戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液對蘋果枝干輪紋病的防治效果

李蘭進,　國立耘,　王蒙蒙

(中國農業大學植物保護學院, 北京　100193)

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戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液對蘋果枝干輪紋病的防治效果

李蘭進,國立耘*,王蒙蒙

(中國農業大學植物保護學院, 北京100193)

近年,在矮砧密植蘋果園發現苗木栽植后幼樹主干上的枝干輪紋病發生嚴重,急需有效的防治方法。針對生產中的需求,本研究對幼樹枝干輪紋病的防治方法進行了探索,結果顯示:用乳膠液配制的戊唑·多菌靈·乙膦鋁混合劑對枝干輪紋病防治效果顯著高于同種藥劑的水溶液,對剪鋸口枝干輪紋病防治效果可達63.7%～100%,是藥劑水溶液防效的2～3倍;生長季施用2次,對枝干輪紋病病斑的鏟除率為45.2%,是藥劑水溶液防效的9.6倍以上。結果表明,戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液對枝干輪紋病防治效果顯著,可以用于苗木剪鋸口的防護,以及新建果園中幼樹枝干輪紋病的治療。研究結果為生產中幼樹枝干輪紋病的防治提供了有效的方法。

蘋果枝干輪紋病;殺菌劑;白乳膠

蘋果輪紋病,又名粗皮病,在我國各蘋果產區均有發生,主要危害蘋果果實和枝干,引起蘋果果實腐爛,枝干形成瘤狀突起、粗皮、潰瘍和干腐等癥狀,是影響蘋果品質和產量的重要病害之一[1]。唐唯等的研究已證明蘋果輪紋病與蘋果干腐病是同一種病害的不同表現,與在歐美等地發生的蘋果白腐病(apple white rot)也是同一種病害[2]。近年來,隨著果實套袋技術的普遍應用,蘋果果實輪紋病明顯減輕,但枝干輪紋病發生嚴重[3],該病在山東和河南兩省的發病率高達100%[4]。對于蘋果枝干輪紋病的防治,通常建議采取栽培措施和藥劑保護相結合的策略,在加強栽培管理、增強樹勢的基礎上,進行化學藥劑防治[5-6]。

近年來,蘋果矮化栽培模式在我國各地開始推廣。但是在矮砧密植園的建設中,幼樹上的枝干輪紋病在各地普遍發生。2013年,李保華等對7 省市16 縣區的23 個蘋果矮砧密植園的進行了調查,結果顯示矮砧密植園中枝干輪紋病的病株率平均高達64.3%。不僅環渤海灣種植區發生嚴重,而且有向黃土高原種植區蔓延的態勢[7]。生產中急需針對幼樹枝干輪紋病的簡便、有效的防治方法。

田間調查發現,輪紋病菌易從嫁接口處侵入,嫁接剪口處的殘樁被侵染后產生干腐癥狀病斑,在干旱缺水時干腐病斑容易蔓延,造成地上部萎蔫至枯死[8],同時,苗木嫁接口上的干腐病斑在條件適宜時可以釋放出大量孢子,成為后續的侵染源[9],使部分苗木的主干在栽植后不久就已出現輪紋病瘤。趙旭等發現春季修剪形成的剪口在2個月內對輪紋病菌都較為敏感,夏秋季節形成的剪口在2周內對輪紋病菌感病性強,2周后抗病性逐漸增強[8]。另外,在春季缺水的條件下,幼樹皮層潛伏侵染的病菌擴展引起枝條皮層枯死,引起干腐。

本研究試圖通過在常用殺菌劑中添加黏稠劑提高對枝條剪鋸口的保護效果和對蘋果枝干輪紋病病斑或病瘤的治療效果，現將結果報道如下。

1　材料與方法

1.1材料

菌種:試驗所用菌株ZY7為單孢菌株,2007年從山東省招遠市‘富士’蘋果枝干輪紋病病瘤上分離獲得,鑒定為Botryosphaeriadothidea,保存在中國農業大學植物病理學真菌實驗室。

供試植株:中國農業大學上莊試驗站果園的7年生‘富士’蘋果喬化植株,用于枝干剪鋸口藥劑預防試驗;北京市昌平區果樹研究所的9年生‘富士’矮化植株和陜西千陽縣果園3年生‘富士’矮化植株,用于枝干輪紋病的治療試驗。

