血清抗CCP抗體和抗AKA抗體聯合檢測對類風濕關節炎的診斷價值

陶鵬輝

(河南省信陽市中心醫院檢驗科　464000)

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血清抗CCP抗體和抗AKA抗體聯合檢測對類風濕關節炎的診斷價值

陶鵬輝

(河南省信陽市中心醫院檢驗科464000)

目的探討抗環瓜氨酸肽抗體(抗CCP抗體)、抗角蛋白抗體(抗AKA抗體)檢測對類風濕關節炎(RA)診斷的敏感度和特異性，以及二者聯合檢測在RA診斷中的應用價值。方法分別采用化學發光微粒子免疫檢測法、間接免疫熒光法檢測抗CCP抗體、抗AKA抗體，共檢測80例RA患者，40例其他自身免疫性疾病患者和30例健康體檢者。結果RA組抗CCP抗體和抗AKA抗體的陽性率明顯高于非RA組和對照組，差異具有統計學意義(P<0.05)。單獨檢測抗CCP抗體的靈敏度為73.8%高于抗AKA抗體(41.3%),特異性為86.2%低于抗AKA抗體(95.7%),二者聯合檢測時敏感度和特異性均有所增高。結論抗CCP抗體對RA患者有很高的敏感度和特異性,并且與抗AKA抗體聯合檢測對于RA的臨床診斷和預后判斷具有很高的臨床應用價值。

類風濕關節炎；抗環瓜氨酸肽抗體；抗角蛋白抗體；間接免疫熒光法

類風濕關節炎(RA)是一種自身免疫性疾病，我國患病率為0.41%[1]。其特征是以手和足小關節為主的多關節、對稱性、侵襲性關節炎癥，患者最終出現不可逆的骨關節破壞而導致關節畸變和喪失勞動力[2]。本病多為一種反復發作性疾病，致殘率較高，預后不良，目前還沒有很好的根治方法。目前國內對于RA的血清學診斷指標僅限于類風濕因子(RF)的檢測，RF的敏感度雖然相對較高，但其特異性較低，對于RA早期診斷效果不夠理想。近年文獻報道一組以瓜氨酸化的聚絲蛋白或前聚絲蛋白衍生物為底物的抗體對RA診斷有較高特異性，抗環瓜氨酸肽抗體(抗CCP抗體)、抗角蛋白抗體(抗AKA抗體)在診斷RA中具有關鍵作用。本研究通過回顧性分析抗CCP抗體及抗AKA抗體在RA診斷中的敏感度和特異性，并進一步分析比較，以探討兩者在RA診斷中的臨床應用價值。

1　資料與方法

1.1一般資料選取本院2014年1～12月風濕免疫科門診及住院RA患者80例，符合2010年美國風濕病協會(ACR)和歐洲抗風濕病聯盟(EULAR)重新修訂的RA診斷標準。非RA組：其他自身免疫病組為同期風濕免疫科門診及住院患者40例，包括系統性紅斑狼瘡、混合性結締組織病等患者，均符合國內或國際相應的診斷標準。健康對照組：同期在本院體檢中心健康體檢者30例。

1.2方法采集所有受試者晨起空腹靜脈血3 mL,以4 000 r/min離心5 min后分離血清，4 h內需要完成檢測；抗CCP抗體檢測采用羅氏公司Cobas e 601免疫化學發光儀及配套試劑。抗CCP抗體臨界值為17 U/mL。抗AKA抗體檢測采用間接免疫熒光法，試劑由德國EUROIMMUN 醫學試驗診斷有限公司提供。血清做1∶10稀釋，抗AKA抗體與大鼠食管冰凍切片反應，形成圍繞角質層細胞的線狀、板層狀的典型熒光，熒光模式與陽性對照所顯示的一致即判為陽性。

1.3統計學處理數據經過SPSS17.0統計軟件處理，計數數據以率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2　結　　果

2.1各指標檢測的陽性率比較見表1。

表1　　各指標檢測的陽性率比較[n(%)]

