雞腿菇復合制劑的抗S180腫瘤作用*

劉芹，耿雪冉，許瀛引，張薇薇，王賀祥**

（1.河南省農業科學院植物營養與資源環境研究所，河南鄭州450002；2.中國農業大學農業生物技術國家重點實驗室，北京100193）

雞腿菇復合制劑的抗S180腫瘤作用*

劉芹1，耿雪冉2，許瀛引2，張薇薇2，王賀祥2**

（1.河南省農業科學院植物營養與資源環境研究所，河南鄭州450002；2.中國農業大學農業生物技術國家重點實驗室，北京100193）

旨在探討雞腿菇復合制劑的抗腫瘤作用，為雞腿菇復合制劑的推廣應用提供理論基礎。通過腹股溝皮下注射S180腫瘤細胞建立小鼠腫瘤模型，把接種腫瘤細胞后的小鼠隨機分為陰性對照組，陽性對照組，雞腿菇復合制劑低、中、高劑量組，2周后檢測小鼠體重和腫瘤大小的不同。結果表明抗癌藥物環磷酰胺的腫瘤抑制率為71.8%；雞腿菇復合制劑低劑量組（1 233 mg·kg-1）、中劑量組（2 466 mg·kg-1）和高劑量組（3 699 mg·kg-1）的腫瘤抑制率分別為14.3%、43.5%和50.4%。這說明在實驗條件下，雞腿菇復合制劑具有明顯抑瘤作用，并呈現一定的劑量依賴性。

雞腿菇復合制劑；環磷酰胺；抗腫瘤

腫瘤已成為威脅人類健康與生命的主要疾病之一。目前，放、化療技術在治療腫瘤方面已經取得了很大的進步，但是放、化療也具有很大的副作用［1-3］。環磷酰胺是目前臨床上常用的抗腫瘤藥物，其本身不具有抗腫瘤的作用，但是經肝線粒體細胞色素P450和肝微粒體酶作用后生成的具有較強烷化作用的磷酰胺氮芥，對腫瘤細胞有較強的細胞毒性作用，同時也對免疫相關細胞呈現出較強的免疫抑制作用，所以用環磷酰胺治療時會引起機體免疫力的下降，副作用較大［3-4］。尋求天然無毒副作用的抗癌藥物已經成為近年來研究的重點［1，5-6］。雞腿菇復合制劑主要是由雞腿菇等多種食用菌及中草藥組成。本研究采用腋下接種S180腫瘤的方法建立荷瘤小鼠模型，探究此制劑的抗腫瘤作用，為其進一步開發利用提供理論基礎。

1　材料和方法

1.1藥品及主要試劑

雞腿菇復合制劑由蘇州佛果生物科技有限公司提供，主要成分為雞腿菇、猴頭菇、金針菇、草菇、香菇、茯苓、人參、枸杞子、佛手等。

環磷酰胺購自通化茂祥制藥有限公司。

1.2實驗動物

雄性昆明鼠，體重18 g～22 g，由北京興隆實驗動物養殖廠提供。動物實驗設施持續保持屏障環境標準。主要環境指標的控制范圍：溫度（25±2）℃，相對濕度（55±5）%，光照明∶暗為12 h∶12 h。動物飼養在標準盒內，每周2次更換墊料和籠具，保持盒內環境清潔干燥；每日添加飼料和飲水，保持動物自由飲食活動。實驗遵循中國農業大學實驗動物倫理規范。

1.3實驗方法

1.3.1小鼠S180腫瘤體內傳代

將腫瘤細胞懸液在離心機上以1 000 r·min-1，離心5 min，小心去除上清，用無菌生理鹽水清洗2次后，吹打成單細胞懸液，調整濃度為1×105個·mL-1備用。吸取腫瘤細胞懸液0.2 mL注射入小鼠腹腔；在實驗室條件飼養小鼠，大致1周后可見小鼠腹部明顯隆起。引頸處死小鼠后，用無菌注射器抽取乳白色的瘤液，注入健康小鼠腹腔傳代3次，使S180腫瘤細胞在小鼠體內能夠穩定生長。

1.3.2腫瘤動物模型的建立

在無菌條件下，取傳代7 d的S180瘤源小鼠，引頸處死，無菌操作從小鼠腹腔內抽取乳白色的瘤液，用生理鹽水稀釋成瘤細胞懸液，并調整細胞濃度為1×107個·mL-1，在昆明小鼠右腹股溝皮下注射瘤細胞懸液，每只小鼠0.2 mL。

1.3.3分組與給藥方式

接種腫瘤細胞后的小鼠隨機分為5組，每組12只。5組小鼠分別為陰性對照組（生理鹽水組）、陽性對照組（環磷酰胺組，30 mg·kg-1）以及雞腿菇復合制劑低劑量組（1 233 mg·kg-1）、中劑量組（2 466 mg·kg-1）和高劑量組（3 699 mg·kg-1）；另取12只未注射腫瘤細胞的小鼠作為正常組。

