沙棘粉對高脂膳食大鼠血脂影響及肝臟保護作用

徐　斌，宋春梅，杜　鵑，葛紅娟

（吉林醫(yī)藥學院公共衛(wèi)生學院，吉林 吉林 132013）

沙棘粉對高脂膳食大鼠血脂影響及肝臟保護作用

徐斌，宋春梅，杜鵑，葛紅娟

（吉林醫(yī)藥學院公共衛(wèi)生學院，吉林 吉林 132013）

為了研究沙棘粉對高脂膳食大鼠血脂水平的影響及對肝臟的保護作用，將50只雄性Wistar大鼠隨機分為空白對照組、高脂模型組、沙棘粉低、中、高劑量組，每組10只。各實驗組分別給予高脂飼料和不同劑量的沙棘粉勻漿液，于灌胃第28天腹主動脈取血，分別測定血脂水平，總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白-膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白-膽固醇HDL-C）、氧化應激水平超氧化物歧化酶（SOD），丙二醛（MDA），谷胱甘肽（GSH）和肝損傷指標（AST、ALT）。結(jié)果是與高脂模型組相比，沙棘粉各劑量組血清中TC、TG、LDL-C濃度下降，而HDL-C濃度升高。中、高劑量組T-SOD活力升高，MDA含量、AST和ALT活力明顯降低，高劑量組GSH含量升高。表明沙棘粉具有調(diào)節(jié)血脂，減輕肝臟氧化損傷，預防血脂代謝紊亂的作用。

沙棘粉；高脂膳食；血脂；肝臟

沙棘（Hippophae rhamnoids L）是一種含有多種生物活性物質(zhì)的藥用植物，屬我國衛(wèi)生部頒布的藥食兩用食物，為我國古代藏醫(yī)、蒙醫(yī)的傳統(tǒng)藥材。沙棘果實中含有蛋白質(zhì)、氨基酸、有機酸、黃酮、甾體類、、萜類、揮發(fā)油、維生素、礦物質(zhì)等多種營養(yǎng)素和生物活性物質(zhì)，具有抗癌、增強免疫力、抗炎、抗菌、調(diào)節(jié)血脂、預防血栓形成等多種功效［1-4］。本試驗通過建立大鼠高脂膳食模型，研究沙棘干粉勻漿液對大鼠血脂代謝及肝臟氧化損傷的保護作用，擬為沙棘天然保健品的開發(fā)提供一定的理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1主要儀器EA-500A高速中藥粉碎機，長沙岳麓中南藥機械廠；Selectra XL全自動血生化分析儀，荷蘭威圖科學公司；C0036-HK低溫冷凍離心機，德國赫曼；722型可見分光光度計，上海欣茂公司；DY89—Ⅱ電動玻璃勻漿機，寧波新芝生物科技公司；YP601N電子天平，上海精密儀器儀表有限公司。

1.2試劑總膽固醇（醫(yī)藥級）：北京鼎國昌盛生物技術有限責任公司；蛋黃粉：吉林市金翼蛋品公司；豬油：吉林市歐亞超市；甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白-膽固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白-膽固醇（HDL-C）試劑盒，山東3V生物集團公司；超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）和天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）試劑盒，南京建成生物工程研究所。

1.3試驗材料沙棘粉制備：沙棘果干，購自青海康普生物科技公司。蒸餾水清洗，除雜，60℃恒溫干燥，高速中藥粉碎機粉碎，過40目篩，用蒸餾水分別制成濃度為5%、25%和50%的沙棘粉勻漿液備用。

基礎飼料：面粉25%、大豆粉30%、玉米粉35%、麩皮10%，另添加多種維生素和礦物質(zhì)組成。

高脂飼料：79%基礎飼料、10%蛋黃粉、10%豬油和1%膽固醇組成。

1.4實驗動物及分組雄性Wistar大鼠50只，體重200±20 g，由吉林大學白求恩醫(yī)學部實驗動物中心提供，實驗動物許可證號：SCXK-（吉）2011-0002。將大鼠隨機分為5組，每組10只。分別為：空白對照組（N），高脂模型組（P），沙棘粉低劑量組（L）、沙棘粉中劑量組（M）和沙棘粉高劑量組（H）。試驗開始后空白對照組給予基礎飼料，高脂模型組和沙棘各劑量組給予高脂飼料喂養(yǎng)。空白對照組和高脂模型組每天灌胃2 mL的生理鹽水，沙棘粉低、中和高劑量組分別灌胃0.5 mg/g體重、2.5 mg/g體重、5 mg/g體重的沙棘粉勻漿液，連續(xù)28 d。試驗期間每隔3 d稱1次犬鼠體重，以便及時調(diào)整灌胃劑量。

