TLR介導的Nrf2抗氧化通路在對乙酰氨基酚藥物性肝損傷中的保護作用

顧佳毅　郁豐榮

?

·論著·

TLR介導的Nrf2抗氧化通路在對乙酰氨基酚藥物性肝損傷中的保護作用

顧佳毅郁豐榮

目的研究內毒素(LPS)及Toll 樣受體(TLR)在對乙酰氨基酚(APAP)藥物性肝損傷中的保護作用及其相關機制。方法雄性 C57BL/6 小鼠40只，分為 4 組，每組 10 只。空白對照組腹腔注射0.9%氯化鈉溶液，LPS組腹腔注射LPS 10 μg/kg，APAP組腹腔注射APAP 300 mg/kg，LPS+APAP組在APAP造模前16 h給予LPS 10 μg/kg預處理。通過比較各組血清 ALT 和 AST水平，并通過HE染色評價肝組織損傷程度，觀察LPS對小鼠肝損傷的保護作用。測定相應時間點的肝臟組織丙二醛(MDA)、還原型谷胱甘肽(GSH)的變化以及肝組織DHE染色，評價小鼠氧化應激水平。應用Western印跡及RT-PCR檢測肝臟Nrf2，Gclc及HO-1的表達水平。結果LPS預處理可明顯減輕APAP所致的肝臟氧化應激反應及肝損傷程度。LPS預處理組的小鼠血清ALT(518.3±142.3對4542±498.4 U/L)、AST(643.3±105.6對5432.1±569.2 U/L)水平及肝組織MDA(78.0±14.5對141.7±26.4 mmoL/mg)水平與模型組相比明顯降低,而GSH (6.2±1.7對3.5±1.0 μmol/g)水平明顯升高(P<0.05),肝組織病理損傷明顯減輕。同時，LPS預處理可明顯促進Nrf2及其下游抗氧化基因的表達。結論LPS在小鼠APAP肝損傷中起到保護作用，作用機制與Nrf2抗氧化通路的激活相關，可能成為藥物性肝損傷的新的治療策略。

對乙酰氨基酚；藥物性肝損傷；氧化應激；Nrf2；HO-1

對乙酰氨基酚(acetaminophen，APAP)是一種解熱鎮痛藥，在治療劑量下，APAP具有較好的療效及安全性[1]。然而，APAP會導致部分患者肝損傷甚至急性肝功能衰竭。目前APAP肝損傷已取代病毒性肝炎成為歐美等發達國家急性肝衰竭的首要病因[1-3]。很多嚴重的APAP肝衰竭患者需要肝移植術才能得到救治[4-6]。研究認為，APAP本身并不具有直接殺傷肝細胞的作用，APAP的肝細胞毒性主要是由其活性代謝產物導致的[7]。在常規劑量下，90%的APAP可以通過醛糖酸化和硫酸化作用后經尿液排除[8]，10%的APAP經過CYP450代謝轉化而產生高活性代謝產物NAPQI[9-13]。在正常情況下，肝細胞通過還原型谷胱甘肽(GSH)結合NAPQI轉化為無毒物質[14]。……