藥劑: 30%戊唑·多菌靈懸浮劑,江蘇龍燈化學有限公司,800倍液;60%唑醚·代森聯水分散粒劑,德國巴斯夫公司,1 000倍液;80%三乙膦酸鋁水分散粒劑,浙江世佳科技有限公司,200倍液;聚醋酸乙烯酯乳劑,三棵樹涂料股份有限公司,1.2倍液,按表1所示配制混配藥劑。

表1　混配劑中各藥劑的濃度Table 1　Treatments and concentration used in management trial

1.2方法

1.2.1藥劑對剪鋸口的保護效果

2014年,在上莊試驗站果園,選取7年生‘富士’蘋果喬化植株進行試驗,共設戊唑·多菌靈·乙膦鋁水溶液、戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液、唑醚·代森聯水溶液、唑醚·代森聯乳膠液、乳膠液、空白對照,6個處理。選用一年生枝條,在距基部約25 cm處剪斷,用PVC膠帶對新鮮剪口標記。在產生剪口1 d后,分別用上述不同的藥劑對剪口進行蘸藥保護。具體做法為:將剪口浸入藥液中1 cm左右,持續2 s。施藥2 d后,用ZY7菌株的菌餅接種已涂藥保護的剪口,脫脂棉保濕,并用封口膜包扎,接種3 d后解去封口膜和保濕棉球。試驗重復2次,分別于2014年5月和6月各1次,每次重復設3個小區,采用隨機區組設計,每個小區6個處理,每個處理8個剪鋸口。

2014年10月、11月分別剪取帶有2014年5月、6月處理的剪鋸口的枝段,長度6～8 cm,豎直插入保鮮盒中已滅菌的濕潤沙土里,處理一端枝條朝上用保鮮膜覆蓋以保持盒內的濕度,26℃溫箱中培養,及時補水保濕。一周后,檢查剪口端是否出現干腐病斑,出現干腐病癥狀的剪鋸口計作已被侵染的剪鋸口。對無法確定是否被侵染的剪鋸口枝段進行病原分離:從剪口處剪取3個小塊,表面消毒后進行組織分離,根據所形成菌落,判定剪鋸口內是否帶有輪紋病菌,若帶菌則認為該剪鋸口已被侵染。

根據剪鋸口干腐癥狀檢測與分離培養結果,計算每個小區中每處理的剪鋸口侵染率和各處理的防治效果:

剪鋸口侵染率(%)=(被侵染的剪鋸口數/接種剪鋸口數)×100;

平均防效(%)=(1-處理剪鋸口平均侵染率/空白對照剪鋸口平均侵染率)×100。

對數值進行反正弦轉換,使其服從正態分布。通過方差分析來評價不同處理間的差異顯著性,P≤0.05認為有顯著性差異。方差分析在SPSS 17.0完成。

1.2.2重刮皮后涂藥的鏟除效果

2014年6月,在昌平果樹所選擇9年生‘富士’矮化植株上發病程度一致且較重的主干,對病斑進行重刮皮后,涂刷不同的藥劑戊唑·多菌靈·乙膦鋁水溶液、戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液、唑醚·代森聯水溶液、唑醚·代森聯乳膠液和空白對照,共5個處理(表1)。約2個月后再次涂刷相應的藥劑,每隔2個月觀察記錄1次治療效果。試驗在同一果園的不同地塊重復2次(2014年6月-2015年3月),每次重復設3個小區,采用隨機區組設計,每個小區內設5個處理,每個處理6個病斑。

2015年3月底,采用病原分離鑒定法,對昌平果樹所的2次試驗刮治的病斑治療效果進行評估統計。由于試驗所在地為生產果園,為了避免春季大面積取樣造成樹體嚴重損傷而誘發蘋果腐爛病,只選取戊唑·多菌靈·乙膦鋁水溶液,戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液,空白對照3個試驗處理的病斑進行病原分離。每個處理隨機選擇3個病斑,在病斑標記區域內取樣5份,四周和中心位置各取1塊樣品,每個樣品面積為1～2 cm2(包括韌皮部和外表皮),每個病斑樣品裝在一個小袋內,帶回實驗室4℃保存。