注：與其他兩組比較，*P<0.05。

2.2各指標單項檢測與聯合檢診斷價值比較見表2。

表2　　各指標單項檢測與聯合檢診斷價值比較(%)

3　討　　論

RA是一種病因尚未闡明的由自身免疫系統功能障礙引起免疫系統攻擊關節的長期慢性炎癥，女性好發，發病率為男性的2～3倍，可發生于任何年齡階段，高發年齡層為40～60歲。主要臨床表現為受累關節腫脹、疼痛、功能下降、病變持續反復發作的過程。RA疾病表現在關節部位，問題出在免疫系統，致病根源是在免疫系統的T淋巴細胞，表現主要為Th1/Th2的失衡，導致免疫功能的紊亂，進而產生慢性無菌性滑膜炎癥，隨著無菌性炎癥刺激骨質和增生增厚則會出現關節受累，以致累及到心臟、呼吸系統、神經系統以及腎臟，甚至致殘致死。RA是一種以慢性進行性關節病變為主的全身性免疫性疾病，也是“不死的癌癥”風濕病中最常見的一種類型，癥狀主要為關節疼痛、腫脹、活動困難及發僵，長期不愈的晚期癥狀則為關節畸形和強直，或導致終身殘疾。一旦出現早期癥狀，應盡早接受專業化治療，并定期做相關檢測，以便及時確診和了解病情進展，調整用藥，延緩病情進展，改善關節功能，提高患者的生存質量。大多數RA的病情可得到很好的控制，甚至完全緩解。研究發現，根據RA發病早期的臨床特點可大致判斷其預后，某些臨床及實驗室指標對病情估計及指導用藥很有意義。

在2000年，Schellekens 等[3]將1條由19個氨基酸殘基組成的瓜氨酸肽鏈中的2個絲氨酸替換為半胱氨酸，形成與β-轉角具有相似結構的二硫健，合成環瓜氨酸肽(CCP)，并建立以人工合成CCP為抗原的檢測方法。抗CCP抗體不僅是RA早期診斷項目，而且是鑒別侵蝕性或者非侵蝕性RA的靈敏指標，抗CCP抗體陽性患者一般出現或容易演變成較陰性者更嚴重的關節骨質損壞。抗CCP抗體與RA的骨侵蝕、關節功能障礙密切相關[4]。還有臨床研究顯示，抗CCP抗體可以作為評價疾病活動度及預示骨質侵蝕的指標[5-6]。本研究表明抗CCP抗體在RA組的陽性率明顯高于非RA組和對照組，在RA診斷中敏感性為73.8%,而特異性為86.2%,在非RA組的陽性檢出率只有5%，健康者中沒有查出,說明抗CCP抗體是診斷RA特異性較高的血清學指標。2010年美國風濕病協會(ACR)和歐洲抗風濕病聯盟(EULAR)重新修訂了診斷標準中，把抗CCP抗體納入RA血清學診斷標準[7]。抗CCP抗體的臨床意義不僅是早期RA的預測指標，其出現往往早于RA典型臨床癥狀,也是RA的臨床監測指標，用于判斷RA的活動情況，更是RA的預后指標，抗CCP抗體陽性的患者其影像學破壞的程度較抗體陰性者嚴重。

1979年Young等發現RA患者血清中有一種能與鼠食管角質層反應的抗體，并對RA具有特異性，命名為AKA。1989年Vincent等提出應把AKA更名為抗角質層抗體(抗AKA抗體)更為恰切。由于AKA在疾病臨床癥狀出現之前就可以在血清中被檢測到，提示了AKA在RA進程中扮演者重要的角色[8]。因此,該抗體的檢測可對RF陰性的RA患者提供檢查指標。抗AKA抗體與RA病情嚴重性和活動性有關,在RA早期甚至臨床癥狀出來前即可檢出,所以，抗AKA抗體檢測對RA早期診斷和預后判斷很有意義。本試驗發現抗AKA抗體雖然敏感度不高(41.3%)，但具有較高的特異度(95.7%)，抗AKA抗體是RA較理想的臨床實驗項目。由于RA的發病機制至今不明，臨床診斷方法采用多項指標聯合測定。本研究發現抗CCP抗體與抗AKA抗體聯合測定，不僅提高了敏感度，特異度也提高到100%，能避免單項檢測的局限性，減少漏診，可當做RA確診的重要依據，特別適用于RF陰性或癥狀不明顯的RA。在檢測中，發現對于疑似早期RA患者進行抗CCP抗體與抗AKA抗體聯合檢測，對RA的早期診斷、病情監測、療效觀察和預后判斷等均有十分重要的臨床意義。

