常見臨床標本的病原菌譜變化及耐藥趨勢分析

王淑玉，姚姍姍

(菏澤市立醫院 檢驗科，山東 菏澤274031)

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常見臨床標本的病原菌譜變化及耐藥趨勢分析

王淑玉，姚姍姍

(菏澤市立醫院 檢驗科，山東 菏澤274031)

由于抗生素易于獲取且適用廣泛，在院內及院外都存在著過度使用及頻繁更換的情況，從而導致引起感染的細菌譜明顯改變，對各種抗生素耐藥的菌株也逐年增多。為了應對耐藥菌的大量出現，臨床近年來開始逐步重視抗生素的規范使用。本研究將對本院近兩年臨床標本的病原菌分布及耐藥情況進行回顧性分析，從而及時監控抗生素逐步合理使用后本地區病原菌譜的變化及耐藥趨勢，為臨床治療提供更合理的依據。

1 材料與方法

1.1 標本來源 2013年1月至2014年12月我院門診及住院患者的各類標本共13576份，其中痰液6943份(51.14%)，血液2296份(16.91%)，尿液850份(6.26%)，腦脊液775份(5.71%)，膿液1745份(12.85%)，胸水414份(3.05%)，膽汁105份(0.73%)，其他標本439份(3.23%)。

1.2 試劑與儀器 VITEK2全自動微生物鑒定系統、GPS-SH和GNS-NT專用藥敏卡均購自法國生物梅里埃公司。標準菌株為：大腸埃希菌(ATCC25922)、銅綠假單胞菌(ATCC27853)、金黃色葡萄球菌(ATCC29213)、肺炎克雷伯菌(ATCC13883)，購于衛生部臨檢中心。

1.3 細菌鑒定及藥敏試驗 按臨床微生物操作規程接種標本，由VITEK2全自動微生物鑒定系統鑒定菌株。藥敏采用VITEK系統的GPS-SH和GNS-NT專用藥敏卡，少數細菌采用K-B紙片擴散法進行藥敏試驗，結果判讀標準按2010年CLSI文件規定的判斷標準[1,2]。

1.4 統計學方法 采用WHONET5.6和SPSS20.0軟件進行數據統計分析。采用卡方檢驗進行統計分析，P<0.05有統計學意義。

2 結果

2.1 病原菌的檢出及分布情況

兩年共收到陽性細菌標本4304份，其中2013年分離陽性細菌標本1692份，革蘭陽性菌391株(23.11%)，革蘭陰性桿菌1237株(73.11%)，真菌64株(3.78%)。2014年分離陽性細菌標本2612份，其中革蘭陽性菌663株(25.38%)，革蘭陰性菌1803株(69.03%)，真菌146株(5.59%)。各年病原菌的檢出及分布情況見表1。

表1 各年病原菌分布及其構成比

*：與2013年相比，P<0.05，具有統計學意義。

2.2 檢出率在前五位的細菌及其耐藥情況

近兩年檢出率在前五位的細菌共2946株，占檢出總數的68.24%，分別為假單胞菌屬、埃希菌屬、不動桿菌屬、金黃色葡萄球菌、克雷伯菌屬，五種菌的排名及耐藥情況見表2、表3和表4。

表2 檢出率前5位的細菌排名

表3 不同年份主要革蘭氏陰性細菌的耐藥率(%)比較

*：與2013年相比，P<0.05，具有統計學意義。

表4 不同年份主要革蘭氏陽性細菌的耐藥率(%)比較

注：與2013年相比，P>0.05。

2.3 多重耐藥菌的檢出情況

多重耐藥菌，廣義上也包括廣泛耐藥菌或超級細菌，其產生和發展給臨床診治帶來巨大挑戰[3]。經統計，我院多重耐藥菌也逐年增多，具體檢出情況見表5。

3 討論

從本文細菌分離結果看，兩年來痰液標本送檢率最高，達51.14%，膽汁標本送檢率最低，占送檢標本總數的0.73%，但其病原菌分離率最高，達75.7%。

表5 多重耐藥菌的分布及構成比

*：與2013年相比，P<0.05，具有統計學意義。

在各種臨床標本中，分離出的病原菌主要為革蘭氏陰性桿菌，占70.4%，高于周云松等[4]報道的61%，其次為革蘭氏陽性菌，占24.4%，真菌占5.2%，與相關報道基本相符[5]。

根據數據統計結果顯示，自我院嚴格控制抗生素使用以來，引起感染的病原菌譜開始出現變化，由表1可見，革蘭氏陰性菌的檢出呈減少趨勢，與2013年相比有顯著性差異(P<0.05)，其中假單胞菌屬和沙雷菌屬的檢出率減少，而克雷伯菌屬及志賀菌屬的檢出呈上升趨勢，這些菌株的變化與2013年相比都有顯著性差異(P<0.05)。與2013年相比，革蘭氏陽性菌的檢出無顯著性變化(P>0.05)。同時，由表2也可看出，近兩年檢出率在前五位的病原菌無變化，分別為假單胞菌屬、埃希菌屬、不動桿菌屬、金黃色葡萄球菌、克雷伯菌屬，與徐韞健等[5]報道的嗜麥芽窄食單胞菌位于前五位的研究結果有細微差別，但兩年來病原菌的構成有所不同，與2013年相比，2014年假單胞菌屬明顯減少，其檢出率2013年排名第一，2014年排名第四。

