犬骨髓干細胞對犬白細胞減少癥的治療效果觀察

汪登如，曹景鋒，謝麗君，閆曉霞，嚴玉霖

（1.昆明愛美森寵物醫院，云南 昆明 650224；2.公安部昆明警犬基地，云南 昆明 650201；3.云南農業大學動物科學技術學院，云南 昆明 650201）

犬骨髓干細胞對犬白細胞減少癥的治療效果觀察

汪登如1，曹景鋒2，謝麗君3，閆曉霞3，嚴玉霖3

（1.昆明愛美森寵物醫院，云南 昆明 650224；2.公安部昆明警犬基地，云南 昆明 650201；3.云南農業大學動物科學技術學院，云南 昆明 650201）

犬白細胞減少癥是犬臨床中常見的危害較大的疾病。白細胞可分為粒細胞、單核細胞和淋巴細胞，其中粒細胞分為嗜酸性、嗜堿性、嗜中性粒細胞，淋巴細胞分為T淋巴細胞和B淋巴細胞。白細胞的主要功能是承擔動物機體的免疫任務，白細胞減少（白細胞總數＜6×103μL）就可使機體免疫功能下降。引起犬白細胞減少癥的主要原因是病毒性感染（如犬細小病毒和犬瘟熱病毒）和藥物原因（如抗生素、抗病毒藥和解熱鎮痛藥等）［1］。犬發生白細胞減少癥時，臨床表現可見精神不振，全身無力，患病毒性腸炎時可見病犬流涎，體溫升高，食欲廢絕，惡心嘔吐，部分病例可見肺部或泌尿系統感染；發展為急性粒細胞缺乏時，死亡率可高達80%，常因迅速發生敗血癥或膿毒血癥而突然死亡［2］。

骨髓干細胞主要包括造血干細胞和間充質干細胞，其中造血干細胞和間充質干細胞，在體內外具有很強的增殖能力和多向分化潛能［3-4］。造血干細胞可以用于造血和免疫功能重建，已在臨床上用于血液腫瘤根治、實體瘤輔助治療以及遺傳性疾病、免疫異常癥、難治性感染等多種類型的疾病治療；間充質干細胞在適宜刺激下能在體內外分化為脂肪、軟骨、骨、肌腱、肝、腎、神經、皮膚、肌肉等十余種成熟細胞和組織［5］。目前骨髓干細胞在臨床疾病治療中的應用顯示出巨大的科學意義和實用價值。雖然骨髓干細胞在人類再生醫學的研究和應有中發揮著巨大的作用，但在犬類疾病的治療中尚無相關報道，本文就犬骨髓干細胞對犬白細胞減少癥的臨床治療效果進行探討，為犬骨髓干細胞的臨床應用提供理論依據和技術支撐。

1　材料與方法

1.1犬骨髓干細胞由北京京蒙科寵生物科技有限公司提供，商品名為普優特。

1.2臨床病例的選擇選擇2014年10月至2015年12月來昆明愛美森寵物醫院就診的患犬，由犬細小病毒感染繼發白細胞減少或缺乏病例10例，其中3例發展至白細胞無法檢出；由藥物原因引起的白細胞減少癥5例。

1.3干細胞治療方法治療劑量：中小型犬用量每次106～107個，大型犬每次用量為108～109個。治療方法：對于犬細小病毒感染的病例按常規的抗病毒和補液進行治療后，將犬骨髓干細胞用注射用生理鹽水稀釋，通過靜脈移植（注射）于患犬體內，每天1次，連續3次；由藥物原因引起的白細胞減少癥時立即停止使用藥物，注射用生理鹽水稀釋，靜脈注射，每天1次，連續兩次。

1.4臨床治療效果觀察觀察治療后的精神狀態、體溫、食欲，臨床癥狀和血象指標。

2　結果

2.1干細胞治療由細小病毒導致白細胞減少癥的病例犬細小病毒感染病例：就診時患犬精神沉郁，鼻鏡干燥，口腔黏膜蒼白，心律不齊，腸音消失，腹部觸診疼痛性呻吟，反復嘔吐，排血便，個別患犬體溫升高至39.6℃～40.5℃，用膠體金試紙條檢測細小病毒抗原陽性。病例按常規的抗病毒和補液進行治療的同時，靜脈移植犬骨髓干細胞，治療當天患犬精神有所好轉，第2天白細胞數量上升，第3天恢復至正常，結合犬細小病毒感染的常規治療，迅速治愈，療程短，效果好，且無任何不良反應。典型病例如表1所示。

