參飛顆粒對大鼠酒精性脂肪肝的保護作用

李　鳳　于曉風　孫偉倫　劉一鳴　付雯雯　張　虹　睢大筼

(吉林大學藥學院藥理教研室，吉林　長春　130021)

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參飛顆粒對大鼠酒精性脂肪肝的保護作用

李鳳于曉風孫偉倫劉一鳴付雯雯張虹睢大筼

(吉林大學藥學院藥理教研室，吉林長春130021)

目的觀察參飛顆粒對大鼠酒精性脂肪肝(AFLD)的保護作用。方法150只雄性Wistar大鼠，取12只作為正常組，其余大鼠制備AFLD模型：1～4 w灌胃給予40%白酒8 g/kg，5～8 w給予50%白酒9 g/kg，9～16 w給予50%白酒10 g/kg。第9周模型大鼠根據體重隨機分為模型組、參飛顆粒(1、2、4 g/kg)組及陽性藥水飛薊賓(80 mg/kg)組，各組分別灌胃給予相應藥物，正常及模型組給予同體積的0.5%羧甲基纖維素鈉。給藥8 w后，水合氯醛麻醉，腹主動脈取血，檢測血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、極低密度脂蛋白(VLDL)、游離脂肪酸(FFA)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)活性。結果與正常組比較，模型組大鼠血清TC、TG、VLDL、FFA及MDA含量明顯升高，SOD活性降低，AST、ALT活性升高。與模型組比較，參飛顆粒4g/kg劑量組能明顯降低大鼠血清中TC、TG、VLDL、MDA、FFA含量及ALT活性，升高SOD活性。結論參飛顆粒對大鼠AFLD具有保護作用，其作用機制可能與調節脂質代謝、對抗脂質過氧化損傷及改善肝功能有關。

參飛顆粒；酒精性脂肪肝；脂質代謝；氧化應激

酒精性脂肪肝(AFLD)最初僅表現為脂肪肝，隨著飲酒的繼續，病情可繼續發展為酒精性肝炎、酒精性肝纖維化，以最后形成酒精性肝硬化、肝細胞癌〔1〕。當機體受到酒精的刺激時，脂質過多的輸入導致肝臟脂蛋白合成代謝發生障礙，脂肪酸氧化不足，脂肪就會在肝臟沉積，進而發生脂肪肝〔2,3〕。參飛顆粒是以人參、黨參、水飛薊及山楂4味中藥組成的復方制劑，經處方篩選證實具有保肝、驅脂及降脂作用。本研究旨在探討參飛顆粒對大鼠AFLD的保護作用。

1　材料和方法

1.1動物雄性Wistar大鼠150只，體重180～220 g，由吉林大學基礎醫學院動物實驗中心供給，合格證號：SCXK-(吉) 2007-0003。動物飼養于通風動物房內，室溫(20±2)℃，自由進食與飲水。

1.2藥品和試劑參飛顆粒由白求恩醫科大學制藥廠提供，批號：20120523，以0.5%羧甲基纖維素鈉配制成混懸液；水飛薊賓膠囊由天津天士力制藥股份有限公司生產，批號：20120721，以0.5%羧甲基纖維素鈉配制成混懸液；總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、極低密度脂蛋白(VLDL)、游離脂肪酸(FFA)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷草轉氨酶(ALT)及谷丙轉氨酶(AST)測試盒由南京建成生物工程研究所提供。

1.3實驗方法〔4〕150只大鼠適應性飼養1 w，取12只大鼠為正常組，其余大鼠造AFLD模型：第1～4周灌胃給予40%白酒8 g/kg，第5～8周給予50%白酒9 g/kg，第9～16周給予50%白酒10 g/kg〔酒精劑量(g)=乙醇體積(ml)×預配酒精濃度(%)×酒精密度(0.8 g/ml)〕。第9周模型大鼠根據體重隨機分為模型組、參飛顆粒(1、2、4 g/kg)組及陽性藥水飛薊賓(80 mg/kg)組，各組分別灌胃給予相應藥物，正常及模型組給予同體積0.5%的羧甲基纖維素鈉。給藥8 w后，水合氯醛麻醉，腹主動脈取血，分離血清，檢測TC、TG、VLDL、FFA、MDA含量及SOD、AST、ALT活性；取部分肝臟制備勻漿，檢測MDA含量及SOD活性。

