黏菌素藥敏試驗綜述

黏菌素藥敏試驗綜述

由于黏菌素的聚陽離子特性導致其對有機和無機材料都有不同程度的黏附性，因而在藥敏試驗過程中游離黏菌素濃度減低。吐溫-80（P-80）是一種應用于微量板的表面活性劑，能夠影響游離的黏菌素濃度從而降低黏菌素的MIC值。

本研究評估不同微量板及添加吐溫-80對測定黏菌素MIC的影響。受試菌株共146株，包括56株銅綠假單胞菌、 29株不動桿菌屬細菌和61株腸桿菌科細菌。MIC測定采用兩種聚苯乙烯的96孔微量板（MTTs），一種是未包被的V型底MTTs （NMTTs；costar 3896； Corning， NY， USA）， 另一種是經過包被用于組織培養的U型底MTTs （TCMTTs； costar 3799； Corning）。藥敏方法采用CLSI推薦的肉湯稀釋法，黏菌素為其硫酸鹽，肉湯中接種后菌液濃度為5×105CFU/mL，添加吐溫-80后終濃度為0.002%，所有試驗均進行3次，質控菌株為銅綠假單胞菌ATCC 27853，質控結果均在CLSI列出的參考范圍中。

表1　黏菌素對146株臨床分離株的MIC值的分布

表1中列出了兩種微量板添加和不加吐溫-80所得MIC結果，取幾何平均值后進行統計分析，未包被的NMTTs測得的MIC（0.54±0.58） mg/L較包被過的TCMTTs測得的MIC（2.84±1.93）mg/L明顯偏低，差異有統計學意義（P＜0.000 1；95%CI為-2.5～-2.1）。TCMTTs內表面帶負電荷，會吸附黏菌素，使得游離的黏菌素濃度降低，從而導致測得的MIC比使用NMTTs時高5.3倍，對銅綠假單胞菌、腸桿菌科細菌、鮑曼不動桿菌的MIC值分別各升高3.2、5.4和9.4倍。添加吐溫-80后NMTTs所測得MIC（0.09±0.09 mg/L）降低，差異有統計學意義（P＜0.000 1；95%CI為0.4～0.5）。添加吐溫-80后TCMTTs所測得MIC （2.3±1.5）mg/L降低了1.24倍，差異也有統計學意義（P＜0.001；95% CI為 -0.31～-0.75）。加吐溫-80后TCMTTs比NMTTs所測得的MIC高出25.6倍，未加吐溫-80前僅增加5倍，加吐溫-80后兩者差異更為顯著，并具有統計學意義（P ＜0.000 1；95% CI為-2.35～-2.1）。

由此可見，黏菌素的MIC受微量板特性的影響很大，添加吐溫-80也可以顯著降低各種微量板所測得的MIC。 最近一項研究使用微量稀釋法、E試驗法、瓊脂稀釋法測定黏菌素對50株多重耐藥革蘭陰性桿菌的MIC，結果發現添加吐溫-80使得MIC值變異很大。當前在細菌耐藥性越來越嚴峻的形勢下，黏菌素勢必會更廣泛地被應用于臨床?？梢灶A見其耐藥性也會隨之上升?；仡欚ぞ氐腗IC測定方法很有必要。

ALBUR M， NOEL A， BOWKER K， et al. Colistin susceptibility testing： time for a review. J Antimicrob Chemother， 2014，69（5）：1432-1434.

楊 洋摘譯 朱德妹審校

Colistin susceptibility testing: time for a review

2015-04-29