羊黑疫并發羊肝片吸蟲病的診斷與防治

尚宗民

摘要 介紹了羊黑疫并發羊肝片吸蟲病的病原及致病機理，分析了流行特點與臨床癥狀，并為羊養殖戶及相關人員提出具體診斷和防治方法，以供參考。

關鍵詞 羊黑疫并發羊肝片吸蟲??；診斷；防治

中圖分類號 S858.26 文獻標識碼 B 文章編號 1007-5739（2016）05-0296-02

羊黑疫并發羊肝片吸蟲病在羊養殖過程中時常遇到，特別是潮濕低洼沼澤地區，2種病在疾病發生發展過程中相輔相成。肝片吸蟲的幼蟲對肝臟的損傷，使羊黑疫的感染風險增高，疾病損傷程度加重，發病急，臨床癥狀不甚明顯，內臟以肝臟實質性壞死為特征，但該病原在有氧條件下極難培養，經常給羊養殖戶防治該病造成困難。在診斷上必須以2種病原的檢出作為診斷依據，防治上必須消滅病原、健康羊接種疫苗與驅蟲，結合飼養管理綜合防治才能見成效。

1 病原

1.1 B型諾維氏梭菌

B型諾維氏梭菌是一種革蘭氏染色陽性、粗大厭氧性細菌，B型諾維氏梭菌95 ℃ 15 min仍然存活，105～120 ℃ 5～6 min可滅活，5%苯酚、1%福爾馬林和次氯酸鹽能迅速殺滅其芽孢。

1.2 肝片吸蟲

扁平葉狀，體表有很多小刺，體長2.0～3.5 cm、寬0.5～1.3 cm，蟲體前段為圓錐狀頭錐，頭錐前部有口吸盤，頭錐向下擴展變寬形成肩狀，肩后逐漸變窄，肩部水平線有腹吸盤。從肝臟中取出的新鮮蟲體為棕紅色，福爾馬林固定后呈灰白色。蟲卵為黃褐色橢圓形，120～150 μm，寬63～90 μm，外觀前窄后鈍，前端有不明顯卵蓋。

肝片吸蟲的抵抗力與外界環境條件有關，蟲卵在12 ℃時停止發育，2～4 ℃下18個月后仍有60%孵化率，結冰后迅速死亡；不耐高溫和干燥，40～50 ℃或干燥條件下不到10 min就死亡；潮濕環境下蟲卵能存活8個月以上，在椎實螺體內存活時間會延長。

2 致病機理

B型諾維氏梭菌的芽孢普遍附著于牧草和飼料上，隨羊只飲食通過腸道進入肝臟潛伏下來不發病，當有肝片吸蟲感染致使肝臟受損時，B型諾威氏梭菌大量繁殖感染，在體內產生大量毒素造成毒血癥而發??；肝片吸蟲幼蟲在肝臟中移行形成機械性損傷肝臟的同時，釋放各種毒素，溶血和造成肝臟炎癥以及神經癥狀[1-2]。

3 傳染來源

受B型諾維氏梭菌和肝片吸蟲蟲卵污染的土壤、牧草、飼料、飲水等都是半黑疫并發羊肝片吸蟲病的傳染來源。

4 流行特點

4.1 羊黑疫

多發于每年秋末，多發于南方潮濕低洼沼澤地區；周歲羊多發，死亡率高，老齡羊和羔羊發病少，死亡率低，肝片吸蟲是誘發羊黑疫的主要原因。

4.2 肝片吸蟲病

多發于低洼潮濕多沼澤放牧地區，主要流行于春末、夏秋溫暖多雨季節，多雨年份會促進流行，常造成幼羊大批死亡或嚴重營養不良。

5 臨床癥狀和病變特征

5.1 臨床癥狀

離群或站立，流涎，磨牙，貧血，黏膜蒼白，眼瞼、胸前腹下水腫，食欲減退，間歇性瘤胃臌脹，腹瀉與便秘交替進行，平時低熱，肝區有壓痛表現，叩診呈濁音；發病時突然高熱41 ℃以上，反芻停止，呼吸困難，臥地昏睡，幾小時內突然死亡或拖延1～2 d后死亡，死亡率幾乎100%。

5.2 病理變化特征

尸體迅速腐敗，皮下顯著充血，使羊皮外觀呈暗黑色，皮下組織有透明膠樣浸潤；左心室內膜下常有出血點，真胃幽門黏膜和小腸充血出血；肝臟腫脹，表面有大大小小的壞死灶，并被出血性帶狀物包圍，常能發現肝臟表面有黃綠色像蟲一樣彎曲的帶狀痕跡；胸腹腔和心包有積液。

6 疾病診斷

根據以上臨床癥狀、流行病學和病理變化特點可以作出初步診斷。另外，獸醫臨床上因為羊快疫、羊猝疽、羊腸毒血癥、羔羊痢疾是由3種不同的梭菌引起的傳染病，所以還需要與3種病相鑒別：羊快疫是腐敗梭菌引起羊急性致死性疾病，也是發病急，病程短，死亡快，真胃和十二指腸黏膜呈出血性壞死性炎癥；羊猝疽是C型產氣莢膜梭菌引起羊急性死亡的傳染病，特征是腹膜炎和潰瘍性腸炎；羊腸毒血癥是D型產氣莢膜梭菌引起的急性致死性傳染病，同樣是發病急，病程短，特征病變是腎組織軟化無彈性，俗稱“軟腎病”。確診還需要下面幾個步驟檢出病原[3-5]。

