2015年3次輸血相容性室間質(zhì)評疑難結(jié)果分析

徐榮華

（昆明市第一人民醫(yī)院輸血科，云南昆明650011）

2015年3次輸血相容性室間質(zhì)評疑難結(jié)果分析

徐榮華

（昆明市第一人民醫(yī)院輸血科，云南昆明650011）

目的采用多種檢測方法對2015年3、6、9月衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心發(fā)放的三次輸血相容性室間質(zhì)控品檢測，并進(jìn)行方法比較與分析判斷，提高實(shí)驗(yàn)室輸血前檢測質(zhì)量水平。方法依據(jù)衛(wèi)生部臨檢中心的要求，疑難質(zhì)控品檢測的多種方法進(jìn)行比較分析，運(yùn)用相關(guān)專業(yè)知識判斷正確結(jié)果、總結(jié)與討論。結(jié)果3次檢測中的疑難質(zhì)控品結(jié)果均與衛(wèi)生臨檢中心標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果一致。結(jié)論專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行輸血相容性室間質(zhì)評檢測時(shí)，須注重方法的有效性和可比性，及結(jié)果的分析，為臨床提供科學(xué)、安全、合理、有效的血液輸注。

輸血相容性檢測；疑難結(jié)果；檢測方法；室間質(zhì)量評價(jià)

室間質(zhì)量評價(jià)（下稱室間質(zhì)評）是多家實(shí)驗(yàn)室分析同一樣本，并由外部獨(dú)立機(jī)構(gòu)收集和反饋實(shí)驗(yàn)室上報(bào)結(jié)果評價(jià)實(shí)驗(yàn)室能力的過程［1］。根據(jù)質(zhì)評結(jié)果對各輸血科檢測實(shí)驗(yàn)室的檢測質(zhì)量、能力、存在的問題等進(jìn)行分析、評估。結(jié)果通過質(zhì)評活動基本上了解醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床輸血相容性檢測實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)狀。室間質(zhì)評活動的開展，確實(shí)能發(fā)現(xiàn)參評實(shí)驗(yàn)室存在的問題，有利于采取改進(jìn)措施，促進(jìn)實(shí)驗(yàn)室檢測質(zhì)量和能力的提高［2］。2008年至今，我科每年都參加衛(wèi)生部輸血相容性室間質(zhì)量評價(jià)，檢測結(jié)果均與衛(wèi)生部臨檢中心標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果完全一致?，F(xiàn)將我科2015年3次輸血相容性室間質(zhì)評疑難結(jié)果檢測方法，匯總分析，從而提高實(shí)驗(yàn)室檢測質(zhì)量，更好的為臨床提供科學(xué)、合理、安全、有效的血液輸注。

1 材料與方法

1.1 質(zhì)控品衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心統(tǒng)一發(fā)放，ABO正定型，每次5個(gè)樣本，共計(jì)15個(gè)；ABO反定型，每次5個(gè)樣本，共計(jì)15個(gè)；RhD血型，每次5個(gè)樣本，共計(jì)15個(gè)；抗體篩檢，每次5個(gè)樣本，共計(jì)15個(gè)；交叉配血，每次5個(gè)獻(xiàn)血員樣本+1個(gè)模擬患者樣本，共計(jì)15個(gè)獻(xiàn)血員樣本+3個(gè)模擬患者樣本。3次室間質(zhì)評質(zhì)控品，疑難質(zhì)控品編號為15125、15242、15342。

1.2 儀器37℃電熱恒溫水槽（上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司），SEROMATICⅡ低速離心機(jī)（KUBOT CORPORATION），Ortho-BioVue離心機(jī)（Ortho-Clinical Diagnostics），血型血清學(xué)用離心機(jī)（長春博研科學(xué)儀器有限公司），CENCE湘儀臺式低速離心機(jī)（湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司），免疫微柱孵育器（長春博研科學(xué)儀器有限公司），32型孵育器（Ortho-Clinical Diagnostics）。

