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紫景天對大鼠牙周組織抗氧化作用的影響

2016-11-16 09:43:49王曉峰張?zhí)旆?/span>
中國實驗診斷學(xué) 2016年10期
關(guān)鍵詞:血清

王曉峰,王 偉,張?zhí)旆颍?強,袁 琳,劉 聰

(吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 口腔科,吉林 長春130033)

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紫景天對大鼠牙周組織抗氧化作用的影響

王曉峰,王 偉*,張?zhí)旆颍?強,袁 琳,劉 聰

(吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 口腔科,吉林 長春130033)

牙周炎(Periodontitis)是牙周較深層組織的慢性破壞性疾病,其特點是牙周支持組織的進行性破壞,可造成牙周組織的不可逆性損害[1]。有研究發(fā)現(xiàn)[2],在牙周病的發(fā)生發(fā)展過程中,氧源性自由基在牙周損傷的分子機制中扮演了重要的角色。本研究通過分析紫景天對大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量以及谷胱甘肽氧化酶(GSH-Px)活力的影響,以期闡明紫景天在抗氧化作用方面預(yù)防和治療牙周病的作用機理。

1 材料和方法

1.1 樣品來源及純度 紫景天原位凝膠劑,濃度分別為1.0%、0.5%、0.25%,由吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院制劑室提供,批號:20120725。陽性對照藥復(fù)方牙痛酊,貴州同濟堂制藥有限公司生產(chǎn),批號:20120102。

1.2 試劑 南京建成生物工程制品研究所SOD試劑盒,批號:20120223;MDA試劑盒,批號:20120213;GSH試劑盒,批號:20120213。

1.3 儀器 磨牙機,吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院口腔科提供。

1.4 建立大鼠實驗性牙周炎模型[3,4]取Wistar大鼠60只,體重180-280 g,雌雄均等,由吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院動物實驗中心提供。合格證號: 2003-0001。取10只為正常對照組,剩余動物以3%水合氯醛10 ml/kg腹腔注射麻醉,剝離上頜牙齦,將4號無菌絲線先加入到0.5個麥?zhǔn)蠁挝谎例l卟啉單胞菌的菌液中2 h,雙股穿過大鼠第一和第二磨牙間隙,在頰側(cè)打結(jié)3次,再繞過第一磨牙,于腭側(cè)第一磨牙和第二磨牙間結(jié)扎并打結(jié)3次,以持續(xù)刺激牙齦。從第3周開始觀察牙齦紅腫、糜爛、溢膿、探診出血等癥狀,并按國際通用標(biāo)準(zhǔn)評價牙齦指數(shù)及齦溝出血指數(shù)。于給藥后第15天,以3%水合氯醛10 ml/kg腹腔注射麻醉,腹主動脈取血,測量血清中的SOD、GSH-Px、MDA。

1.5 檢測方法 (1)血清SOD活力測定:采用亞硝酸鹽法;(2)血清MDA的測定:采用硫代巴比妥酸法; (3)血清GSH-Px活力測定:采用硫代二硝基苯甲酸直接法。

2 結(jié)果

由表1結(jié)果可見,模型組血清中SOD、GSH-Px含量比對照組明顯降低,MDA含量明顯升高,紫景天總黃酮1.0%、0.5%和復(fù)方牙痛酊均可明顯升高大鼠血清中SOD、GSH-Px含量,降低MDA含量。表明紫景天總黃酮及復(fù)方牙痛酊均可明顯減輕對大鼠實驗性牙周炎的損傷程度,對實驗性牙周炎具有一定的治療作用。

表1 紫景天總黃酮給藥對實驗性牙周炎大鼠血清中SOD、GSH-Px、MDA的影響

注:與模型對照組比較*P<0.05;**P<0.01;***P<0.001。

3 討論

牙周炎的主要病理變化之一是牙槽骨吸收。目前牙周炎的治療手段主要為控制或消除炎癥并促進牙周組織再生。臨床上牙周炎的藥物治療主要是針對菌斑細(xì)菌使用抗生素治療,如甲硝哇、替硝哇等。這類藥物雖然有較好的療效,但長期應(yīng)用易導(dǎo)致菌群失調(diào),細(xì)菌耐藥性增加,以及胃腸道刺激性等毒副作用[5]。因此,針對牙周炎病變過程中牙周組織的破壞和牙槽骨的吸收,阻斷炎癥因子的作用,研究開發(fā)高效低毒的牙周炎治療藥物為臨床治療牙周炎所亟需。中藥具有毒副作用少、價格便宜、標(biāo)本兼治的優(yōu)勢,廣受關(guān)注。

我們前期實驗成功建立了實驗性牙周炎動物模型,已經(jīng)證明紫景天治療性給藥可明顯減輕“實驗性牙周炎”大鼠牙齦指數(shù)、齦溝出血指數(shù)。體外抑菌實驗結(jié)果表明,紫景天對牙齦卟啉菌、放線共生放線桿菌、產(chǎn)黑色素擬桿菌均有較好的抑菌作用,即對牙周炎易感菌有明顯的抑制作用。可見,紫景天原位凝膠劑對牙周炎具有“標(biāo)本兼治”的治療作用,同時未見明顯的毒副作用。

有研究證明,在牙周病的發(fā)生發(fā)展過程中,正是氧化應(yīng)激反應(yīng)參與了牙周炎的致病機制[6]。本實驗發(fā)現(xiàn),紫景天原位凝膠劑可顯著提高SOD、GSH-Px的活性,降低可間接反應(yīng)細(xì)胞損傷程度的脂質(zhì)過氧化物分解產(chǎn)物MDA的含量。證明紫景天黃酮具有清除氧自由基的抗氧化作用,對牙周組織可以起到保護作用。

[1]Otom-Corgel J,Pucher JJ,Rethman MP,et al.State of the science: chronic periodontitis and systemic health[J].J Evid Based Dent Pract ,2012,12(3): 20.

[2]Waddington RJ,Moseley R,Embery G.Reactive oxygen species:a potential role in the pathogenesis of periodontal diseases[J].Oral Dis,2000,6(3):138.

[3]車彥海,李桂英,趙令君,等.綜合方法建立牙周炎動物模型的效果評價[J].吉林大學(xué)學(xué)報,2006,32(6):1119.

[4]Xie R,Kuijpers -Jagtman AM,Maltha JC.Inflammatory responses in two commonly used rat models for c tooth movement:comparison with ligature-induced petiodontitis[J].Arch Oral Biol,2011,56:159.

[5]Cuesta AI,Jewtuchowicz VM,Brusca MI,et al.Antibiotic susceptibility of Staphylococcus aureus isolates in oral mucosa and pockets of patients with gingivitis-periodontitis[J].Acta Odontol Latinoam,2011,24: 35.

[6]Nibali L,Donos N.Periodontitis and redox status: a review[J].Curr Pharm Des,2013,19(15):2687.

吉林省科技廳專項項目(20160101080JC);吉林省直衛(wèi)生專項項目(CZZR2014010)

1007-4287(2016)10-1629-02

2015-06-16)

*通訊作者

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