對陽性對照組和復合制劑處理組的每只小鼠于接種腫瘤細胞24 h后開始灌胃給藥，連續給藥2周；陰性對照組和正常組小鼠每天灌胃同樣體積的生理鹽水。

1.3.4稱量體重

分別于0天（接種腫瘤細胞前）、第5天、第10天和第16天稱量并記錄各組小鼠的體重。

1.3.5腫瘤抑制率

第16天引頸處死小鼠，分離腫瘤并用電子天平稱取重量。抑瘤率（P）公式為：

P=（C-T）/C×100%

式中：C為陰性對照組小鼠平均瘤重；T為實驗組小鼠平均瘤重。

1.4統計學分析

實驗數據采用SPSS 20.0軟件進行統計學分析，組間差異采用t檢驗，以P＜0.05為有統計學意義。

2　結果與分析

不同劑量的雞腿菇復合制劑對小鼠體內S180腫瘤生長抑制率見表1。

表1　雞腿菇復合制劑對小鼠體內S180腫瘤生長的影響Tab.1Effects of Coprinus comatus-compound on S180 tumor growth in mice

由表1可見，與陰性對照組相比，抗癌藥物環磷酰胺的腫瘤抑制率為71.8%，差異極顯著（P＜0.01）。雞腿菇復合制劑低劑量組的腫瘤抑制率為14.3%，差異不顯著；而中劑量組和高劑量組的腫瘤抑制率分別為43.5%和50.4%，都達到了差異極顯著水平（P＜0.01）。這說明雞腿菇復合制劑具有很好的抗腫瘤作用，且呈現出一定的劑量依賴性。雞腿菇復合制劑的低劑量、中劑量和高劑量折合60 kg體重的成年人每天的服用量分別為6 g、12 g和18 g。

雞腿菇復合制劑對小鼠體重的影響見表2和圖1。

表2　雞腿菇復合制劑對小鼠體重的影響Tab.2Effects of Coprinus comatus-compound on body weight in mice

圖1　雞腿菇復合制劑對小鼠體重的影響Fig.1Effects of Coprinus comatus-compound on body weight in mice

由表2和圖1可知，與陰性對照組相比，陽性對照組小鼠的體重明顯偏低，且后期有下降的趨勢，說明抗癌藥物環磷酰胺的腫瘤抑制率雖高，但毒副作用明顯。雞腿菇復合制劑的腫瘤抑制率雖不如環磷酰胺，但實驗小鼠的體重逐步上升，預示其沒有毒副作用或毒副作用不大。

3　結論

根據文獻報道及預實驗，建立了小鼠荷S180腫瘤模型。實驗過程中對各組小鼠灌胃不同劑量的雞腿菇復合制劑，結果表明雞腿菇復合制劑具有很好的抗腫瘤作用。

［1］Zong A，Cao H，Wang F.Anticancer polysaccharides from natural resources：a review of recent research［J］.Carbohydr Polym，2012，90（4）：1395-1410.

［2］Bao X，Yuan H，Wang C，et al.Antitumor and immunomodulatory activities of a polysaccharide from Artemisia argyi［J］. Carbohydr Polym，2013，98（1）：1236-1243.

［3］Chen X，Nie W，Fan S，et al.A polysaccharide from Sargassum fusiforme protects against immunosuppression in cyclophosphamide-treated mice［J］.Carbohydr Polym，2012，90（2）：1114-1119.

［4］Ding X，Zhu F，Gao S.Purification，antitumour and immunomodulatory activity of water-extractable and alkali-extractable polysaccharides from Solanum nigrum L.［J］.Food C-hemistry，2012，131（2）：677-684.

［5］Yang Z，Xu J，Fu Q，et al.Antitumor activity of a polysaccharide from Pleurotus eryngii on mice bearing renal cancer［J］. Carbohydrate Polymers，2013，95（2）：615-620.

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Antitumor Effect of Coprinus comatus-compound on S180 Tumor-bearing Mice

LIU Qin1，GENG Xue-ran2，XU Ying-yin2，ZHANG Wei-wei2，WANG He-xiang2
（1.Institute of Plant Nutrition and Resource Environment，Henan Academy of Agricultural Sciences，Zhengzhou 450002，China；2.State Key Laboratory for Agrobiotechnology and Department of Microbiology，China Agricultural University，Beijing 100193，China）

The antitumor activities of Coprinus comatus-compound were evaluated in Sarcoma 180 tumor-bearing mice by intraperitoneal administration.The tumor-bearing mice were randomly divided into five groups（twelve mice in each group），such as tumor-bearing mice administrated intraperitoneally with cyclophosphamide（CTX）at the dose of 30 mg·kg-1；tumor-bearing mice administrated intraperitoneally with Coprinus comatus-compound at the respective dose of 1 233 mg·kg-1，2 466 mg·kg-1，3 699 mg·kg-1；tumor-bearing mice administrated intraperitoneally with the same volume of normal saline.Tumor were dissected and weighed after two weeks.Coprinus comatus-compound inhibited the growth of sarcoma 180 dose-dependently，with the inhibitory rates of 14.3%，43.5%，50.4%at the respective dose of 1 233 mg·kg-1，2 466 mg·kg-1，3 699 mg·kg-1.As expected，CTX，a frequently used chemotherapeutic drug，showed a higher tumor inhibition rate of 71.8%.In the present study，Coprinus comatus-compound could inhibit the growth of sarcoma 180 in vivo through oral administration in mice.

Coprinus comatus-compound；cyclophosphamide；antitumor

S646.9

A

1003-8310（2016）03-0055-03

10.13629/j.cnki.53-1054.2016.03.012

現代農業產業技術體系建設專項基金（CARS-24）。

劉芹（1986-），女，博士，助理研究員，主要從事藥用與食用真菌研究。E-mail：liuqin_bio@163.com

**通信作者：王賀祥（1957-），男，博士，教授，主要從事藥用與食用真菌研究。E-mail：hxwang@cau.edu.cn

2016-03-10