汪威,田云霞,武紹啟,許慶坤
(1.昆明市農業科學研究院食用菌中心,云南昆明650034;2.云南萬盛食用菌種植有限公司,云南昆明655200)
〈產業論壇〉
昆明香菇反季節栽培的主要病原真菌及其發生特點*
汪威1,田云霞1,武紹啟1,許慶坤2
(1.昆明市農業科學研究院食用菌中心,云南昆明650034;2.云南萬盛食用菌種植有限公司,云南昆明655200)
通過對昆明地區幾個香菇反季節栽培種植區采集病原真菌樣本,分離、純化鑒定出木霉屬(Trichoderma)、青霉屬(Penicillium)、擬青霉屬(Paecilomyces)、鐮孢屬(Fusarium)、輪枝霉屬(Verticillium)、毛霉屬(Mucor)共6個屬,其中木霉屬分離頻次最高(61.90%);香菇反季節栽培出菇期病原真菌的種類最多,而培菌后期最少。木霉屬是主要病原真菌,培菌前期、培菌后期和出菇期發生率分別為0.33%、2.20%和14.36%,擬青霉屬真菌污染僅在培菌前期發現,發生率為0.25%。
香菇;反季節;病原真菌
香菇(Lentinus edodes)的春栽夏菇模式即反季節栽培模式,實現了香菇的周年化生產[1]。每年全國夏季高溫導致優質鮮香菇貨源緊缺,市場需求大。而昆明夏無酷暑,氣候潮濕。這種氣候優勢有利于香菇栽培,但同時也易導致病原真菌大量發生,造成香菇生產減產甚至絕收。因此,分離、純化和鑒定香菇栽培的主要病原真菌,研究其發生特點,可為香菇反季節栽培中主要真菌性病害綜合防治提供依據。
1.1樣本采集
2015年1月~2015年8月,在昆明市農業科技示范園(團結)和云南萬盛食用菌種植公司香菇種植示范區采集樣本,按培菌前期(從接完種到菌絲長滿)、培菌后期(從菌絲長滿到菌棒轉色完成)和出菇期3個階段分別統計,共采集樣本212份,用無菌塑料袋裝好,帶回實驗室進行下一步分離和鑒定。
1.2病原真菌的分離純化
將所采集的被真菌污染的培養料樣品,在無菌條件下取一小塊置于PDA平板上,在25℃下培養至長出菌落,然后挑取菌落邊緣的菌絲進行純化,或在產孢后挑取孢子進行單孢分離,將純化好的菌株接種在PDA斜面上培養1周,然后置于4℃冰箱中保存備用[2]。
1.3病原真菌的鑒定
用插片培養法觀察真菌形態。將純化好的真菌接種在PDA平板中間,邊緣以45°角插上3片蓋玻片,25℃下培養至菌絲長滿蓋玻片且剛開始產孢,擦去背對中心的那面的菌絲后,置于滴有無菌水載玻片上,再加蓋玻片鏡檢。參考有關文獻[3-5]將各真菌鑒定到屬。
香菇反季節栽培中污染真菌的種類及分離頻率見表1。

表1 香菇反季節栽培中污染真菌種類及分離頻率Tab.1The species and isolated frequency of pathogenic fungi during Lentinus edodes anti-season cultivation
表1結果表明,共獲得木霉屬(Trichoderma)、青霉屬(Penicillium)、擬青霉屬(Paecilomyces)、鐮孢屬(Fusarium)、輪枝霉屬(Verticillium)、毛霉屬(Mucor)共6個屬的香菇病原真菌,顯微結構見圖1,此外有少量未鑒定的真菌屬。木霉屬真菌是香菇反季節栽培的主要病原真菌,分離頻次達到61.90%;其次是青霉屬和鐮刀菌屬真菌,分別是12.09%和8.42%。
圖1中1~6依次為木霉屬(Trichoderma)、青霉屬(Penicillium)、擬青霉屬(Paecilomyces)、鐮孢屬(Fusarium)、輪枝霉屬(Verticillium)、毛霉屬(Mucor)真菌放大400倍顯微結構。