1.5方法試驗進行28 d后，大鼠禁食不禁水，次日將大鼠用3%戊巴比妥鈉按30 mg/kg體重，腹腔注射麻醉，腹主動脈取血，3 000 r/min離心15 min，分離血清。采用全自動生化分析儀測定TC、TG、LDL-C和HDL的濃度，采用試劑盒法測定血清SOD、MDA、GSH、AST和ALT的活性及含量，測定方法嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.6數(shù)據(jù)處理試驗結(jié)果采用Excel和SPSS16.5統(tǒng)計軟件進行處理，單因素方差分析，組間比較采用SNK檢驗，試驗數(shù)據(jù)以表示，以P＜0.05有統(tǒng)計學意義。

2　結(jié)果

2.1沙棘粉對高脂膳食大鼠血脂的影響由表1可見，與空白對照組比較，高脂模型組血清中TC、TG、LDL-C濃度顯著升高（P＜0.05）；HDL-C濃度顯著降低（P＜0.05），說明大鼠高脂血癥模型造模成功。與高脂模型組比較，沙棘粉各劑量組血清中TC、TG、LDL-C濃度隨著沙棘劑量的增加而逐漸降低，HDL-C濃度隨著沙棘劑量的增加逐漸升高。其中沙棘粉高劑量組TC、LDL-C濃度較高脂模型組顯著降低，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；沙棘粉中、高劑量組TG濃度較高脂模型組顯著降低，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05或P＜0.01）；沙棘粉中、高劑量組HDL-C濃度較高脂模型組明顯升高，差異具有顯著性（P＜0.05或P＜0.01）。說明一定劑量的沙棘粉能夠調(diào)節(jié)高脂膳食大鼠出現(xiàn)的血脂代謝異常。

表1　沙棘粉對高脂膳食大鼠血脂的影響 （n=10，）

表1　沙棘粉對高脂膳食大鼠血脂的影響 （n=10，）

#：與空白對照組比較，P＜0.05；△：與高脂模型組比較，P＜0.05；△△：與高脂模型組比較，P＜0.01，下表同

組別　TC（mmol/L）TG（mmol/L）LDL-C（mmol/L）HDL-C（mmol/L）空白對照組　2.07±0.23　0.79±0.40　2.39±0.28　1.27±0.13高脂模型組　3.26±0.66#　1.13±0.15#　3.20±0.39#　0.86±0.13#低劑量組　3.08±0.37#　1.04±0.08#　3.12±0.12#　1.02±0.15#△中劑量組　2.97±0.43#　0.97±0.21#△　3.05±0.10#　1.06±0.16#△高劑量組　2.57±0.17#△　0.87±0.07#△△　2.89±0.17#△　1.09±0.08#△△

2.2沙棘粉對高脂膳食大鼠血清中SOD活性、MDA和GSH含量的影響由表2數(shù)據(jù)可知，與空白對照組比較，高脂模型組血清中T-SOD活力和GSH含量明顯降低（P＜0.05），而MDA含量明顯升高（P＜0.05），說明高脂膳食可導致大鼠體內(nèi)脂質(zhì)過氧化加速，加重細胞氧化損傷。與高脂模型組比較，沙棘粉中、高劑量組T-SOD活力明顯升高，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；沙棘粉中、高劑量組血清MDA含量明顯降低，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；沙棘粉高劑量組血清GSH含量明顯升高，差異具有顯著性（P＜0.05）。

表2　沙棘粉對高脂膳食大鼠血清中SOD活性、MDA和GSH含量的影響　（n=10，）

表2　沙棘粉對高脂膳食大鼠血清中SOD活性、MDA和GSH含量的影響　（n=10，）

#：與空白對照組比較，P＜0.05；△：與高脂模型組比較，P＜0.05

組別　T-SOD（U/mgprot）　MDA（nmol/mgprot）　GSH（mgGSH/gprot）空白對照組　328.97±21.03　2.76±0.52　2.39±0.19高脂模型組　296.43±12.40#　3.58±0.39#　2.19±0.15#低劑量組　302.06±11.31#　3.19±0.40#　2.20±0.12#中劑量組　312.72±9.99#△　3.11±0.37△　2.22±0.14#高劑量組　315.76±23.72△　3.08±0.38△　2.40±0.25△

