3675份痰標本中病原菌的分布及藥敏結果分析

周秀萍，楊長順

（湖南醫藥學院，湖南懷化418000）

3675份痰標本中病原菌的分布及藥敏結果分析

周秀萍1，楊長順2

（湖南醫藥學院，湖南懷化418000）

目的分析痰標本中病原菌的分布及其藥敏結果，為臨床合理抗菌治療提供科學依據。方法按照《全國臨床檢驗操作規程》進行病原菌分離培養，采用珠海迪爾全自動細菌鑒定系統進行菌株的鑒定及藥物敏感實驗。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的檢測采用頭孢西丁紙片法。結果3675份痰標本中共檢出1397株常見病原菌，檢出率為38.0%。革蘭陰性桿菌檢出率為63.1%，其中肺炎克雷伯菌20.4%、鮑曼不動桿菌18.2%，大腸埃希菌14.3%，銅綠假單胞菌10.2%。革蘭陽性球菌檢出率為28.8%，其中肺炎鏈球菌檢出率為18.8%，金黃色葡萄球菌檢出率為10.0%。真菌檢出率為8.2%。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌檢出率為33.1%，產超廣譜β－內酰胺酶大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌的檢出率分別為57.5%和33.3%，檢出細菌大多具有高耐藥及多重耐藥性。結論下呼吸道感染病原菌中革蘭陰性桿菌感染率較高，分離細菌大多具有高耐藥性和多重耐藥性。

痰標本；病原菌；分布；耐藥性

呼吸道感染為臨床最常見的感染性疾病之一，可由細菌、病毒、真菌、支原體等多種病原體引起，據統計在發達國家以病毒感染為主，而在發展中國家則以細菌感染為主［1］。痰標本的細菌學檢查對于呼吸道疾病的診斷及治療具有重要指導意義。近年來由于抗菌藥物的大量使用，使得臨床痰標本檢出菌譜發生改變，檢出菌耐藥率不斷增加，有些菌株表現為多重耐藥，這已成為臨床抗感染治療最關注的問題。為指導臨床合理用藥，筆者對懷化市第一人民醫院2015年1月－2015年12月送檢3675份痰標本中分離的1397株主要病原菌及其藥敏結果進行統計分析，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源及采集方法所有痰標本均來自我院2015年1月-2015年12月的住院和門診患者。標本采集方法：患者清晨清水漱口三次后用力咳痰或用吸痰管吸痰至無菌痰盒內，及時送檢。微生物室用胰酶對痰標本進行消化并進行細胞學檢查，：白細胞數＞25/HP，鱗狀上皮細胞數＜10/LP為合格標本。

1.2 儀器及試劑血瓊脂平板、中國蘭平板及含萬古霉素的巧克力平板來自廣州迪景生物有限公司，細菌鑒定及藥敏系統來自珠海迪爾生物有限公司，頭孢西丁紙片購于英國Oxoid公司。

1.3 質控菌株大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、金黃色葡萄球菌ATCC25923購自中國菌種保存中心。

1.4 方法細菌培養：按《全國臨床檢驗操作規程》［2］進行標本分離培養。送檢合格的痰標本分別接種于血瓊脂平板、中國蘭平板及含萬古霉素的巧克力平板。細菌鑒定：挑選可疑菌落進行革蘭染色，氧化酶和觸酶等實驗對分離細菌進行初步鑒定，然后選擇相應的鑒定和藥敏卡進行菌種的鑒定及藥物敏感試驗。按照CLSI［3］提供的ESBLs表型篩選及確認方法檢測超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs），耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的檢測采用頭孢西丁紙片法。同一病人連續送檢，如檢出同一株細菌，按一株計。