1.3 試劑抗A抗B血型定型試劑（單克隆抗體）（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司，批號20140613，20141123），ABO、RhD血型檢測卡（單克隆抗體）（長春博訊生物技術(shù)有限責(zé)任公司，批號20150107，20150213，20150505），ABO/Rh正反定型血型定型試劑卡（強(qiáng)生醫(yī)療器材有限公司，批號ABR073A，ABR094A，ABR106A），RhD（IgG+ IgM）血型定型試劑（美國，批號BMA1402D，BMA1402B），ABO血型反定型試劑盒（人血紅細(xì)胞）（長春博訊生物技術(shù)有限責(zé)任公司，批號20150319，20150406，20150710），凝聚胺介質(zhì)試劑（Baso珠海貝索生物技術(shù)有限公司，批號114101，115032），不規(guī)則抗體檢測試劑（人血紅細(xì)胞）（長春博訊生物技術(shù)有限責(zé)任公司，批號20150101，20150501，20150801），抗人球蛋白檢測卡（長春博訊生物技術(shù)有限責(zé)任公司，批號20141004，20150302，20150403），抗體篩檢卡（強(qiáng)生醫(yī)療器材有限公司，批號IGC605A）。

1.4 方法按照輸血操作規(guī)程進(jìn)行檢測［3］，手工操作。ABO正定型、ABO反定型、RhD血型，均用鹽水試管法、微柱血型卡法；抗體篩檢、交叉配血，均用鹽水試管法、凝聚胺法、微柱抗人球卡法。

2 結(jié)果

2.1 第一次室間質(zhì)評關(guān)于ABO反定型15125樣本是一個(gè)A型、含有IgG類抗體的樣本。鹽水試管法檢測不會受到IgG類抗體的干擾［4］，加做凝聚胺法出現(xiàn)凝集。選擇微柱血型卡法會發(fā)現(xiàn)反定試劑的A細(xì)胞與B細(xì)胞在凝集強(qiáng)度上存在一定的差異，加做O細(xì)胞同樣會出現(xiàn)凝集，提示反定型有干擾。而ABO血型抗體屬IgM抗體，以此判斷15125為A型。見表1。

表1 15125反定型試驗(yàn)

2.2 第二次室間質(zhì)評15241號和15242號為抗篩陽性樣本，其余15243號、15244號15245號為陰性樣本。15241號抗體為Rh血型系統(tǒng)IgG類的抗D，為較常見、易檢出的抗體。15242號抗體為MNS血型系統(tǒng)IgM類的抗S?？筍屬于可以造成溶血性輸血反應(yīng)的抗體［5，6］?？购Y細(xì)胞若含有S抗原，微柱卡法、凝聚胺法等應(yīng)均可檢出，而鹽水試管法則不易檢出。見表2。

表2 15242抗體篩檢試驗(yàn)

2.3 第三次室間質(zhì)評抗體篩檢項(xiàng)目檢測15342號和15343號為抗篩陽性樣本，其余15341號、15344號15345號為陰性樣本。抗體篩檢15342抗體為Kidd血型系統(tǒng)抗Jka抗體［7，8］，由于Jka抗體先結(jié)合補(bǔ)體，它們所引起的凝集經(jīng)常很弱，檢測結(jié)果見表3。

3 討論

室間質(zhì)評是利用實(shí)驗(yàn)室間的比對來確定實(shí)驗(yàn)室能力的活動，實(shí)際上它是指為確保實(shí)驗(yàn)室維持較高的檢測水平而對其能力進(jìn)行考核、監(jiān)督和確認(rèn)的一種驗(yàn)證活動［9］，為維持輸血科較高的檢測水平。

表3 15342抗體篩檢試驗(yàn)

因此我們在進(jìn)行輸血相容性室間質(zhì)評檢測時(shí)應(yīng)該注意：首先，檢測試劑一般都有局限性，因此應(yīng)仔細(xì)閱讀檢測說明書，并嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行檢測。要關(guān)注試劑說明書的版本號。

