結腸腺癌中轉化生長因子β激酶1與細胞增殖的關系

戈　銳　周　為　燕　速　劉　寧　安文靜　于鵬杰　張成武

(青海大學附屬醫院胃腸腫瘤外科，青海　西寧　810001)

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結腸腺癌中轉化生長因子β激酶1與細胞增殖的關系

戈銳周為燕速劉寧安文靜于鵬杰張成武

(青海大學附屬醫院胃腸腫瘤外科，青海西寧810001)

目的檢測結腸腺癌中轉化生長因子β激酶(TAK)1和Ki67表達，觀察TAK1和Ki67標記的增殖指數的關系。方法62例結腸腺癌術后存留的蠟塊組織作為觀察組，15例距結腸腫物邊緣>5 cm的正常結腸黏膜組織作為對照組。應用免疫組化SP法檢測兩組中TAK1和Ki67的表達。結果兩組中TAK1和Ki67的表達差異有統計學意義。觀察組中TAK1和Ki67的表達均與腫瘤的浸潤深度和最大徑密切相關，TAK1的表達與分化程度密切相關。相關分析顯示觀察組中TAK1和Ki67的表達呈正相關性。結論結腸腺癌中TAK1和Ki67高表達對促進腫瘤的形成和進展有一定作用。TAK1對Ki67標記的增殖可能有一定作用。

結腸腺癌；轉化生長因子β激酶1；Ki67；免疫組化

結腸腺癌多見于中老年人，與結腸息肉病有關，同時存在著機體基因和蛋白的表達失調〔1，2〕。轉化生長因子β激酶(TAK)1是絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，是絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)中的一種，對調節細胞的炎癥反應、免疫反應及細胞增殖可能有一定作用〔3，4〕。近年研究顯示TAK1在腫瘤中可能有一定作用〔5，6〕。Ki67是臨床常用的標記細胞增殖的蛋白，其表達穩定，同時對預后可能有一定的指導意義〔7，8〕。本研究觀察結腸腺癌中TAK1和Ki67的表達，分析其臨床意義。

1　資料與方法

1.1一般資料我院行根治手術并經病理確診的結腸腺癌患者62例作為觀察組，其中男33例，女29例；年齡43～78歲，平均58.6歲。15例距腫物邊緣>5 cm的正常結腸黏膜組織作為對照組，其中男8例，女7例；年齡44～73歲，平均57.6歲。兩組均留取術后蠟塊組織，并留取完整臨床資料。兩組一般資料無明顯差異。

1.2TAK1和Ki67表達的檢測TAK1和Ki67的檢測均基于石蠟包埋的術后組織，應用免疫組化二步法，二氨基聯苯胺(DAB)顯色。嚴格按說明書進行操作，做好質量控制及監測。

1.3TAK1和Ki67的判定TAK1以細胞質中出現淡黃色-棕黃色顆粒定為陽性，Ki67以細胞核中出現淡黃色——棕黃色定為陽性。選擇上皮細胞集中的區域，在400倍鏡下進行計數(共3個視野)。陽性根據以下兩個方面：①陽性細胞百分比<1%為0分；1%～10% 1分，>10%且≤30% 2分，>30%且≤60% 3分，>60% 4分。②細胞的染色陰性為0分；淡黃色1分；黃色2分；棕黃色3分。以二者相加作為最終判定結果。TAK1：0～2分陰性，3～7分陽性。Ki67：0～5分陰性，6～7分陽性。

1.4統計學方法采用SAS6.12統計軟件進行χ2檢驗或線性相關分析。

2　結　果

2.1兩組TAK1和Ki67表達的比較兩組TAK1和Ki67的表達差異均有統計學意義(P<0.01)。見表1。

2.2觀察組中TAK1和Ki67的表達在不同臨床特征中的比較觀察組中TAK1和Ki67的表達均與腫瘤的浸潤深度和最大徑密切相關，TAK1的表達與分化程度密切相關。見表2。