2 結果

2.1 分離常見病原菌構成比3675份痰標本中共分離出常見病原菌1397株，分離率達38.0%。見表1。

表1 痰標本分離常見病原菌的構成比

2.2 大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌耐藥率見表2。

2.3 鮑曼不動桿菌和銅綠假單胞菌耐藥率見表3。

2.4 肺炎鏈球菌和金黃色葡萄球菌耐藥率見表4。金黃色葡萄球菌經頭孢西丁紙片法確定耐甲氧西林金黃色葡萄球菌檢出率為33.1%（46/139）。

3 討論

本院送檢痰標本中檢出的病原菌以革蘭陰性桿菌為主，檢出率高達63.1%，其中肺炎克雷伯菌、鮑曼不動桿菌，大腸埃希菌及銅綠假單胞菌為4種最主要的革蘭陰性檢出菌，與以往的報道基本一致［4-6］。分離到的革蘭陰性桿菌大多都具有高耐藥性和多重耐藥性，大腸埃希菌產ESBLs率為57.5%，肺炎克雷伯菌產ESBLs率33.3%，低于有關報道［7］，由于ESBLs能破壞β-內酰胺酶抗菌藥物，可明顯降低頭孢菌素的活性，導致產ESBLs菌株對青霉素類、第一代頭孢、第二代頭孢、第三代頭孢菌素和氨曲南均耐藥。表2結果顯示大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對氨芐西林、復方新諾明、頭孢呋辛、頭孢曲酸和頭孢唑啉的耐藥率均超過50%。本結果顯示亞胺培南和美洛培南的抗菌活性好，耐藥率非常低。阿米卡星和派拉西林/他唑巴坦對本院分離的這兩種細菌也具有較好的抗菌活性。表3結果顯示鮑曼不動桿菌呈現多重耐藥趨勢，僅表現出對多粘菌素和復方新諾明有較好的敏感性，對其他抗菌藥物均顯示高耐藥性。銅綠假單胞菌對常見抗菌藥物敏感性較好，尚未出現對多種抗生素耐藥的趨勢。

表2 大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐藥率（%）

表3 鮑曼不動桿菌和銅綠假單胞菌耐藥率（%）

表4 肺炎鏈球菌和金黃色葡萄球菌耐藥率（%）

檢出的革蘭陽性球菌以肺炎鏈球菌和金黃色葡萄球菌為主。表4結果顯示98.5%肺炎鏈球菌都耐青霉素G，但對利福平和左氧氟沙星敏感性較好，尚未發現耐利奈唑胺及萬古霉素的菌株。金黃色葡萄球菌對利福平和氯霉素敏感性較好，尚未發現耐利奈唑胺和萬古霉素的菌株。經頭孢西丁紙片法確定耐甲氧西林金黃色葡萄球菌檢出率為33.1%，萬古霉素對MRSA有較好的抗菌活性，但國外已報道檢出耐萬古霉素的金黃色葡萄球菌，故臨床科室應引起重視。

由于各地用藥習慣的不同，細菌在不同抗菌藥物選擇性壓力下生存狀況不一致，從而導致引起呼吸道感染的病原菌存在明顯的地區差異［8-10］，并在不斷變化。由于臨床上不規范及不合理的濫用抗菌藥物，造成細菌的耐藥現象越來越嚴重，多重耐藥菌株不斷增加，給臨床治療帶來了極大的困難。因此需要對本地區呼吸道感染的病原學進行監測，了解本地區病原菌分布及耐藥情況，為臨床醫生合理選用抗菌藥物，減少細菌耐藥性提供科學依據。

［1］姜軍，周燕明，王予川.貴陽地區住院兒童急性下呼吸道感染病毒與細菌病原學研究［J］.中國婦幼保健，2013，28：4472-4475.

［2］葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程［M］.第3版.南京：東南大學出版社，2006：357-360.

［3］Clinical and Laboratory Standards Institute.Performance Standards for antimicrobial susceptiility testings［S］.M100-S20.CLSI，2010.

［4］陶興和，朱以軍.下呼吸道感染中非發酵菌的分布及耐藥分析［J］.中華醫院感染學雜志，2010，2（2）：275-277.

［5］嚴其容，王靖，程穎，等.2009-2011年北京某醫院呼吸道感染患者病原譜構成分析［J］.中華醫院感染學雜志，2011，21（12）：2626-2628.

［6］萬玉英，劉偉芬，吳紅麗，等.1865株肺部感染病原菌分布及耐藥分析［J］.實驗與檢驗醫學，2015，33（4）：508-510.

［7］楊劍，王小中.產超廣譜β-內酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐藥情況分析［J］.實驗與檢驗醫學，2015，34（2）：229-230.

［8］梁玉蘭，趙新惠，潘士虎，等.2455例慢性阻塞性肺疾病痰標本病原菌分布及耐藥性分析［J］.國際檢驗醫學雜志，2015，36（20）：3064-3065.

［9］陳秀蘭，袁學華，王字卉.肺炎患兒痰標本病原菌分布與耐藥性分析［J］.中華醫院感染雜志，2015，25（9）：2117-2119.

［10］朱芳，張莉，程利.重癥監護病房下呼吸道感染細菌分布及耐藥分析［J］.實驗與檢驗醫學，2015，33（4）：499-501.

R446.5，Q939.92

A

1674-1129（2016）05-0623-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2016.05.028

2016-05-19；

2016-06-20）