圖1 病原真菌顯微結構Fig.1Microscopic structure of pathogenic fungi
香菇反季節栽培培菌前期、培菌后期和出菇期病原真菌的種類和發生率各不相同,見圖2。
由圖2可見,出菇期發生病原真菌的種類最多,而發菌后期病原真菌種類最少;木霉屬真菌是最主要的污染真菌,在培菌前期、培菌后期和出菇期發生率大幅增加,分別為0.33%、2.20%和14.36%;青霉屬真菌發生率在發菌前期和后期差別不大,分別為0.12%和0.11%,而在出菇期發生率達到3.10%;擬青霉屬真菌污染僅在培菌前期發現,發生率為0.25%。
昆明夏天正是真菌最適宜生長時期,香菇反季節栽培種分離得到的病原真菌種類與徐耀波、盧東升等人報道[2,6]的基本一致,但擬青霉屬真菌未見報道,可能是栽培基質污染。
邊銀丙等[7]認為食用菌菌絲病害分為菌絲體侵染性病害與競爭性病害。侵染性病害是由于菌絲體受到病原物侵染;競爭性病害是由于培養基質存在其它微生物污染,與食用菌菌絲體拮抗反應,從而阻礙菌絲體正常生長。因此,培菌前期菌絲體未長滿菌棒,主要發生菌絲體競爭性病害,其它2個時期菌絲已長滿,主要發生菌絲體侵染性病害。培菌前期、培菌后期和出菇期病木霉菌發生率大幅增加,可能是香菇菌絲體生長環境逐步開放,降低了木霉菌侵入難度;另外持續高溫條件下香菇菌棒生理活性下降,對木霉菌失去抗性[8]所致。

圖2 香菇反季節栽培不同時期各病原真菌的發生率比較Fig.2Comparison of pathogenic fungi incidence during Lentinus edodes anti-season cultivation
[1]張金霞,黃晨陽.無公害食用菌安全生產手冊[M].北京:中國農業出版社,2008.
[2]徐耀波,文成敬.平菇和香菇袋料栽培中污染真菌的研究[J].中國食用菌,2004,23(2):45-47.
[3]Paul M Kirk,Paul F Cannon.Dictionary of the fungi(10th edition)[M].CABI Publishing:2008.
[4]魏景超.真菌鑒定手冊[M].上海:上海科學技術出版社,1979.
[5]董偉.蔬菜病蟲害診斷與防治彩色圖譜[M].北京:中國農業科學技術出版社,2012.
[6]盧東升,王金平.食用菌污染真菌的調查研究[J].信陽師范學院學報:自然科學版,2007,20(4):447-451.
[7]邊銀丙.食用菌菌絲體侵染性病害與競爭性病害研究進展[J].食用菌學報,2013,20(2):1-7.
[8]曹現濤.香菇菌棒腐爛病相關木霉鑒定與發生規律初步研究[D].武漢:華中農業大學,2015.
Pathogenic Fungi and Main Features of Occurrence During Lentinus edodes anti-season Cultivation in Kunming
WANG Wei1,TIAN Yun-xia1,WU Shao-qi1,XU Qing-kun2
(1.Kunming Academy of Agricultural Sciences,Kunming 650034,China;2.Yunnan Wansheng Mushroom Cultivation Ltd.,Kunming 655200,China)
Absract:The pathogenic fungi samples from several growing farm of anti-season Lentinus edodes were collected isolated and purified,and a total of 6 genus were identified,such as Trichoderma,Penicillium,Paecilomyces,Fusarium,Verticillium,Mucor. The isolated frequency of Trichoderma was highest(61.90%).The most pathogenic fungi species appeared in fruiting season cultivation,and it occur rarely in late cultivation season.Trichoderma is a major pathogenic fungi,and the occurrence rate in pre cultivation season,late cultivation season and fruiting were 0.33%,2.20%and 14.36%respectively.Paecilomyces fungus contamination was found only in the pre cultivation season,and the occurrence rate was 0.25%.
Lentinus edodes;anti-season;pathogenic fungi
S646.1
A
1003-8310(2016)03-0068-03
10.13629/j.cnki.53-1054.2016.03.015
昆明特色經濟作物新品種選育及栽培技術推廣應用(2130106);昆明科技局重大項目(2015-2-N-01573)。
汪威(1980-),男,碩士,農藝師,主要從事食用菌產業化開發與技術推廣研究。E-mail:10524354@qq.com
2016-03-03