病原的分離與鑒定:切取病斑韌皮部2～3 mm見方的組織,表面消毒后進行分離培養、純化,根據菌落和孢子形態對分離出的病菌進行鑒定,若能分離出輪紋病菌,則認為該樣品帶菌。

根據分離結果,計算每個小區各處理病斑的帶菌率,進行方差分析，并計算各處理的病菌鏟除效果。

病斑帶菌率(%)=(分離到輪紋菌的樣品數/樣品總數)×100;

輪紋病菌的鏟除率(%)=(1-處理病斑平均帶菌率/空白對照病斑平均帶菌率)×100。

1.2.3刮破病瘤后涂藥的治療效果

2014年7月,在陜西千陽縣果園內選擇發病程度一致且主干發病較重的3年生‘富士’矮化幼樹,刮破主干表面病瘤后,涂刷不同的藥劑處理，包括戊唑·多菌靈·乙膦鋁水溶液、戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液、唑醚·代森聯水溶液、唑醚·代森聯乳膠液、乳膠液和清水(表1)。約2個月后再次涂刷相應的藥劑處理,每隔2個月觀察記錄1次治療效果。試驗在不同地塊重復2次,每次試驗設3個小區,采用隨機區組設計,每個小區設6個處理,每個處理6株發病幼樹。

2015年5月初,對兩次試驗的病斑進行觀察并照相。由于試驗果園屬于企業生產果園,該果園樹齡只有3年,樹干較細,不適宜采集樹皮樣品進行病原分離,因此,采用觀察估算病斑愈合面積的方法,對樹體表面已刮皮涂藥病斑的愈合面積進行估計,記錄下已愈合(以內層長出光滑新皮作為判斷愈合的標準)的面積占病斑刮皮涂藥面積的百分比,計算病斑治愈率。計算各處理的病斑的平均治愈率,對其進行方差分析。

病斑平均治愈率(%)=∑(小區內單個處理的愈合面積百分比)/處理的重復數×100。

2　結果與分析

2.1藥劑對剪鋸口的保護效果

2014年10月,對上莊試驗站2次試驗的剪鋸口輪紋病(干腐癥狀)的發生情況進行調查統計。在SPSS 17.0中,通過“配對樣本t檢驗”分析,顯示兩次試驗間剪鋸口侵染率檢驗的P值為0.023<0.05,因此拒絕原假設,認為兩次試驗之間差異較大,因而不能將兩次數據合并,需單獨進行分析。結果發現,2次試驗的各小區之間無顯著性差異。第1次試驗中,5種藥劑處理的剪鋸口帶菌率均顯著低于空白對照,其中,戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液處理的侵染率最低,防效最高，達100%(表2);第2次試驗中,除戊唑·多菌靈·乙膦鋁水溶液、唑醚·代森聯水溶液和乳膠液外,其他2種藥劑處理(戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液和唑醚·代森聯乳膠液)的剪鋸口侵染率均顯著低于空白對照,其中,戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液處理的侵染率最低,防效高達63.7%(表2)。

表2　蘋果枝干剪鋸口涂藥對輪紋病菌侵染的預防效果1)Table 2　Efficacy of several fungicide mixtures on preventing the apple ring rot happening on pruning wounds

1) 表中數據為平均值±標準誤,同列數據后的小寫字母表示在α=0.05水平下差異的顯著性。下面表格與此表示方法相同。

Data in table are mean±SE, lowercase letters in the same column mean the significance of difference at the 0.05 level. The representing method in subsequent tables are same as this.