其次，根據(jù)檢測項(xiàng)目選用適宜的檢測方法。ABO正定型，選用凝聚胺法、酶法是不正確的，應(yīng)使用鹽水試管法、微柱血型卡或?qū)ｉT用于ABO血型的微板法。ABO反定型，選用玻片法、凝聚胺法、酶法都是不正確的，應(yīng)選擇鹽水試管法、微柱血型卡或?qū)ｉT用于ABO血型［10］的微板法。RhD血型，檢測方法的選擇與所用試劑類型有關(guān)。如：應(yīng)用是IgM類的抗D試劑則應(yīng)選用鹽水試管法等；若應(yīng)用IgG類的抗D試劑則應(yīng)選用凝聚胺法、試管抗人球法等。如果選擇微柱卡法時(shí)應(yīng)使用血型卡進(jìn)行檢測?？贵w篩檢，選用玻片法、單純應(yīng)用鹽水試管法是不正確的，應(yīng)選擇凝聚胺法、微柱抗人球卡、試管抗人球法等。交叉配血，選用玻片法、單純應(yīng)用鹽水試管法是不正確的，應(yīng)選擇凝聚胺法、微柱抗人球卡、試管抗人球法等。

第一次室間質(zhì)評，15125號樣本若選用鹽水試管法檢測則不會受到IgG類抗體的干擾。因此提示在反定型檢測懷疑微柱血型卡法不能確定時(shí)，可選擇鹽水試管法來重新復(fù)檢可以排除IgG類抗體的干擾。針對微柱血型卡式方法的逐漸興起，我們大部分輸血實(shí)驗(yàn)室慢慢缺失了試管法的使用與建立，我們?nèi)匀恍枰⑴c完善必要經(jīng)典的檢測方法。

第二次室間質(zhì)評，抗體篩檢15242號樣本為MNS血型系統(tǒng)IgM類的抗S［11］，部分生產(chǎn)廠家缺失S抗原的表達(dá)或即使有S抗原的表達(dá)但因其為雜合細(xì)胞表達(dá)欠規(guī)范，容易導(dǎo)致抗體的漏檢。微柱抗人球卡法、凝聚胺法等應(yīng)均可檢出，而鹽水試管法則不易檢出。檢測方法與試劑的配套使用主要體現(xiàn)在試劑與使用微柱卡法不配套，隨意搭配試劑、配制稀釋試劑欠規(guī)范導(dǎo)致不能檢出稀有的或效價(jià)較低的抗體。因此試劑配套使用時(shí)應(yīng)進(jìn)行相關(guān)驗(yàn)證，不能使用自配試劑，選擇批間變化較小的試劑。

第三次室間質(zhì)評，Kidd抗體通常為IgG或IgG和IgM的混合物，但幾乎沒有純IgM型［12］。許多抗-Jka與Jk（a+b-）細(xì)胞的反應(yīng)比與Jk（a+b+）細(xì)胞反應(yīng)強(qiáng)，同時(shí)一些抗-Jka只能與Jk（a+b-）細(xì)胞反應(yīng)［13，14］。若需要檢測出抗-Jka宜選擇含有Jk（a+b-）抗原的譜細(xì)胞。應(yīng)用的譜細(xì)胞應(yīng)具備與有臨床意義抗體相匹配的抗原表達(dá)，檢測方法應(yīng)配套使用，不能使用非國家認(rèn)證的試劑和自制的譜細(xì)胞，否則會有漏檢抗體的風(fēng)險(xiǎn)。

綜上所述，衛(wèi)生部臨檢中心發(fā)放的質(zhì)控品，檢測難度系數(shù)逐年提高。我們實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員只有積極加強(qiáng)自身學(xué)習(xí)，不斷學(xué)習(xí)輸血各項(xiàng)試驗(yàn)檢測新方法，不但能在同一試驗(yàn)中運(yùn)用多種方法進(jìn)行準(zhǔn)確操作，而且對檢測項(xiàng)目的各種方法的原理、檢測儀器及試劑項(xiàng)目校準(zhǔn)、操作步驟、結(jié)果判斷、干擾因素及注意事項(xiàng)、臨床意義都熟練掌握，才能對室間質(zhì)評疑難結(jié)果做出準(zhǔn)確判斷［15］。以此證明該實(shí)驗(yàn)室的檢測能力，從而為臨床提供科學(xué)、合理、安全、有效的血液輸注！

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R457.1+3

A

1674-1129（2016）05-0686-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2016.05.053

2016-05-10；

2016-07-08）