氣相色譜法測定辛芷滴鼻液中龍腦和異龍腦的含量

魏　莉，劉光斌肅州區疾病預防控制中心，甘肅 酒泉735000；2酒鋼醫院

氣相色譜法測定辛芷滴鼻液中龍腦和異龍腦的含量

魏莉1，劉光斌2△
1肅州區疾病預防控制中心，甘肅 酒泉735000；2酒鋼醫院

目的：建立辛芷滴鼻液中龍腦和異龍腦的含量測定方法。方法：采用氣相色譜法測定，DB-WAX色譜柱（30 m×0.53 mm，1.0μm），載氣為氮氣，分流比為10∶1，柱溫為140℃，進樣口溫度為180℃，檢測器溫度為200℃。結果：龍腦和異龍腦分別在17.6～282.0、11.8～188.4μg/mL范圍內呈良好的線性關系（r=0.999 9、r=0.999 9，n=6）；平均加樣回收率分別為98.91%和99.45%（RSD為1.36%、1.53%，n=9）。結論：本法簡便、準確、靈敏度高、重復性好，可用于辛芷滴鼻液的質量控制。

辛芷滴鼻液；氣相色譜法；龍腦；異龍腦；含量測定

辛芷滴鼻液由辛夷、蒼耳子、白芷、冰片、薄荷腦等5味藥制成，具有祛風解表、宣通鼻竅、清熱解毒和行氣通絡之功。對慢性鼻-鼻竇炎(Chronic rhinosinusitis，CRS)有良好的療效［1］。其中冰片中含有的龍腦和異龍腦，均有抗菌和顯著抑制大鼠蛋清性足跖腫脹作用；異龍腦對巴豆油耳廓腫脹亦有抑制作用，提示龍腦和異龍腦對液體的滲出和組織水腫等炎癥過程有抑制作用［2］。為更好保證制劑質量，本研究采用氣相色譜法［3-4］測定辛芷滴鼻液中的龍腦和異龍腦的含量，效果滿意，現報道如下：

1　材料

1.1儀器6890型氣相色譜儀(美國安捷倫公司，配FID檢測器)；AUW120D型電子分析天平(日本島津)；WP-UP-YJ-30沃特浦實驗室專用超純水機(四川沃特爾水處理設備有限公司)；TG16-W臺式高速離心機(長沙維爾康湘鷹離心機有限公司)。

1.2試劑龍腦、異龍腦對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號：110881-200706、111512-200802，供含量測定用)；辛芷滴鼻液和陰性制劑(酒鋼醫院提供，批號：20150316、20150317、20150318)；試劑均為分析純；水為超純水。

2　方法與結果

2.1色譜條件色譜柱：DB-WAX(柱長30m，內徑0.53mm，膜厚度1μm)，柱溫：140℃；載氣流量(N2)：1.0mL/min(分流比：10∶1)；進樣口溫度：180℃；檢測器溫度：200℃；進樣量為1μL。

2.2內標溶液的制備取水楊酸甲酯適量，精密稱定，加環己烷制成每1mL含4mg的溶液，作為內標溶液。

2.3對照品溶液的制備分別稱取干燥至恒重的龍腦和異龍腦對照品8mg、4mg，精密稱定，置10mL量瓶中，加環己烷使溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取3mL，置25mL量瓶中，精密加入內標溶液1mL，加環己烷至刻度，搖勻，制成每1mL含龍腦96μg和異龍腦48μg的混合對照品溶液。

2.4供試品溶液的制備精密吸取辛芷滴鼻液5mL，置50mL具塞錐形瓶中，精密加入環己烷20mL，稱定重量，超聲處理10分鐘(功率320W，頻率40 kHz)，放冷，再稱定重量，用環己烷補足減失的重量，搖勻，冷凍離心10分鐘(4 000 r/min)，精密量取上清液10mL，置25mL量瓶中，精密加入內標溶液1mL，加環己烷至刻度，搖勻，即得。

2.5陰性樣品的制備取辛芷滴鼻液陰性制劑，按“2.4”項下方法制備陰性對照溶液。

2.6系統適應性實驗分別吸取陰性樣品溶液、對照品溶液、供試品溶液各1μL，注入氣相色譜儀。在“2.1”項色譜條件下，供試品中異龍腦和龍腦所對應的峰保留時間與對照品峰保留時間一致(16.4、18.4分鐘)，而陰性樣品無干擾，各峰與鄰近峰達到基線分離，分離度良好(R＞1.5)，見圖1。

圖1　對照品、供試品及陰性樣品色譜圖

2.7線性范圍分別稱取干燥至恒重的龍腦和異龍腦對照品7.05、4.71mg，精密稱定，置10mL容量瓶中，加環己烷溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備溶液。精密吸取對照品貯備溶液4.0、2.0、1.5、1.0、0.5、0.25mL，分別置10mL容量瓶中，精密加入內標溶液1mL(濃度為4.012mg/mL)，加環己烷至刻度，搖勻。分別精密吸取上述對照品溶液各1μL，依次注入氣相色譜儀中，按“2.1”項下色譜條件測定。以對照品濃度與內標溶液濃度之比(X)為橫坐標，對照品峰面積與內標峰面積之比(Y）為縱坐標進行線性回歸，得出龍腦回歸方程為：Y=3.126 5X+0.012 4，r=0.999 9(n=6)，異龍腦回歸方程為：Y=2.871 5X-0.010 6，r=0.999 9(n=6)。結果表明，龍腦和異龍腦分別在17.6～282.0μg/mL 和11.8～188.4μg/mL濃度范圍內呈良好的線性關系。

