丁孟建,楊曉偉,黃坤英,謝正鵬,王自強,李隆耀
(1.西南大學榮昌校區動物醫學系,重慶 榮昌 402460;2.重慶市榮昌縣河包鎮人民政府,重慶 榮昌 402460)
四川廣安某豬場香豬疾病的診斷
丁孟建1,楊曉偉1,黃坤英2,謝正鵬1,王自強1,李隆耀1
(1.西南大學榮昌校區動物醫學系,重慶 榮昌 402460;2.重慶市榮昌縣河包鎮人民政府,重慶 榮昌 402460)
2014年7月和2014年11月,廣安某香豬養殖場飼養的香豬兩次發病。第1次為種母香豬發病,表現精神沉郁,呼吸急促,鼻孔流出大量泡沫樣分泌物,皮膚發紺,體溫40℃~42℃之間,母豬懷孕后期流產,近1個月內死亡23頭種母豬,流產8胎。使用頭孢噻呋、林可霉素、大觀霉素、磺胺間甲氧嘧啶、雙黃連注射液等治療無效;第2次為仔豬發病,表現嘔吐、水樣腹瀉、糞便呈黃白色,扎堆,嚴重者食欲廢絕,大多在3~5 d內消瘦、脫水死亡,使用氧氟沙星、乙酰甲喹、氟苯尼考、維生素B12、肌苷、ATP等藥物治療無效,近40 d內共死亡3~30日齡仔豬65頭。現對該病診斷報告如下。
1.1診斷材料檢測試劑:RNA/DNA提取試劑盒、反轉錄試劑盒、2×MasterMix為上海生工生物工程技術服務有限公司產品。

圖3 分子診斷結果
實驗儀器:Mastercycler PCR儀,購自Eppendorf公司;凝膠分析成像系統,購自上海天呈科技有限公司。
引物:豬圓環病毒病、豬瘟、高致病性藍耳病、流行性腹瀉、偽狂犬病病毒特異性引物由西南大學榮昌校區動物醫學系傳染病教研室惠贈。
1.2診斷方法
1.2.1臨床檢查采用視診、問診、聽診等檢測方法對發病的香豬進行診斷,主要檢查精神、皮膚、糞便、可視黏膜、呼吸音、體溫、采食量等。
1.2.2剖檢及病料采集對病死豬進行剖檢,主要觀察心、肝、脾、腎、肺、氣管、支氣管及消化系統。無菌操作,采集病死豬脾臟、腸系膜淋巴結、肺臟、大腦和腹股溝淋巴組織,4℃保存備檢。
1.2.3實驗室檢驗按試劑盒說明書分別提取脾臟、腸系膜淋巴結、肺臟、大腦組織總RNA和腹股溝淋巴結總DVA,RNA反轉錄為cDNA。依次應用豬瘟、流行性腹瀉、高致病性藍耳病、偽狂犬病、圓環病毒特異性引物分別進行PCR擴增,目的片段大小為豬瘟343 bp、流行性腹瀉462 bp、高致病性藍耳病317 bp、偽狂犬病271 bp、圓環病毒病483 bp。反應體系:模板cDNA/DNA 1 μL、PCR Forward Primer 0.5 μL、PCR Reverse Primer 0.5 μL、2×Master Mix 12.5 μL、ddH2O up to 25 μL;反應條件:94℃預變性5 min或3 min、94℃變性30 s或1 min、55℃退火30 s或1 min、72℃延伸30 s或1 min、35個循環,最后72℃延伸10 min。PCR產物經12 g/L瓊脂糖凝膠電泳后于凝膠分析成像系統中觀察結果。

圖4 分子診斷結果
2.12014年7月送檢的病/死母豬臨床癥狀、剖檢及實驗室檢驗結果送檢的病死母豬腹部、四肢皮膚發紺,鼻腔流出大量泡沫樣分泌物(見中插彩版圖1),對送檢的3頭病死母豬進行剖檢,可見腎皮質和髓質針尖狀出血(見中插彩版圖1),心肌出血,扁桃體形成假膜、壞死(見中插彩版圖1),肋骨弓內側出血,膀胱黏膜層針尖狀出血(見中插彩版圖2),腸道漿膜層、黏膜層出血,腹股溝淋巴結腫大、出血。分子診斷豬瘟、圓環病毒病、高致病性藍耳病陽性,偽狂犬病陰性(圖3)。
2.22014年11月送檢的仔豬剖檢及實驗室檢驗結果對送檢的病死仔豬剖檢,可見腸管充氣、內有大量水樣糞便,膽囊腫大。分子診斷豬瘟、偽狂犬病、高致病性藍耳病陰性,流行性腹瀉陽性(圖4)。
香豬作為一種特種經濟動物,具有肉味香、體型小、易早熟、乳豬無腥味、抗逆性強、耐粗飼、易于管理、近交繁殖不退化等特點而被作為高檔肉質品類動物飼養,養殖戶發家致富的途徑之一,在貴州、廣西、云南、四川、西藏、甘肅等地區養殖較多,常見品種主要有巴馬香豬、藏香豬、環江香豬等,養殖戶為擴大養殖量也由以往的放養、散養轉為規模養殖,養殖密度大、飼養管理跟不上、疾病預防工作不到位造成死亡率上升。該養殖場就是未重視飼養管理和疫苗免疫預防工作(僅接種口蹄疫疫苗),導致母豬豬瘟、圓環病毒病、高致病性藍耳病混合感染,仔豬流行性腹瀉疾病的發生,帶來較大損失。鑒于此,筆者建議香豬養殖應循序漸進,量力而行,做到適度規模養殖,可持續發展。對該養殖場,要特別重視疾病預防、控制工作,做好豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、圓環病毒病、流行性腹瀉、口蹄疫、偽狂犬病、乙腦等疾病疫苗免疫接種工作。
S855.1+12
B
0529-6005(2016)09-0045-01
2015-06-21
西南大學榮昌校區2015年教改項目
丁孟建(1982-),男,實驗師,碩士,從事預防獸醫學研究,E-mail:dinmaojian@163.com