表1　兩組中TAK1和Ki67表達的比較〔n(%)〕

表2　觀察組中TAK1和Ki67的表達在不同臨床特征中的比較〔n(%)〕

2.3觀察組中TAK1和Ki67的相關性觀察組中TAK1和Ki67(r=0.52，P<0.05)具有正相關性。

3　討　論

結腸腺癌的形成與上皮細胞的異型增生有關，此時腫瘤細胞的形態多樣，細胞異型程度增加，腺管排列紊亂，同時具有明顯的肌層侵犯〔9〕。結腸腺癌的發生及進展與細胞增殖密切相關，目前標記增殖的經典抗體是Ki67，Ki67表達升高時能明顯證實腫瘤處于增殖狀態中〔10〕。TAK1是唯一需要接頭蛋白的MAPK成員〔11〕。TAK1受多種TAK1及其結合蛋白(TABs)翻譯后修飾的調節，TAK1活化環節中的多種絲氨酸和蘇氨酸殘基在細胞因子刺激時發生磷酸化〔12〕。有研究認為在白細胞介素-1處理細胞時，可以引起核轉錄因子(NF)-κB的磷酸化，并且這是TAK1介導NF-κB和活化蛋白轉錄因子(AP)-1活化所需要的〔13，14〕。也有研究認為TAK1參與多條信號通路，激活下游相關的凋亡蛋白，如P38和JNF〔15〕。由于NF-κB和AP-1是調節眾多參與炎癥、腫瘤形成和凋亡基因的關鍵轉錄因子〔16〕，因此TAK1通過NF-κB介導的調節生物學功能可能更多。喬飛〔17，18〕通過觀察TAK1在食管癌中的表達，發現TAK1與腫瘤的臨床分期和淋巴結轉移呈正相關，且TAK1的表達與腫瘤的5年生存率有關，因此認為TAK1可能是食管癌發病機制中的重要參與者，而靶向TAK1的治療有可能改善食管癌患者的預后。

本文結果提示TAK1和Ki67高表達是促進上皮細胞惡變及進展為癌的重要因素。TAK1在促進腫瘤形成過程中可以直接引起細胞增殖，使腫瘤體積增大。TAK1和Ki67高表達是促進腫瘤生長和侵襲的重要蛋白，提示TAK1參與腫瘤失控性增生和細胞的成熟過程。雖然本實驗未直接發現Ki67與分化的關系，但是統計學結果也在一定程度上說明了Ki67可能有一定作用。也有研究認為生理情況和腫瘤病理情況下TAK1的作用可能不同，尤其是腫瘤狀態下，TAK1的作用更明顯，主要表現為調控細胞生長、分化和凋亡。TAK1對凋亡的作用可能與對腫瘤細胞增殖的作用同樣重要，即TAK1對凋亡的抑制作用明顯〔19〕，而對增殖的作用也比較強，因此TAK1作用的途徑及通路涉及的機制更多。鞠紅艷等〔20〕認為TAK1對結腸腺癌的發生具有促進作用，且TAK1的表達可能與K-ras基因突變有關。也有研究認為TAK1可以促進腫瘤的生長，促進腫瘤的血管生成〔21〕，同時可以保護異常細胞免于自然死亡，增強其轉移能力。炎癥反應相關的細胞因子可能貫穿于腫瘤形成和進展的始終，但是其具體機制有待更多實驗研究〔22，23〕。

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3Yao Y，Fang ZP，Chen H，etal.HGFK1 inhibits bone metastasis in breast cancer through the TAK1/p38 MAPK signaling pathway〔J〕.Cancer Gene Ther，2012;19(9)：601-8.

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17喬飛.轉化生長因子β激活酶1在食管癌中的表達及其臨床意義〔J〕.實用醫學雜志，2014；30(9)：3084-6.

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20鞠紅艷，白洋，王策.轉化生長因子β激活酶1在結腸癌中表達及臨床意義〔J〕.中國普通外科雜志，2015；24(10)：1417-21.

21Zippel N，Malik RA，Fromel T，etal.Transforming growth factor-β-activated kinase 1 regulates angiogenesis via AMP-activated protein kinase-α1 and redox balance in endothelial cells〔J〕.Arterioscler Thromb Vasc Biol，2013；33(12)：2792-9.

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23Yang B，Li W，Zheng Q，etal.Transforming growth factor β-activated kinase 1 negatively regulates interleukin-1α-induced stromal-derived factor-1 expression in vascular smooth muscle cells〔J〕.Biochem Biophys Res Commun，2015；463(1-2)：130-6.

〔2015-02-11修回〕

(編輯苑云杰)

張成武(1963-)，男，主任醫師，主要從事胃腸腫瘤研究。

戈銳(1982-)，男，碩士，主治醫師，主要從事胃腸腫瘤研究。

R735

A

1005-9202(2016)15-3745-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.15.062