋本甲狀腺炎中HBME-1陰性9例，弱陽性6例，中等陽性0例，強陽性0例。HBME-1的陽性表達率在良性組與惡性組之間比較，差異有統計學意義(χ2=28.825，P<0.05)，一致性檢驗Kappa=0.582。HBME-1檢測惡性組的敏感性為87.3%，特異性為70.0%。見圖1～4。

圖1 HBME-1在經典型甲狀腺乳頭狀癌的表達

圖2 HBME-1在濾泡型甲狀腺乳頭狀癌的表達

圖3 HBME-1在甲狀腺濾泡型腺瘤的表達

圖4 HBME-1在橋本甲狀腺炎的表達

2.2 CK19在3種組織標本的表達結果比較 45例經典型甲狀腺乳頭狀癌中CK19陰性1例，弱陽性3例，中等陽性6例，強陽性36例。濾泡型甲狀腺乳頭狀癌中CK19陰性0例，弱陽性1例，中等陽性1例，強陽性8例。15例濾泡型腺瘤中CK19陰性9例，弱陽性2例，中等陽性4例，強陽性0例。15例橋本甲狀腺炎中CK19陰性7例，弱陽性6例，中等陽性2例，強陽性0例。CK19的陽性表達率在良性組與惡性組之間比較，差異有統計學意義(χ2=26.826，P<0.05)，一致性檢驗Kappa=0.551。CK19檢測惡性組的敏感性為97.8%，特異性為53.3%。見圖5～8。

圖5 CK19在經典型甲狀腺乳頭狀癌的表達

圖6 CK19在濾泡型甲狀腺乳頭狀癌的表達

圖7 CK19在甲狀腺濾泡型腺瘤的表達

圖8 CK19在橋本甲狀腺炎的表達

2.3 CD117在3種組織標本的表達結果比較 45例經典型甲狀腺乳頭狀癌中CD117陰性42例，弱陽性3例，中等陽性0例，強陽性0例。濾泡型甲狀腺乳頭狀癌中CD117陰性9例，弱陽性1例，中等陽性0例，強陽性0例。15例濾泡型腺瘤中CD117陰性1例，弱陽性1例，中等陽性5例，強陽性8例。15例橋本甲狀腺炎中CD117陰性0例，弱陽性3例，中等陽性6例，強陽性6例。CD117的陽性表達率在良性組與惡性組之間比較，差異有統計學意義(χ2=65.313，P<0.05)，一致性檢驗Kappa=0.874。CD117檢測良性組的敏感性為96.7%，特異性為92.7%。見圖9～12。

圖9 CD117在經典型甲狀腺乳頭狀癌的表達

圖10 CD117在濾泡型甲狀腺乳頭狀癌的表達

圖11 CD117在甲狀腺濾泡型腺瘤的表達

圖12 CD117在橋本甲狀腺炎的表達

3 討 論

手術標本中甲狀腺乳頭狀癌與橋本甲狀腺炎合并存在，橋本甲狀腺炎患者易患甲狀腺乳頭狀癌。多數學者認為橋本甲狀腺炎引發的甲狀腺濾泡上皮改變是乳頭狀癌的早期事件，該觀點還缺乏有力的直接證據。隨著超聲技術和細針穿刺細胞學的不斷進步及普遍應用，越來越多的微小癌被檢出，其中大多數同樣合并橋本甲狀腺炎。甲狀腺乳頭狀癌的組織學診斷標準無特異性和排他性，實際運用中需要與多種良性疾病鑒別，最常見的是與橋本甲狀腺炎的不典型濾泡上皮細胞鑒別。當甲狀腺微小癌直徑小于0.5 cm，如無典型乳頭狀結構，鏡下表現為大量膠原組織散在分布的濾泡結構，病理醫師將面對良惡性鑒別的挑戰[2]。

HBME-1是間皮細胞表面微絨毛的一種抗原成分，是一種酸性氨基多聚糖蛋白，主要成分是透明質酸，有研究報道在甲狀腺乳頭狀癌中高表達[5-6]。本研究結果顯示，HBME-1在惡性組的表達率顯著高于良性組，且強陽性表達病例集中于惡性組，一致性檢驗顯示其診斷效能一般，但具有較好的敏感性，特異性不高，主要原因是橋本甲狀腺炎中會有弱陽性表達，導致假陽性偏高。

CK19在甲狀腺乳頭狀癌高表達，但在甲狀腺良性病變中的表達也被學者關注[2]。本研究結果表明，CK19在良惡性組之間的表達率比較，差異有統計學意義(P<0.05)，但一致性檢驗顯示診斷效能一般，敏感性及特異性分別為97.8%和53.3%，雖然敏感性高于HBME-1，但特異性顯著低于HBME-1，兩者都不適合單獨用于甲狀腺乳頭狀癌的鑒別診斷。