6.1 羊黑疫病原的檢出

6.1.1 B型諾維氏梭菌培養基制備和培養。培養基的配制：將含有0.1%的葡萄糖和0.1%硫乙醇酸鈉的滅菌融化的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基冷卻到45～50 ℃，無菌加入培養基總量的5%～10%新鮮的脫纖維血，迅速搖勻，立即倒入滅菌平皿中冷凝即成。梭菌的分離和培養：將羊肝臟切塊放入組織搗碎機絞碎，加入2倍量蒸餾水，加熱至80 ℃保持20 min，消除不耐熱細菌的污染，有利于梭菌的分離，然后無菌挑取少許劃線移植于葡萄糖鮮血瓊脂平面上，迅速放置在二氧化碳培養箱中25 ℃下培養1～2 d，挑取單個菌落移植于另一培養基中放入二氧化碳培養箱中25 ℃下培養1～2 d，觀察細菌菌落形態和溶血類型。

6.1.2 羊黑疫病原的鑒定。羊死亡后，迅速無菌采取羊肝臟被膜觸片革蘭氏染色鏡檢，如果有細長絲狀細菌，接種豚鼠后，采取豚鼠肝臟被膜觸片染色鏡檢，也發現大量細長絲狀細菌，此為引起羊快疫的腐敗梭菌；如果肝臟壞死灶邊緣組織觸片后，發現革蘭氏染色呈陽性的典型巨大桿菌，兩端鈍圓，單個或成雙散在，或3～4個以短鏈連接的，則懷疑為產生羊黑疫的B型諾維氏梭菌；若呈單個散在的桿菌可疑為產生羊腸毒血癥或羔羊痢疾的產氣莢膜桿菌。

從培養基上的菌落形態來鑒別：腐敗梭菌菌落灰白稍隆起，邊緣不整齊；B型諾維氏梭菌菌落淺薄透明；產氣莢膜梭菌菌落呈灰白圓形，周邊有明顯鋸齒狀。從培養基上的溶血類型上來鑒別：腐敗梭菌菌落有溶血，但沒有明顯溶血環；B型諾維氏梭菌菌落周圍有β型溶血環；呈雙溶血環的則是產氣莢膜梭菌菌落。接種動物試驗鑒別：死亡羊只剛剖檢的病料，做成混懸液肌肉注射豚鼠，豚鼠發病死亡后剖檢，可見豚鼠肌肉注射部位有出血性水腫，腹部皮下有膠凍樣浸潤，無色透明或呈玫瑰色，該癥狀極具診斷意義。毒素鑒定試驗：病料中的毒素具有卵磷脂酶試驗陽性特征。

6.2 肝片吸蟲病原的檢出

6.2.1 成蟲的檢出。死亡羊只剖檢肝臟在膽管中可發現呈扁平葉狀的成蟲。

6.2.2 幼蟲的檢出。在肝臟表面有黃綠色像蟲一樣彎曲的帶狀痕跡，切開后觸片鏡檢，往往能找到幼蟲。

6.2.3 蟲卵的檢出。取糞便5 g，加蒸餾水100 mL，攪勻后用40目網篩過濾到三角瓶中靜置30 min，小心倒去上清液，再加水攪勻靜置30 min，反復3遍，直到上清液透明為止，吸取沉淀物涂片鏡檢，鏡下可見長卵圓形黃褐色，大?。?16～132）μm×（66～82）μm，前窄后鈍，卵殼細薄透明，卵黃內有1個胚細胞和許多卵黃細胞的肝片吸蟲蟲卵。

7 疾病防治

7.1 預防

一是驅蟲。每年冬末春初和秋末冬初各進行1次驅蟲，使用三氯苯唑1 kg體重5～15 mg，各內服1次。二是糞便和內臟處理。羊圈經常清理，集中堆積發酵消滅蟲卵；內臟廢棄化制，禁止人畜食用。三是飲水和放牧。最好飲用自來水、井水或流動的河水，避免到低洼潮濕或沼澤地域放牧，有條件的或創造條件進行輪牧；不要更換飼料太快，少食青飼料和谷物，多食顆粒飼料。四是殺滅中間宿主。1 m2水池或沼澤用1/50 000的硫酸銅溶液5 L，牧區噴灑石灰1 000～1 500 kg/hm2，殺滅中間宿主椎實螺。

7.2 治療

病程緩和的羊，可注射氨芐青霉素等抗革蘭氏陽性菌的抗菌藥物，急性病例可肌肉注射抗諾維氏梭菌血清10～80 mL。

8 參考文獻

[1] 中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所.獸醫微生物學[M].北京：中國農業出版社，2013.

[2] 赫什.獸醫微生物學[M].王鳳陽，范泉水，譯.北京：科學出版社，2007.

[3] 夏兆飛.獸醫臨床實驗室檢驗手冊[M].5版.北京：中國農業出版社，2010.

[4] 陳懷濤.動物疾病診斷病理學[M].2版.北京：中國農業出版社，2012.

[5] 余祖功.反芻經濟動物疾病診療與處方手冊[M].北京：化學工業出版社，2010.