[1]富炳罡．抗CCP抗體和RF聯合檢測對類風濕關節炎診斷的價值[J]．中國實驗診斷學，2010，14(6)：910-911．

[2] Scott DL，Huizinga TW．Rheumatoid arthritis[J]．Lancet，2010，376(9)：1094-1108．

[3]Schellekens GA，Visser H，De Jong BA,et al.The diagnostic properties of rheumatoid arthritis antibodies recognizing a cyclic citrullinated peptide[J].Arthritis Rheum，2000，28(1)：155-163．

[4]謝其冰，尹耕．三種自身抗體在類風濕關節炎診斷及關節侵蝕預測中的價值[J]．四川大學學報(醫學版)，2009，40(3)：508-512．

[5]牛紅青，李小峰，張莉蕓，等．抗環瓜氨酸抗體與類風濕關節炎疾病活動及骨侵蝕關系的研究[J]．中華風濕病學雜志，2008，12(9)：603-604．

[6] 鄒旭美，陸焱，胡志剛．抗-CCP診斷類風濕關節炎的臨床應用分析[J]．國際檢驗醫學雜志，2011，32(1)：120-121．

[7]顏海希,蔡林靈,金高兵,等.抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體檢測對類風濕性關節炎診斷的Meta分析[J].中華檢驗醫學雜志,2014,37(8):603-607.

[8]Berthelot JM，Maugam Y，Castagne A，et al．Antiperinuclear factors are present in polyarthritis before ACR criteria for rheumatoid arthritis are fulfilled[J].Ann Rheum Dis，1997，56(1)：123-125．

Clinical application value of combination detection of serum anti-CCP antibody and anti-AKA antibody for rheumatoid arthritis

TAOPenghui

(DepartmentofClinicalLaboratory,XinyangMunicipalCentralHospital,Xinyang,Henan464000,China)

ObjectiveTo explore the sensitivity and specificity of anti-cyclic citrullinated peptide antibody (anti-CCP antibody) and anti-keratin antibody (anti-AKA antibody) detection for diagnosing rheumatoid arthritis (RA) and the application value of their combination detection in the diagnosis and treatment of RA.MethodsThe chemiluminescent microparticle immunoassay and indirect immunofluorescence analysis were adopted to detect anti-CCP antibody and anti-AKA antibody in 80 cases of RA,40 cases of other auto-immune diseases(AID) and 30 people undergoing the physical examination.ResultsThe positive rates of anti-CCP antibody and anti-AKA antibody in the RA group were significantly higher than those in the non-RA group and control group,the differences were statistically significant (P<0.05).The sensitivity of single anti-CCP antibody detection in the RA group was 73.8%,which was higher than 41.3% of anti-AKA antibody,while the specificity of single anti-CCP antibody detection was 86.2%,which was lower than 95.7% of anti-AKA antibody detection.In their combined detection,the sensitivity and specificity were increased.ConclusionThe anti-CCP antibody detection has higher sensitivity and specificity for diagnosing RA.Its combined detection with anti-AKA antibody can avoid the missed diagnosis of atypical clinical early stage RA,which has a higher clinical value in the diagnosis and prognosis of RA.

rheumatoid arthritis;anti-cyclic citrullinated peptide antibody;anti-keratin antibody;indirect immunofluorescence

陶鵬輝，男，副主任技師，主要從事臨床免疫、生化與微生物學檢驗與研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.16.031

A

1673-4130(2016)16-2285-02

2015-12-10)