2.3沙棘粉對高脂膳食大鼠血清中AST和ALT活性的影響由表3數(shù)據(jù)可知，高脂模型組與空白對照組比較，血清AST和ALT活力有所升高，但差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；沙棘粉高劑量組血清AST和ALT活力與空白對照組比較明顯降低，具有顯著性差異（P＜0.05）；沙棘粉中、高劑量組血清AST和ALT活力與高脂模型組比較，明顯降低，具有顯著性差異（P＜0.05或P＜0.01）。

表3　沙棘粉對高脂膳食大鼠血清中AST和ALT活性的影響　　（n=10，）

表3　沙棘粉對高脂膳食大鼠血清中AST和ALT活性的影響　　（n=10，）

組別　AST（U/L）　ALT（U/L）空白對照組　34.472±7.080　5.244±0.488高脂模型組　38.428±7.951　6.528±0.733低劑量組　32.916±7.122　6.094±0.499中劑量組　31.460±7.980△　5.288±0.690△高劑量組　25.930±4.318#△△　3.864±0.765#△△

3　討論

總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白-膽固醇（LDL-C）及高密度脂蛋白-膽固醇（HDL-C）是臨床血脂檢測的最常見指標，其中TC指血液中脂蛋白所含有的膽固醇之和，它可損傷血管內(nèi)皮細胞，與動脈硬化的形成和發(fā)展關系密切；TG反應體內(nèi)甘油三酯的代謝情況，其濃度的高低與冠心病及某些代謝性疾病發(fā)病相關聯(lián)；LDL-C與膽固醇和甘油三酯在體內(nèi)的運輸有關，而HDL-C則可將血液中過量的膽固醇運輸回肝臟，并通過膽汁排泄，因此，LDLC，HDL-C水平是冠心病發(fā)生的危險因子［5-8］。本研究結(jié)果顯示，沙棘粉具有明顯的降低高脂膳食大鼠血脂水平的作用，與高脂模型組相比，沙棘粉各劑量組血清中TC、TG、LDL-C濃度下降，而HDL-C濃度升高。這與焦巖［7］等的研究結(jié)果一致，進一步驗證了沙棘對血脂的調(diào)節(jié)作用。現(xiàn)階段，隨著人民生活水平的提高，高脂血癥及脂肪肝的發(fā)病率明顯升高，而大量流行病學研究表明，高脂膳食和高脂血癥是脂肪肝發(fā)病的主要因素之一。當機體血脂升高時，血清中游離脂肪酸明顯增多，肝細胞內(nèi)甘油三酯（TG）合成增加，腫瘤壞死因子（TNF-α）表達增加，通過加速外周脂肪動員，增強了TNF-α等多個細胞因子的毒性作用，進而引起肝細胞內(nèi)線粒體功能損害，導致肝臟組織內(nèi)脂質(zhì)過氧化反應加強，氧自由基等過氧化產(chǎn)物生成增多，破壞了機體抗氧化防御系統(tǒng)的平衡，引發(fā)肝臟細胞凋亡、壞死、肝細胞脂肪變性和脂肪肝的發(fā)生［7-10］。

近年來，隨著藥理學、營養(yǎng)學和食品科學的發(fā)展，人們越來越多的認識到天然食物中的植物化學成分在預防和治療高脂血癥及保護肝臟方面發(fā)揮著重要作用。SOD是機體內(nèi)酶抗氧化系統(tǒng)的重要組成部分，可通過歧化反應清除體內(nèi)的氧自由基，阻斷脂質(zhì)過氧化反應進行。MDA是生物膜脂質(zhì)過氧化最重要的分解產(chǎn)物之一，它的產(chǎn)生可加劇生物膜損傷，其含量反映了脂質(zhì)過氧化程度及細胞受自由基攻擊的程度［8-11］。AST和ALT是轉(zhuǎn)氨酶中重要的兩種，是臨床上肝功能檢查的主要指標，在血清中濃度較低，當肝細胞破裂或肝功能受損時，AST和ALT活力明顯升高。本試驗中，高脂模型組血清中T-SOD活力和GSH含量明顯降低（P＜0.05），而MDA含量明顯升高（P＜0.05），血清AST和ALT活力也有上升趨勢，說明高脂膳食可導致大鼠體內(nèi)脂質(zhì)過氧化加速，加重肝細胞氧化損傷。與高脂模型組比較，沙棘粉中、高劑量組T-SOD活力升高，MDA含量、AST和ALT活力明顯降低，高劑量組GSH含量升高，這與本課題此前的研究“沙棘果對高脂膳食大鼠肝臟保護作用”結(jié)果一致，提示沙棘可有效清除實驗動物體內(nèi)氧自由基，改善脂質(zhì)代謝水平，抑制肝細胞脂質(zhì)過氧化，減輕肝細胞受損程度。這可能與沙棘中含有的大量生物活性物質(zhì)及營養(yǎng)成分如黃酮類化合物、有機酸、甾體類、脂肪酸、萜類、揮發(fā)油、維生素、礦物質(zhì)等有直接關系，其機制有待進一步探討。

［1］閆濤，羅麗梅，謝竹田，等.沙棘的化學成分及生物功能的研究進展［J］.吉林醫(yī)藥學院學報，2009，31（1）：52-54.

