化學發光免疫測定在生化檢驗中的應用效果評價

桂明 周曉霞

[摘要] 目的 分析化學發光免疫測定在生化檢驗中的應用效果與評價。 方法 選取2013年5月～2015年5月我院580例甲狀腺腫瘤患者，按拋硬幣法將其分為兩組各290例，一組使用化學發光免疫檢測法，設為檢測組，另一組采用放射免疫分析法，設為放射組。對兩組檢測結果進行比較。 結果 檢測組靈敏度、特異性以及檢測符合率等指標均顯著高于放射組，差異有統計學意義（P<0.05）。檢測組甲狀腺球蛋白水平為（690.8±89.1）ng/mL，放射組為（631.2±51.3）ng/mL，兩組比較差異有統計學意義（t=9.872，P<0.05）。 結論 化學發光免疫檢測具有較高靈敏度與準確性，在臨床診斷與治療中應用效果顯著，對準確診斷出患者病情意義重大，有一定的臨床推廣價值。

[關鍵詞] 化學發光免疫測定；生化檢驗；應用效果；放射免疫分析法；評價

[中圖分類號] R446.1 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2016）05-0113-03

化學發光免疫測定法又被稱為化學發光標記免疫測定法，國際上通稱為chemiluminescent immunoassay，即CLIA。該方法通過磁場將抗原、抗體沉淀部分與游離部分進行分離，從而達到定量或定性檢測的目的，廣泛應用于臨床病毒、腫瘤標志物、免疫系統疾病以及心臟疾病的診治過程。本次研究以甲狀腺腫瘤為主要研究方向，選取本院580例甲狀腺腫瘤患者，就化學發光標記免疫測定法與放射免疫分析法在生化檢驗中的應用效果展開研究，并結合文獻調研與臨床經驗，對化學發光免疫測定在其他疾病臨檢確診過程中的應用進行了簡要闡述，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2013年5月～2015年5月580例甲狀腺腫瘤患者，按拋硬幣法將其分為檢測組和放射組各290例，其中檢測組男142例，女148例，年齡7～85歲，平均（46.2±7.5）歲，病程1～6年，平均（3.2±1.3）年；放射組男151例，女139例，年齡9～83歲，平均（47.3±4.2）歲，病程1.5～8年，平均（4.3±1.7）年。本次研究在取得我院醫學倫理委員會認證通過的前提下進行，所有患者均與我院簽署《調查研究知情同意書》，符合《甲狀腺病理診斷》（人民軍醫出版社，2011版）中的臨床標準，排除心腦血管疾病、特殊情況過敏、腎功能嚴重障礙以及有精神病史或家族精神病史的患者。檢測組患者性別、年齡、病程等一般資料與放射組比較差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

將各組人員進行編號并分別抽取3 mL靜脈血，將患者血液中加入適量肝素（Glaxo Wellcome Production，國藥準字J20090006）抗凝，離心分離，3500 r/min，取血漿凍存，檢測患者甲狀腺球蛋白，檢測時間控制在4 h以內。

放射組患者采取放射免疫法進行檢測，使用FJ-20003/50P型γ全自動雙探頭放射免疫計數儀（西安國營二六二廠提供）對患者甲狀腺球蛋白進行檢測。

檢測組患者采取化學發光免疫法進行檢測。MAGLUMI-4000型分析儀與配套化學發光試劑盒（深圳新產生業生物醫學工程股份有限公司）進行甲狀腺球蛋白檢驗，采用雅培i2000儀器與配套試劑（美國雅培公司）進行第三方驗證。

1.3 觀察指標

通過對各組甲狀腺球蛋白檢測結果進行分析，以假陽性和假陰性檢出率為依據，對兩種檢測方法特異性和靈敏性進行比較。放射免疫法檢測甲狀腺球蛋白正常水平為11.45～20.25 ng/mL，化學發光免疫法檢測甲狀腺球蛋白正常水平為0.73～84 ng/mL。靈敏度=真陽性/（真陽性+假陰性）×100.0%，特異性=真陰性/（真陰性+假陽性）×100.0%，符合率=（真陽性+真陰性）/總例數×100.0%。

1.4 統計學處理

文中涉及數據均在SPSS13.0中輸入，計數資料采取率（%）表示，行χ2檢驗，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，行t檢驗，P<0.05認為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組檢測結果比較

檢測組實際陽性143例，陰性147例，檢測出真陽性142例，真陰性142例。放射組實際陽性146例，陰性144例，檢測出真陽性125例，真陰性118例。采用化學發光免疫法的檢測組檢測甲狀腺球蛋白靈敏度、符合率、特異性等數據明顯高于采用放射免疫檢測法的放射組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

2.2 兩組甲狀腺球蛋白水平比較

檢測組甲狀腺球蛋白水平為（690.8±89.1）ng/mL，放射組為（631.2±51.3）ng/mL，兩組比較差異有統計學意義（t=9.872，P<0.05）。