2.2犬骨髓干細胞對犬白細胞減少癥的治愈率

用犬骨髓干細胞治療犬細小病毒感染繼發白細胞減少或缺乏病例10例，其中3例發展至白細胞無法檢出，1例死亡（患病5 d后入院），故應用犬骨髓干細胞治療由犬細小病毒引起的白細胞減少或缺乏癥的治愈率為90%；全部治愈由藥物原因引起的白細胞減少癥5例，治愈率為100%。對治愈出院后的患犬進行跟蹤隨訪，14只治愈犬均存活，沒有復發病現象，健康狀態良好。

表1　犬骨髓干細胞治療犬細小病毒病時的血象變化

3　討論

干細胞治療技術作為一種新型的疾病治療手段，克服了臨床常規治療的局限性，為人類和動物疾病的治療打開了全新的思路，以成體干細胞移植為代表的細胞療法在生長發育、免疫治療、組織修復、基因治療、造血支持療法等領域中得到越來越廣泛的應用，在醫學領域發揮著重要的作用。成體干細胞在生理狀態下完成組織的更新，在病理狀態下實現對組織的修復，后一過程包括動員、歸巢、分化3個環節。其可能的作用機制如下［6］：（1）自分化作用：干細胞作為新興的種子細胞是一種具有多向分化潛能的細胞。受損器官或成年個體組織損傷的機體，能發出特異的信號，將干細胞招募到受損部位并發揮修復功能；（2）旁分泌作用：干細胞能夠分泌大量細胞因子，以間充質干細胞為例，其分泌因子在功能上主要可分為免疫調節、抗細胞凋亡、血管發生、支持干/祖細胞的增殖與分化、化學趨化、抗瘢痕六大類。它們通過自分化或旁分泌的方式，改善機體局部微環境，促進內源性干細胞向傷口部位的遷移和分化，挽救瀕臨凋亡的細胞，從而達到修復組織和治療疾病的目的［7］。

犬細小病毒（CPV）是1977年美國Eugster從患出血性腸炎病犬糞便中新發現的一種小DNA病毒，可使犬發生嚴重的出血性腸炎綜合征或/和心肌炎，發病率為50%～100%，死亡率10%～50%，是對養犬業危害極大的疫病之一［8］。目前臨床中主要以抗病毒治療輔助補液治療為主，如不及時就診，表現為白細胞減少，貧血，呼吸困難，脫水，最終導致急性衰竭而死亡。我們對患犬進行常規治療的同時，利用體外分離培養的骨髓干細胞進行靜脈移植，取得了令人滿意的治愈率。從血象指標的快速恢復和臨床癥狀的減輕進行評估，本文中應用犬骨髓干細胞治療犬細小病毒感染導致白細胞減少或缺乏癥的治愈率為90%，治療由藥物原因引起的白細胞減少癥的治愈率為100%，治愈時間短，能夠快速提高患犬的生活質量。結果表明，骨髓干細胞有很強的可塑性，可通過靜脈注射進入血液循環，隨血液循環分布全身各組織。在體內的血液中造血微環境的調控網絡作用下，骨髓干細胞分化成白細胞，紅細胞，淋巴細胞和單核細胞，恢復血象，增強機體的免疫功能。另外損傷的組織可釋放干細胞趨化因子，隨血液循環到組織中的骨髓干細胞被招募到受損組織，在特定微環境中誘導分化為功能細胞和參與腸道黏膜組織、心肌組織和肝臟組織等損傷組織的修復，從而達到治愈的目的。

在歐美等發達國家的寵物醫院，犬干細胞在老年犬的保健和疾病治療等方面已經得到較為廣泛地應用。本文利用犬骨髓干細胞成功治愈犬白細胞減少癥在國內尚屬首次，安全有效可行，為國內開展犬干細胞在犬類疾病治療的研究與應用奠定了堅實的理論基礎，提供了可靠的技術支撐，具有重要的科學意義和巨大臨床應用價值。相信在不遠的將來，犬干細胞的基礎研究和臨床應用將對犬病保健和治療領域帶來巨大的變革，犬類的健康將會得到極大的促進和提高。

志謝：感謝美國堪薩斯州立大學獸醫學院提供技術支持與熱心幫助。

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［4］Ratajczak M Z，Jadczyk T，P?dziwiatr D，et al.New advances in stem cell research：practical implications for regenerative medicine［J］.Pol Arch Med Wewn，2014，124（7-8）：417-426.

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S858.292

B

0529-6005（2016）09-0077-02

2015-06-18

汪登如（1975-），男，獸醫師，碩士，從事小動物疾病臨床工作，E-mail：19772002@qq.com

嚴玉霖，E-mail：yanyulin333@163.com