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［3］曹少謙，徐曉云，潘思軼.沙棘籽原花青素對小鼠免疫功能調(diào)節(jié)作用的影響［J］.食品科學，2005，26（6）：229-232.

［4］楊現(xiàn)艷，瞿偉菁，徐自良，等.沙棘籽渣黃酮對更年期大鼠血脂及體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)的影響［J］.中國中藥雜志，2006，31（13）：1109-1112.

［5］馬立麗，梁惠陶.植物甾醇對高脂膳食喂養(yǎng)大鼠血脂及肝臟脂質(zhì)的影響［J］.現(xiàn)代預防醫(yī)學，2014，41（15）：2727-2731.

［6］陳艷，毛麗梅，丁強，等.不同來源膳食蛋白質(zhì)對大鼠體重及其血脂的影響［J］.衛(wèi)生研究，2008，37（4）：454-456.

［7］黃曉旭，張榮超，張亞偉，等.馬齒莧對高脂膳食大鼠脂代謝的影響和肝臟保護作用的研究［J］.時珍國醫(yī)國藥，2012，23（5）：1166-1167.

［8］宋春梅，鐘秀紅，葛紅娟，等.葡萄籽粉對高脂飼料大鼠血脂代謝和肝臟保護作用研究［J］.衛(wèi)生研究，2013，42（6）：991-994.

［9］焦巖，王振宇.大果沙棘果渣黃酮降血脂與抗氧化作用［J］.營養(yǎng)學報，2009，31（5）：517-518.

［10］宋春梅，杜鵑，葛紅娟，等.沙棘果對高脂膳食大鼠肝臟保護作用研究［J］.食品研究與開發(fā)，2015，36（7）：26-28.

［11］馬立麗，蔣卓勤，李曉采，等.膳食蛋白質(zhì)對高脂血癥者血清脂質(zhì)的影響［J］.衛(wèi)生研究，2011，40（5）：601-603.

Research of Hippophaerhamnoides L on serum lipids and protectiveeffect of liver in high-fat diet rats

XU Bin，SONG Chun-mei，DU Juan，GE Hong-juan
（Jilin school of public health，Jilin 132013，China）

To study the effects of Hippophae rhamnoides L on serum lipids and its protective effect on liver in high-fat diet rats.Fifty male Wistar rats were randomly divided into five groups，including the control diet group，the high-fat model group，the low-dose Hippophae rhamnoids group，the middle-dose Hippophae rhamnoids group and the high-dose Hippophae rhamnoids group.The experimental rats were treated with high fat diet and different doses of Hippophae rhamnoides juice.After 28 day treatment，The concentrations of total cholesterol（TC），triglycerides（TG），low density lipoprotein cholesterol（LDL-C）and high density lipoprotein cholesterol（HDL-C）were measured by automatic biochemical analyzer，and SOD，MDA，GSH，AST and ALT were determined by UV Vis spectrophotometry.For each of the Hippophae rhamnoides dose group when compared with high-fat model group，the concentration of TG，TC and LDL-C in the serum of the Hippophae rhamnoides were decreased，and the concentration of HDL-C was increased.In the middle and high dose group，the activity of T-SOD was increased，the content of MDA，AST and ALT were significantly decreased，and the content of GSH in high dose groups was increased.Hippophae rhamnoids have a hypolipidemic effect，which can reduce the oxidative damage of liver and prevent the disturbance of lipid metabolism.

Hippophae rhamnoides L；High-fat diet；Serum lipids；Liver

SONG Chun-mei

R 151.3

A

0529-6005（2016）09-0111-03

2015-11-12

吉林省科技發(fā)展計劃項目（201105089）

徐斌（1972-），男，副教授，碩士，研究方向為慢性病的營養(yǎng)防治及公共衛(wèi)生研究，E-mail：xb-je@163.com

宋春梅，E-mail：scmjilin@163.com