CD117是由c-kit基因(4q11～q21)編碼的Ⅲ型跨膜酪氨酸激酶受體家族成員，是白色斑點(W)位點的等位基因，已知W位點在肥大細胞、生殖細胞、黑色素細胞的分化中起重要作用。隨著研究的深入，發現CD117表達于人體多種細胞中，目前CD117廣泛應用于胃腸道間質腫瘤、精原細胞瘤、嫌色性腎細胞癌、腺樣囊性癌等多種腫瘤的診斷與鑒別診斷中[7]。本研究結果證實，CD117在甲狀腺乳頭狀癌的表達率較良性病變顯著降低，且陽性表達病例均未出現中等及強陽性表達，其在良惡性組間的表達水平與HBME-1和CK19完全相反，兩者聯合可以反向驗證，提高良惡性鑒別的準確性。即使單獨參考CD117的表達，其與良惡性組的診斷一致性Kappa=0.874，CD117檢測良性組的敏感性為96.7%，特異性為92.7%，提示其診斷價值優于HBME-1和CK19。

綜上所述，甲狀腺乳頭狀癌與良性病變鑒別診斷時，CD117診斷效能優于HBME-1和CK19，且CD117與HBME-1、CK19陽性表達率均相反，實際工作中可聯合使用，提高診斷的準確性。

[1]羅勝蘭，俞敏，龔巍巍．甲狀腺癌的流行現況及其危險因素[J]．中國預防醫學雜志，2013，29(4)：317-322．

[2]鄧敏，葉顧萍，馬建中，等．甲狀腺乳頭狀癌中CK19、Galectin-3、HBME-1和TPO的表達及意義[J]．臨床與實驗病理學雜志，2011，27(8)：843-846．

[3]林軍，應亞君，瞿海江，等．CK19、Galectin-3、HBME-1、p27及CyclinD1在甲狀腺乳頭狀癌中的表達及意義[J]．中國癌癥雜志，2009，19(6)：433-438．

[4]黃悅，趙建華，樊克武．HBME-1和CK19、Galectin-3在甲狀腺乳頭狀癌中表達及診斷價值[J]．南京醫科大學學報(自然科學版)，2007，27(11)：1294-1297．[5]Rahmani A,Dehghani MZ,Afshar NM,et al.HBME-1 immunostaining in reactive mesothelial versus metastatic adenocarcinoma cells in serous fluid[J].Indian J Pathol Microbiol,2011,54(3):460-463.

[6]Matos LL,Del Giglio AB,Matsubayashi CO,et al.Expression of CK-19,galectin-3,and HBME-1 in the differentiation of thyroid lesions:systematic review and DIAGNOSTIC meta-analysis[J].Journal of Clinical Oncology,2012,30(15):97-101.

[7]侯英勇，朱雄增．CD117在胃腸道間質瘤和其他腫瘤中的表達[J]．中華病理學雜志，2006，35(12)：747-749．

Expression of HBME-1,CK19 and CD117 in papillary thyroid carcinoma and its significance

ZENGZheng,LIRuiping,ZHAOMin,WEIYanhua,SHIZhongyuan

(DepartmentofPathology,JiangsuProvinceHospitalofIntegratedTraditionalChineseMedicineandWesternMedicine/JiangsuProvinceAcademyofTraditionalChineseMedicine,Nanjing,Jiangsu210028,China)

Objective To explore the value of three antibodies in the differential diagnosis of papillary thyroid carcinoma,by detecting the expression of HBME-1,CK19 and CD117 in papillary thyroid cacinoma,thyroid follicular adenoma and Hashimoto′s thyroiditis tissues.Methods Totally 85 cases were collected from January 2013 to December 2015,including papillary thyroid cacinoma,thyroid follicular adenoma and Hashimoto′s thyroiditis.They were immunohistochemical stained by HBME-1,CK19 and CD117.SPSS16.0 software was used to analyze the relationship between the staining results with different pathological changes.Results The positive rates of HBME-1,CK19 and CD117 were 87.3%,98.2%,and 7.3%,respectively.The positive expression of them in benign and malignant groups had significant difference (P<0.05) and their consistency checking Kappa were 0.582,0.551,and 0.874,respectively.Conclusion In the differential diagnosis of papillary thyroid carcinoma and benign lesions,CD117 is better than HBME-1 and CK19.It′s possible to use a combination of them in practice.

thyroid carcinoma； immunohistochemistry； HBME-1； CK19； CD117

曾錚，男，主治醫師，主要從事腫瘤病理研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.20.009

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1673-4130(2016)20-2825-04

2016-03-22

2016-06-06)