1.4統計學方法采用SPSS10.0軟件行方差分析。

2　結　果

2.1參飛顆粒對AFLD大鼠脂類代謝的影響與正常組比較，模型組大鼠血清TC、TG、VLDL及FFA含量均有明顯升高(P<0.05或P<0.01)，與模型組比較，參飛顆粒4 g/kg組及水飛薊賓組均能明顯降低大鼠血清TC、TG、VLDL及FFA含量(P<0.05或P<0.01)，參飛顆粒2 g/kg組能明顯降低大鼠血清TG、VLDL及FFA含量(P<0.05)，見表1。

表1　參飛顆粒對AFLD大鼠脂類代謝的影響

與正常組比較:1)P<0.05,2)P<0.01；與模型組比較:3)P<0.05,4)P<0.01；下表同

2.2參飛顆粒對AFLD大鼠自由基的影響與正常組比較，模型組大鼠血清及肝組織MDA含量明顯升高，SOD活性明顯降低(P<0.01)；與模型組比較，參飛顆粒2、4 g/kg組均能明顯降低大鼠血清及肝組織MDA含量，升高血清及肝組織SOD活性(P<0.05或P<0.01)，見表2。

表2　參飛顆粒對AFLD大鼠自由基的影響

2.3參飛顆粒對AFLD大鼠血清肝酶的影響與正常組比較，模型組AST、ALT活性明顯升高(P<0.05或P<0.01)；與模型組比較，參飛顆粒2、4 g/kg劑量組及水飛薊賓組均能明顯降低血清中ALT活性(P<0.05或P<0.01)，AST活性有降低趨勢(P>0.05)，見表3。

表3　參飛顆粒對AFLD大鼠血清肝酶的影響

3　討　論

由于長期飲酒導致肝臟損害，進而逐漸形成了AFLD。AFLD發病機制較為復雜，目前尚不完全清楚，可能與酒精及其代謝產物對肝臟的毒性作用、氧化應激、免疫介導、細胞因子、細胞凋亡、內毒素、遺傳多態性、病毒的疊加作用等多種因素有關〔5～7〕。肝臟是脂類代謝的中心，對脂類的消化、吸收、氧化、分化、轉化起著重要作用。乙醇氧化導致的高代謝狀態使周圍脂肪的動員增加，肝細胞脂肪酸的水平隨著增加，從而造成TG在肝細胞內大量積聚而導致肝細胞脂肪病變，使肝臟從脂肪氧化器官變為儲脂器官，最終導致AFLD形成〔8,9〕。本實驗結果表明，參飛顆粒能顯著降低血清TC、TG水平，提示參飛顆粒可能是通過減少脂質沉積起到保護AFLD大鼠肝臟的作用。

氧化應激是活性氧(ROS)產物增加和抗氧化失去平衡引起的酒精肝損傷的重要特征〔10〕。氧化應激可增加脂質過氧化產物和細胞因子的釋放，介導AFLD的發生發展。本實驗結果提示酒精可引起體內氧化與抗氧化失衡，氧自由基產生增多，從而啟動脂質過氧化反應。給予參飛顆粒后，大鼠血清中MDA的含量顯著下降，SOD的活力顯著上升，提示參飛顆粒可能是通過增強大鼠體內清除氧自由基的能力和抗脂質過氧化來保護肝細胞，從而防治AFLD。

ALT及AST酶學指標能反映肝細胞壞死的程度，直接關系到AFLD的發展與轉歸〔11〕。本實驗提示參飛顆粒對肝功能具有改善作用，對大鼠AFLD具有保護作用，其作用機制可能與調節脂質代謝、對抗脂質過氧化損傷及改善肝功能有關。

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9Seth D,Hogg PJ,Gorrell MD,etal.Direct effects of alcohol on hepatic fibrinolytic balance:implications for alcoholic liver disease〔J〕.J Hepatol,2008;48(4):614-27.

10曾民德.脂肪性肝病的氧應激及其治療對策〔J〕.國外醫學·消化系疾病分冊，2005;25(5):263-6.

11Fernandez M,Trépo E,Degré D,etal.Transient elastography using Fibroscan is the most reliable noninvasive method for the diagnosis of advanced fibrosis and cirrhosis in alcoholic liver disease〔J〕.Eur J Gastroenterol Hepatol,2015;27(9):1074-9.

〔2016-03-11修回〕

(編輯李相軍/滕欣航)

吉林省科技發展計劃項目(No.20130727003YY)

睢大筼(1957-)，男，教授，博士生導師，主要從事心血管藥理學研究。

李鳳(1987-)，女，醫學碩士，主要從事心血管藥理學研究。

R-322

A

1005-9202(2016)15-3642-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.15.014