2.2重刮皮后藥劑對蘋果輪紋病的治療效果

2015年3月,對成齡樹上進行的兩次試驗結果進行了調查,發現不同處理的病斑表面呈現出不同的特征:涂刷戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液的病斑表面呈現出良好的愈合效果,粗皮開裂并部分脫落,內層長出光滑健康新皮(圖1b);涂刷戊唑·多菌靈·乙膦鋁水溶液和唑醚·代森聯水溶液的病斑,表面原有粗皮部分縱向開裂,但沒有脫落(圖1a,c);涂刷清水的空白對照表面,粗皮開裂,但內層長出的新皮表面粗糙發黑,疑似為新的輪紋病菌侵染所致(圖1e)。

圖1　殺菌劑對蘋果枝干輪紋病的治療效果(昌平果樹所刷藥處理9個月后)Fig.1　Treatment effect of fungicides on Botryosphaeria dothidea (9 months post treatment in Changping, Beijing)

對病斑進行了取樣和病原菌的分離鑒定。在SPSS 17.0中,通過“配對樣本t檢驗”分析,顯示兩次試驗間病斑侵染率檢驗的P值為0.131>0.05,因此接受原假設,認為兩次試驗之間差異不顯著,因而可以將兩次數據進行合并分析。結果顯示,戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液處理的病斑侵染率顯著低于戊唑·多菌靈·乙膦鋁水溶液和空白對照的病斑侵染率,戊唑·多菌靈·乙膦鋁水溶液與空白對照之間差異不顯著(表3)。結果表明戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液涂刷病斑2次,對輪紋病菌有明顯的鏟除效果(表3)。

表3　幾種殺菌劑混配液對周皮內輪紋病菌的鏟除效果Table 3　Efficacy of several fungicide mixtures on eradicatingBotryosphaeria dothidea in periderm of apple trunk

2.3試驗藥劑對陜西千陽縣果園蘋果幼樹枝干輪紋病的治療效果

2015年5月初,對陜西千陽縣基地的兩次試驗的病樹進行觀察,各處理的癥狀見圖2a～f。涂刷戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液的病斑呈現外層病斑表皮脫落,內層長出光滑健康新皮,愈合率最高(如圖2b),而涂刷唑醚·代森聯乳膠液的病斑表皮雖然也有部分脫落,但內層長出的新皮仍然粗糙,呈現出枝干輪紋病發病癥狀(如圖2d),涂刷加乳膠液藥劑的病斑粗皮開裂,但并不脫落(如圖2e),其他處理的效果不明顯(如圖2a,c,f)。

圖2　殺菌劑對蘋果枝干輪紋病的治療效果(陜西千陽縣基地刷藥處理10個月后)Fig.2　Treatment effect of fungicides on ring rot on apple branches (10 months post treatment in Qianyang County, Shaanxi Province)

根據目測估算的病斑愈合面積計算各處理幼樹的病斑治愈率并進行了統計分析。在SPSS 17.0中,通過“配對樣本t檢驗”分析,顯示兩次試驗間病斑治愈率檢驗的P值為1.399>0.05,因此接受原假設,認為兩次試驗之間差異不大,因而可以將兩次數據進行合并分析。結果顯示,區組之間的差異均不顯著,戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液的治療效果最優,顯著優于其他藥劑處理(表4)。

表4　幾種殺菌劑混配液對幼樹枝干輪紋病的治療效果Table 4　Control effect of several fungicide mixtures on ring rot on trunks of young apple trees

3　討論

田間試驗結果顯示,在所測試的幾種處理中,戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液對枝條上剪鋸口的保護作用和對枝干輪紋病的治療作用顯著優于同種藥劑的水溶液,能有效保護剪鋸口，可用于枝干輪紋病的預防與治療。試驗中所用的藥劑都是在前期研究中篩選出的對輪紋病有較好防效的藥劑。蘋果輪紋病的分生孢子和子囊孢子的釋放和傳播都需要雨水,我國大部分主產區夏季高溫多雨給輪紋病的發生提供了適合的條件,因此延長藥劑在枝干上持續時間是防治枝干輪紋病的關鍵。白乳膠在日常生活中作為黏合劑使用,與藥劑混合后涂刷在樹體上,能夠形成一層薄膜附著在樹體表面,增加了藥劑的黏合程度,使得藥劑很難被雨水沖刷掉,延長了持效期,是戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液防效顯著高于其水溶液的主要原因。

在測試藥劑對剪鋸口保護效果試驗中,相同藥劑處理下,第1次試驗剪鋸口侵染率普遍低于第2次試驗,分析可能原因如下:(1)第1次試驗時,由于缺乏經驗,枝條接種方法的掌握不熟練,導致部分枝條接種不成功;(2)兩次試驗的接種時間前后相差1個月,第2次接種時,氣溫較高,更適合枝干輪紋病菌侵染和擴展,可能是導致第2次試驗剪鋸口帶菌率高于第1次帶菌率的主要原因。