2.8精密度實驗同一供試品溶液，連續進樣6次，1μL/次。測得龍腦和異龍腦含量的RSD分別為0.67%、1.05%，表明該方法精密度良好。

2.9穩定性實驗同一供試品溶液，分別于0、3、6、9、12、18、24小時各進樣1μL，測得龍腦和異龍腦含量的RSD分別為1.02%、1.45%，表明供試品溶液在24小時內穩定。

2.10重復性實驗取同一批號辛芷滴鼻液(批號：20150316)6份，分別按“2.4”項下供試品溶液的制備方法制備；精密吸取上述溶液各1μL，注入氣相色譜儀，依法測定；測得供試品中龍腦含量平均值為3.54 mg/mL (RSD=0.66%)，異龍腦含量平均值為2.34mg/mL(RSD=1.12%)，結果表明該方法的重復性較好。

2.11準確度實驗以加樣回收率考察準確度。精密量取已知含量的辛芷滴鼻液(批號：20150316)9份，每份2mL，分別置于50mL具塞錐形瓶中，分為3組，每組3份。精密量取“2.7”項下對照品貯備溶液8.0、10.0、12.0mL各3份，用氮氣吹干儀吹干后分別加入上述3組辛芷滴鼻液樣品中，使得低、中、高濃度對照品加入量與所取供試品待測定成分量之比控制在0.8∶1，1∶1，1.2∶1左右［5］，按“2.4”項下供試品溶液的制備方法操作測定，計算加樣回收率，結果見表1—2。

表1　龍腦加樣回收率實驗結果

表2　異龍腦加樣回收率實驗結果

2.12樣品測定取3批辛芷滴鼻液(批號：20150316、20150317、20150318)，按上述含量測定方法測定龍腦和異龍腦含量，結果見表3。

表3　樣品的含量測定結果　m g/m L

3　討論

3.1提取方法的選擇由于本品為脂溶性基質，無水乙醇不能將基質分散，導致測定成分無法溶解出，故在無水乙醇溶液中未能檢測出龍腦和異龍腦。在實驗設計時對提取溶劑環己烷和乙酸乙酯進行了對比，發現環己烷的提取效果明顯優于乙酸乙酯，故選擇環己烷作為提取溶劑。實驗發現，超聲處理后，若采用濾過的方式，則由于基質附在濾紙上導致速度極慢。鑒于龍腦和異龍腦的揮發性，故采用冷凍離心的方式比較方便。

3.2色譜柱及進樣量的選擇考察了極性柱(DB-WAX)的不同固定液膜厚度、不同內徑與弱極性柱(DB-17)對樣品測定的影響。結果發現弱極性柱(DB-17)在相同柱溫條件下色譜峰分離效果欠佳，而極性柱(DB-WAX)的色譜峰峰形良好，分離也能達到要求。故選擇極性柱DB-WAX(30m×0.53mm，1.0μm)作為測定用色譜柱。由于本品為油性基質，過多注入氣相色譜儀會造成儀器的污染，故選擇進樣量為1μL，分流比為10∶1。

3.3內標物的選擇水楊酸甲酯和萘兩種內標物對樣品中龍腦和異龍腦峰均無干擾，但考慮到萘具有致畸、致癌、致突變作用，故選用水楊酸甲酯作為內標物。

本實驗分別對冰片中2種主要成分進行了分析，結果表明本方法簡便、準確、靈敏度高、重復性好，可作為辛芷滴鼻液的質量控制方法。

［1］ 王萍，劉光斌，代得銀.辛芷滴鼻液對慢性鼻-鼻竇炎患者的療效觀察［J］.航空航天醫學雜志，2015，26（3）：267-269.

［2］ 江光池，楊勝華，馮旭軍.龍腦和異龍腦的抗炎作用［J］.華西藥學雜志，1990，5（3）：190-191.

［3］ 劉莉莉，秦建平，楊素德，等.GC法測定痛寧凝膠中冰片和薄荷腦的含量［J］.中國藥科大學學報，2014，45（1）：76-78.

［4］ 朱靜，賈曉斌，鄭智音，等.氣相色譜法測定透骨靈橡膠膏中樟腦、冰片和薄荷腦的含量［J］.中國醫院藥學雜志，2012，32（11）：831-833.

［5］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：四部［M］.北京：中國醫藥科技出版社，2015：375-376.

Determ ination ofBorneoland Isoborneol in XinZhi NasalD ropsby GasChrom atography

WEILi1，LIU Guangbin2△
1 Suzhou District Center for Disease Control and Prevention，Jiuquan 735000，China；2 Jiugang Hospital

Objective：To establish content determ ination method of borneol and isoborneol in XinZhi nasal drops.Methods：Gas chromatography was adopted to detectDB-WAX chromatographic column （30m×0.53mm，1.0μm），carrier gaswas nitrogen，split ratio 10：1，column temperature 140℃，inlet temperature 180℃and detector temperature 200℃.Results：Borneoland isoborneolshowed better linear relationship in the rangesbetween 17.6 and 282.0，11.8 and 188.4μg/m L（r=0.999 9，r=0.999 9，n=6）；average recovery rateswere 98.91%and 99.45%respectively（RSD=1.36%，1.53%，n=9）.Conclusion：Themethod，simple，accurate，high sensitivity and good reproducible，could be used forquality controlof XinZhi nasaldrops.

XinZhi nasaldrops；gaschromatography；borneol；isoborneol；contentdeterm ination

R284.1

A

1004-6852（2016）07-0031-03

2016-02-28

魏莉（1973—），女，主管藥師。研究方向：醫院制劑。

劉光斌（1970—），男，主任藥師。研究方向：醫院制劑。