對映-貝殼杉烷二萜化合物KamebacetalA誘導人肝癌細胞Hep-G2凋亡的熒光檢測

徐德萍　李國鐸　梁勤

對映-貝殼杉烷二萜化合物KamebacetalA誘導人肝癌細胞Hep-G2凋亡的熒光檢測

徐德萍李國鐸梁勤

目的：驗證香茶菜中天然二萜化合物具有誘導細胞凋亡及抑制腫瘤生長的作用。方法：選用二萜化合物Kamebaceta?lA對Hep-G2細胞進行誘導，Hoechst33258熒光染色，觀察細胞凋亡情況。結果：低濃度藥物處理細胞72h，即出現早期凋亡形態特征，中濃度藥物處理24h，即出現典型的凋亡小體。高濃度藥物處理細胞72h，細胞已完全崩解成碎片。結論：二萜化合物Kamebac?etalA具有誘導腫瘤細胞凋亡的作用，且凋亡細胞的形態學特征隨藥物濃度的升高和處理時間的延長而愈加明顯。

對映-貝殼杉烷二萜化合物；KamebacetalA；細胞凋亡；Hep-G2

從香茶菜屬植物中提取的二萜化合物中多數具有顯效的抗癌作用，對映-貝殼杉烷類二萜化合物是香茶菜屬植物的主要次生代謝物，含量極為豐富，當地民間用其治療肺膿瘡，療效顯著，天然植物二萜化合物的細胞毒活性主要表現在引起腫瘤細胞凋亡［1-3］。本文采用形態學觀察法檢測植物二萜化合物的細胞毒活性，用幾種香茶菜中攝取的二萜化合物處理癌細胞后，利用熒光染料Hoechst 33258染色后用熒光顯微鏡觀察。熒光染料Hoechst 33258與DNA特異結合的活性染料，以非嵌入式結合在DNA的A-T堿基區，紫外光激發時發射藍色熒光。該實驗中，KamebacetalA處理后的細胞在熒光顯微鏡下可見細胞核染為高亮藍色的典型凋亡小體，其細胞核明顯固縮、凝聚和斷裂。

1　材料與方法

1.1細胞和被試化合物Hep-G2細胞株和對映-貝殼杉烷二萜化合物KamebacetalA均由西北師范大學生命科學院提供。……