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1例A3亞型

2016-11-15 08:18:53
實驗與檢驗醫學 2016年5期
關鍵詞:檢測

王 可

(吉安市中心血站,江西吉安343000)

·病例報告·

1例A3亞型

王 可

(吉安市中心血站,江西吉安343000)

疑難血型鑒定;ABO亞型;A3亞型;臨床輸血

臨床輸血配型時常常會涉及到紅細胞血型、抗原-抗體反應等免疫學問題。免疫血液學是伴隨著臨床輸血的歷史而發展,是臨床輸血安全有效的重要保障。最近筆者接收醫院患者血型正反定型不符,疑難血型鑒定申請1例,經血型血清學試驗后確認為A3亞型,現報告如下。

1 病例簡介

患者,男,6歲,2015年10月20日因皮膚出血點、口腔黏膜血皰就診,接診醫生為患者申請備血,在血型檢查中,發現ABO血型正反定型不一致,隨后申請疑難血型鑒定。

2 血型血清學試驗

2.1 試劑與方法抗-A、抗-B、抗-AB、抗-A1和抗-H試劑均由上海血液生物醫藥有限責任公司提供,A細胞、B細胞、O細胞反定型試劑紅細胞均由北京金豪制藥股份有限公司提供;經典試管法鑒定ABO血型,并采用微柱凝膠、吸收放散和血型物質檢測等方法相結合[1],在顯微鏡下觀察結果。

2.2 患者血型正反定型見表1。

2.3 患者H抗原反應結果見表2。

2.4 患者放散液反應結果見表3。

2.5 吸收放散試驗取1ml患者紅細胞,用生理鹽水充分洗滌三次后,制成壓積紅細胞,再與等量的抗-A血清試劑混合,4℃吸收1h,其間顛倒搖勻4次,用冰鹽水在13min內洗滌輕吸打離心棄上清液反復6次后得到吸收后的壓積紅細胞,再加入等量的鹽水混勻,至56℃水浴中輕搖1min,靜置9min后離心取放散液與Ac、Oc反應,患者放散液與Ac有凝集、與Oc無凝集,表明患者紅細胞有弱A抗原存在。

2.6 唾液血型物質檢測唾液中檢出A、H兩種血型物質。

2.7 直接抗人球試驗、間接抗人球試驗均呈陰性。

3 討論

當經血型血清學試驗顯示正反定型不一致及抗原減弱等多種表現形式時,稱為ABO亞型。ABO血型亞型是表型,很多亞型具有特異性的抗原,主要是經血型血清學試驗以抗原性弱為主要特征的多種表型,而經血型血清學確定的紅細胞同一ABO亞型,經過抗原分子水平、糖基轉移酶和基因水平等研究亦證實其存在著異質性[2]。ABO血型表型的判定,特別是對亞型的判定往往是根據與抗體反應強度、H抗原強度、吸收放散能力等血清學試驗的反應格局[3]。應用血清學對ABO亞型進行分類時,正定型的凝集強度和“凝集的狀態”是很重要的信息[4]。

表1 血型正反定型反應結果

表2 患者H抗原反應結果

表3 患者放散液反應結果

此患者標本血清學檢測結果在室溫立即離心與抗-A反應很弱,此時考慮A抗原減弱或者亞型,經多次離心后出現了3+mf,見表1?;旌弦曇芭c弱凝集有時候很難區分,弱凝集僅是指肉眼看到的背景混濁,混合視野是專指在鏡下可以觀察到游離細胞,兩者缺一不可。A3亞型紅細胞最大特征為鏡下呈混合視野凝集(mixed field agglutination,mf),即A3紅細胞與抗-A和大多數抗-AB孵育后出現一些有數個紅細胞形成的小凝集塊,并被絕大部分游離的非凝集紅細胞包圍[5]???A1試劑是用于檢測A亞型的試劑,標本紅細胞與抗-A1反應呈陰性,抗-AB試劑與Ax、Bx抗原會產生較強反應,常用于鑒定Ax和Bx,標本紅細胞與抗-AB反應呈3+mf。表達弱A抗原的紅細胞在直接離心試驗中不被抗-A所凝集,必須通過吸收這種特異性抗體,再用放散的方法洗脫吸收的抗體,以此來證明弱A抗原的存在。吸收放散試驗極為敏感,對試驗技術的要求也較高,通常需要設置合適的對照,比較好的對照是用等量O型紅細胞與待檢細胞平行吸收放散,然后平行檢測放散液中的抗體[4]。見表3,患者放散液與Ac有凝集、與Oc無凝集,表明患者紅細胞有弱A抗原存在。H抗原的數量與個體的ABO血型相關,是A、B抗原的前身,大部分亞型H抗原會增強,AB亞型的H抗原是會減弱,而罕見孟買型、類孟買型無H抗原。根據能量守恒定律,H抗原最強,Oc作為純陽性對照,Bc為強陽性對照,若病人細胞抗H檢測反應強度在Oc、Bc之間,則亞型的可能性大,見表2,此患者抗-H結果為3+w。一般用唾液檢測ABO血型物質[6]。唾液中有A和H兩種血型物質。

對ABO亞型,尤其是Ax亞型因血清中常含抗-A1[7],血交叉時應先用鹽水介質試管法篩選,再用Polybene和微柱凝膠法進一步交叉驗證,以選擇配型相合的血液進行輸注為宜。A3亞型的產生原因與遺傳有關系[8],為了解該患者A3亞型的遺傳來源,可進一步做正反定型與抗-H物質檢測家系調查。ABO血型基因的運用可以很好地解決血型鑒定困難問題[9]。當這些疑難血型誤判時,將會使受血者發生嚴重的輸血性溶血反應,導致急性腎功能衰竭而危及患者生命[10]。因此ABO血型鑒定的準確性是非常重要的,只有準確鑒定血型才是保證安全輸血最關鍵的環節之一[11]。

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R457.1+1

A

1674-1129(2016)05-0699-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2016.05.059

2016-06-02;

2016-09-01)

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