3 討論

化學發光免疫測定技術最早應用于20世紀70年代，當時只作為示蹤信號，且靈敏度與發光時間明顯不足，局限了應用領域。隨著醫學儀器技術發展，到80年代中期，出現辣根過氧化物酶標記技術，大大提高了信號強度，延長了發光時間，解決了測定技術難題。化學發光通常被分為3大類型：第一種為發光酶免疫測定，即LEIA；第二種為發光物免疫測定，即LIA；第三種為發光輔助因子免疫測定，即LEIA。化學發光類型雖然各異，但其內在原理卻能通用，化學發光均為通過化學發光物質通過化學反應從而產生光輻射[1]。本次研究所討論的化學發光免疫測定方法與放射免疫測定方法具有一定相似之處，二者都可以用Ag-L+CR→light進行標示（Ag-L代表發光物；CR代表協同反應物）[2]。化學發光免疫測定用途十分廣范，在醫學領域中，化學發光免疫測定法常見于腫瘤測定過程之中，憑借其特有的光輻射，能對CA153、CA242、CEA、NES、AFP、PSA等十多種腫瘤進行測定。

本次研究結果表明，使用化學發光免疫測定對甲狀腺球蛋白濃度進行檢測，檢測靈敏度、符合率、特異性均明顯高于放射免疫檢測，差異有統計學意義（P<0.05）。利用化學發光原理對甲狀腺球蛋白濃度進行檢驗更加簡單實用，更為靈敏的檢測出甲狀腺疾病，且具有高準確率，解決了甲狀腺疾病臨檢難題。TG屬于甲狀腺中主要蛋白形式，占蛋白總量的75%左右，是甲狀腺激素生物合成的首要前提。在蛋白水解酶的作用因素下，甲狀腺激素脫離TG釋放入血，在正常前提下，循環血中有微量TG存在。TG半衰期在（4～60）h左右，在各種甲狀腺疾病，尤其是甲狀腺腫瘤，患者血液中TG濃度均有不同程度的增高。本次研究采用化學發光免疫檢測法和放射免疫法對甲狀腺腫瘤患者TG水平進行檢測，結果表明檢測組TG水平明顯高于放射組，提示TG水平可作為甲狀腺腫瘤術前和術后變化的反映指標，且具有高靈敏性，因此甲狀腺腫瘤患者應定期復查TG水平。

此外，化學發光免疫檢測還廣泛應用于臨床生化檢驗中，包括病毒檢測、心臟疾病檢測等。具體內容如：（1）梅毒螺旋體檢測。臨床常用方法為對患者體內非密螺旋體特異性抗體進行檢測，之后再進行確證檢測，根據結果才能確診，常用的人工檢測方法效率低且耗時長，操作復雜，無法滿足臨床要求，在何惠[3]等的研究中，采用化學發光免疫檢測則可利用全自動分析儀，通過兩步法進行定性檢測，能有效降低假陽性率，提高臨床檢出準確率。（2）乙肝病毒標志物檢測。在乙型病毒性肝炎傳統檢測過程中多采用ELISA法進行定性檢測，無法滿足臨床定量的需求，由于目前多以HBsAg作為病毒感染的判斷標志物，因此可采用化學發光免疫測定法對乙肝HBsAg抗原進行測定，達到定量與定性的雙重標準，靈敏度可達100%，符合率和特異性分別可達97.61%，98.74%，且各檢測指標均符合臨床診療需求，在較大范圍內線性良好。（3）腫瘤標志物檢測。腫瘤標志物存在與細胞和組織當中，包括蛋白質、酶、激素等，國內外大部分學者通過化學發光免疫測定法檢測腫瘤標志物，對腫瘤患者早期診斷和術后檢測提供了有參考價值的指標，例如張國軍等[4]人以化學發光免疫測定發對血清中鱗狀細胞癌抗原以及cy-fra21-1濃度進行測定，從而實現了對食管癌的有效診斷和病情觀察，效果良好。（4）心臟疾病檢測。陳麗珠等[5]對心臟病患者心肌損傷標志物和肌紅蛋白間的關系進行了數據分析，結果顯示三者間有密切相關性，因此在心臟疾病臨檢過程中可利用化學發光免疫測定對臨床標本進行檢測，能實現對心臟疾病患者及時、準確、有效的診斷和臨床癥狀監護。

在臨床生化檢驗過程中，能有效滿足疾病標記的抗原畢竟占少數，因此還需對檢測方法進行充分優化，具體表現為：（1）有效提升分析結果的準確性和靈敏度，提高分析結果放大倍數，延長檢驗下限，擴大化學發光免疫檢測的應用范圍，使其發揮更大的臨床價值[6-9]；（2）提高分析儀器的準確性，以促進儀器小型化、智能化轉變為發展方向[10-12]；（3）化學發光免疫測定對發光物的生成和催化劑效果依賴較大，為有效擴大應用范圍，提升檢測靈敏度，還需研發出新型發光物和催化劑，同時還需修飾和增強化學發光反應效果，進一步探討新型分析方法， 提升檢驗準確性[13-18]。

綜上，化學發光免疫檢測具有較高靈敏度與準確性，在臨床診斷與治療中應用效果顯著，對準確診斷出患者病情意義重大，有一定的臨床推廣價值。

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（收稿日期：2015-12-30）