基于熒光染料和氧化石墨烯同步熒光法同時檢測多種流感病毒亞型

陳 璐， 何治柯

(1.華中農業大學理學院化學系，湖北武漢 430070；2.生物醫學分析化學教育部重點實驗室，武漢大學化學與分子科學學院，湖北武漢 430072)

流感病毒是正黏液病毒科帶有包膜的RNA病毒，它是很容易造成人和其它動物患流行性感冒的病原體[1]。根據病毒表面的血凝素和神經氨酸酶這兩種糖蛋白的不同，可以把流感病毒分成16種H型和9種N型[2]。傳統的流感病毒識別和檢測方法有三種，分別為細胞培養分離病毒法、實時反轉錄酶聯免疫吸附法和抗原-抗體免疫實驗。細胞培養病毒分離法檢測流感病毒比較靈敏，但耗時費力[3]。實時反轉錄酶聯免疫吸附法檢測成本比較高[4]。抗原-抗體免疫實驗缺點是靈敏度不高且檢測成本比較高[5]。因此，迫切需要開發一種簡便有效、靈敏度高、成本較低的流感病毒檢測方法。目前已經有很多化學傳感方法用于檢測流感病毒，比如電化學免疫法[6]、石英晶體微天平法[7]、表面等離子體共振法[8]、質譜法[9]等。雖然這些方法的檢出限可以達到105～107pfu/mL，但是不能對流感病毒進行高靈敏的分型檢測。熒光分析法靈敏度高，與常規熒光分析法相比，同步熒光分析法具有簡化譜圖、提高選擇性、減少光散射等特點，尤其適合多組分樣品分析[10]。

本文采用同步熒光均相免疫法對三種流感病毒H1N1、H5N1以及H9N2進行了分型和高靈敏檢測。分別選擇三種帶有活性基團及不同熒光發射波長的熒光染料，與H1N1、H5N1以及H9N2的抗體偶聯作為流感病毒的捕獲探針，再與氧化石墨烯溶液混合。……