兩年間除了病原菌譜發生了部分變化，病原菌對抗菌藥物的敏感性也發生了改變。由表3可見，革蘭氏陰性菌對抗菌藥物的耐藥率高，其中銅綠假單胞菌對頭孢唑啉、復方新諾明、頭孢替坦、頭孢曲松、氨芐西林/舒巴坦、呋喃妥因的耐藥率在95%以上，對阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、亞胺硫霉素相對敏感，與2013年相比，2014年檢出的銅綠假單胞菌對多種抗生素的耐藥率出現了下降，其中對頭孢曲松、慶大霉素、環丙沙星、妥布霉素、左氟沙星、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、亞胺硫霉素等抗菌藥物的耐藥率下降明顯(P<0.05)。

大腸埃希菌對哌拉西林的耐藥率高，達93.33%，對頭孢唑啉、頭孢曲松、左氟沙星的耐藥率在75%以上，低于梁劍等[6]的報道。對呋喃妥因、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、亞胺硫霉素較為敏感，與2013年相比，2014年檢出的大腸埃希菌對環丙沙星、妥布霉素、左氟沙星、阿卡米星、頭孢他啶、頭孢吡肟等抗菌藥物的耐受率下降明顯(P<0.05)。

鮑曼不動桿菌耐藥性強，對絕大多數抗菌藥物不敏感，其中對頭孢唑啉、氨芐西林、阿卡米星的耐藥率達100%，對頭孢替坦、呋喃妥因的耐藥率達99%以上，對頭孢他啶、頭孢曲松、氨芐西林/舒巴坦、環丙沙星、頭孢吡肟的耐藥率在90%以上，明顯高于相關報道[7]。據統計結果顯示，2014年該菌對抗菌藥物的敏感性有所升高，其中對甲氧芐啶/磺胺甲惡唑、頭孢曲松、氨芐西林/舒巴坦、慶大霉素、環丙沙星、妥布霉素、左氟沙星、頭孢他啶、頭孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦、亞胺硫霉素升高明顯(P<0.05)。

肺炎克雷伯菌對哌拉西林、氨芐西林的耐藥率達100%，對頭孢替坦、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、亞胺硫霉素較為敏感，與2013年相比，2014年檢出的肺炎克雷伯菌對抗菌藥物的敏感性升高，其中對頭孢唑啉、甲氧芐啶/磺胺甲惡唑、頭孢曲松、氨芐西林/舒巴坦、慶大霉素、妥布霉素、頭孢他啶、頭孢吡肟的敏感性增高明顯(P<0.05)。

金黃色葡萄球對青霉素G的耐藥率高達90%以上，明顯高于王曉旭等[8]報道，而對喹努普汀/達福普汀、呋喃妥因、萬古霉素、替加環素、利奈唑烷極為敏感，與陸靜蘭等[9]的報道一致。另外統計結果顯示，與2013年相比，2014年檢出的金黃色葡萄球菌對各類抗菌藥物的耐藥性無明顯變化(P>0.05)。

由常見病原菌的耐藥結果可見，隨著抗菌藥物應用逐漸規范，病原菌對部分抗菌藥物的耐藥性有降低趨勢，但是多重耐藥菌仍大量存在，兩年間我院共分離多重耐藥細菌1491 株，占檢出細菌的34.5%，其中金黃色葡萄球菌232株，肺炎克雷伯菌190株，2014年兩種細菌的檢出量較2013年增長明顯(P<0.05)，銅綠假單胞菌204株,其檢出率呈下降趨勢(P<0.05)，大腸埃希菌、產酸克雷伯、鮑曼不動桿菌、腸球菌無明顯變化。

由此可見，隨著臨床對抗菌藥物的規范使用加大重視，病原菌譜及耐藥趨勢發生了部分變化，這種變化是否有積極意義，需要繼續對病原菌及其耐藥情況進行監測。另外，臨床細菌耐藥性強仍是臨床面臨的嚴峻問題，臨床醫生應嚴格控制抗菌藥物的用量及適用指征，重視住院病人的病原菌標本培養，加強與微生物實驗室的溝通，及時根據病原菌的耐藥情況調整用藥。

[1]Clinical and Laboratory Standards Institute.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing[S].Fifteenth Informational Supplement,2010,M100-S20,Vol 30 No.1.

[2]Clinical and Laboratory Standards Institute.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing[S].Fifteenth Informational Supplement,2010,M100-S20-U,Vol 30 No.15.

[3]董 梅，匡鐵吉.臨床細菌多重耐藥機制研究進展及對策[J].解放軍醫學院學報,2013,34(2):101.

[4]周云松，夏光琴，賀 梅，等.2012年醫院感染病原菌分布與藥敏分析[J].中華醫院感染學雜志，2014(22):5495-5496,5505.

[5]徐韞健，易建云，范慎薇，等.2009-2011年我院優勢細菌的藥敏分析[J].國外醫藥抗生素分冊，2013,34(1):21.

[6]梁 劍，曾 玲，李江，等.208例尿路感染大腸埃希菌耐藥性分析[J].醫學臨床研究，2014,31(3):489.

[7]吳 琳，吳至成，翟英超，等.海南醫學院附屬醫院鮑曼不動桿菌的感染分布及耐藥性分析[J].南昌大學學報(醫學版)，2012,52(3):21.

[8]王曉旭，李秀成，王 禹，等.對2451份臨床標本中病原菌感染分布及耐藥性分析[J].航空航天醫學雜志，2012,23(9):1109.

[9]陸靜蘭，廖 彬.311株金黃色葡萄球菌的耐藥性分析[J].廣西醫學，2013,35(10):1392.

1007-4287(2016)10-1760-03

王淑玉，女，34歲，碩士，主管技師，研究方向：微生物檢驗。

2015-04-25)