試驗結果也顯示,對于樹齡較大的蘋果樹枝干輪紋病斑,刮除老翹皮后涂刷戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液,能達到很好的治療效果。考慮到刮除老翹皮和涂刷樹干的勞動強度大,今后可考慮使用電動刮皮刀,和進一步優化配比使用電動噴涂機進行操作。此外,由于不同廠家生產的白乳膠也可能對藥效有影響。后期還需要對不同品牌的白乳膠和不同黏著劑進行測試,篩選更加環保和高效的藥劑負載劑。

[1]高艷敏, 沈永波, 王寶申, 等. 遼寧省蘋果枝干輪紋病和粗皮病發生情況調查[J]. 中國果樹, 2006(5):50-53.

[2]Tang W, Ding Z, Zhou Z Q, et al. Phylogenetic and pathogenic analyses show that the causal agent of apple ring rot in China isBotryosphaeriadothidea[J]. Plant Disease, 2012, 96(4): 486-496.

[3]李保華, 王彩霞, 董向麗. 我國蘋果主要病害研究進展與病害防治中的問題[J]. 植物保護, 2013, 39(5): 46-54.

[4]國立耘, 李金云, 李保華, 等. 中國蘋果枝干輪紋病發生和防治情況[J]. 植物保護, 2009, 35(4): 120-123.

[5]康玲, 郝紅梅, 楊振英, 等. 蘋果輪紋病研究進展[J]. 中國農學通報, 2009, 25(9): 188-191.

[6]王敬尊, 梁俊香. 蘋果輪紋病發生規律及防治措施[J]. 安徽農業科學, 2009, 35(19): 9040-9041.

[7]曹克強, 國立耘, 李保華. 要高度重視輪紋病的防控[N]. 河北科技報, 2014-04-29(B06).

[8]趙旭, 董向麗, 張振芳, 等. 剪口齡期和水分脅迫對輪紋病菌從剪鋸口侵染的影響[J]. 植物保護, 2014, 40(2): 119-122.

[9]Sutton T B. Production and dispersal of ascospores and conidia byPhysalosporaobtusaandBotryosphaeriadothidaein apple orchards [J]. Phytopathology, 1981, 71(6): 584-589.

(責任編輯：田喆)

Control effect of the mixture of tebuconazole and carbendazim fosetyl-aluminium with latex on ring rot on apple branches

Li Lanjin,Guo Liyun,Wang Mengmeng

(College of Plant Protection, China Agricultural University, Beijing100193, China)

Apple ring rot caused byBotryosphaeriadothideais one of the most important diseases in apple production in China. In recent years, outbreak of this disease on trunk of newly planted apple trees was observed in many places in newly established apple orchards. Therefore, effective control measures for this disease are highly demanded. In this study, we tested the control efficacy of fungicides with or without adding latex on this disease on apple branches in field trials. The results showed that the treatment of mixture containing tebuconazole and carbendazim fosetyl-aluminium with latex had significantly high prevention efficacy on pruning wounds and significantly high eradication efficacy forB.dothidea, which was 2-3 times as high as the treatment of the same fungicide without latex. Results of this study also showed that applying this chemical mixture with latex on diseased trunk yield an average eradication rate of 45.2%， which was 9.6 times as high as the treatment of the same fungicide without the latex. In conclusion, results of this study showed that the chemical mixture of tebuconazole and carbendazim fosetyl-aluminium with latex has good control effect to apple ring rot and it can be used to protect the pruning wounds and to control the ring rot disease on trunk of young trees. This study provides an effective method for controlling ring rot on pruning wounds and on trunk and branches of young apple trees.

ring rot on apple branches;fungicide;latex

2015-07-02

2015-11-07

國家現代農業產業技術體系(CARS-28)

E-mail: ppguo@cau.edu.cn

S 436.611.19

B

10.3969/j.issn.0529-1542.2016.02.046

致謝：感謝現代蘋果產業體系北京昌平綜合試驗站和海升現代蘋果陜西千陽縣示范園區在提供試驗條件方面的幫助。