GLUT4和脂聯素在大鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用

郭威，李松，郭健麗，宋亞邛，孫陽陽，張宏佳黑龍江省齊齊哈爾醫學院附屬醫院消化科，黑龍江齊齊哈爾　161021

GLUT4和脂聯素在大鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用

郭威，李松，郭健麗，宋亞邛，孫陽陽，張宏佳
黑龍江省齊齊哈爾醫學院附屬醫院消化科，黑龍江齊齊哈爾161021

目的 探討GLUT4和脂聯素在大鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用。方法2015年6月—2015年11月選用48只SD大鼠一半雌鼠一半雄鼠，雌鼠雄鼠隨機分為對照組與實驗組均為24只。對照組為正常，實驗組為高脂飲食組。每組又分為3、6、9、12周4組按時間點處死各組大鼠，測定肝組織中GLUT4、血清中的脂聯素、空腹血糖。結果 肝組織中GLUT4、血清中的脂聯素在脂肪性肝病的形成過程中含量不斷減少，肝組織中GLUT4的濃度由對照組（3.65±0.08），3、6、9、12周逐漸降低分別為（3.32±0.07）、（3.13±0.11）、（2.96±0.08）、（2.31±0.19）血清中的脂聯素由對照組（4.22±0.43），3、6、9、12周逐漸降低分別為（4.18±0.26）、（3.90±0.27）、（3.96±0.21）、（4.07±0.24）。而且與肝脂肪變程度呈負相關，血糖呈正相關。結論 實驗組肝組織中GLUT4、血清中的脂聯素相比對照組明顯減少，表明CLUT4與脂聯素在非酒精性脂肪性肝病中有一定作用。

GLUT4；脂聯素；大鼠；非酒精性脂肪性肝病

［Abstract］Objective To investigate the role of GLUT4 and adiponectin in nonalcoholic fatty liver disease.Methods 48 SD rats with half male half female，male female rats were randomly divided into control group and experimental group were 24.Normal control group，the experimental group was high-fat diet group.Each group was divided into 3 weeks，6 weeks，9 weeks，12 Thursday set point in time the rats were sacrificed to measure liver tissue GLUT4，serum adiponectin，fasting blood sugar.Results In liver tissue in GLUT4 and serum adiponectin in fatty liver formation content decreased constantly，concentration of GLUT4 in liver tissue from control group 3.65±0.08，3 weeks，6 weeks，9 weeks and 12 weeks decreased gradually were（3.32±0.07），（0.11±3.13），（2.96±0.08），（2.31±0.19）serum adiponectin comprised the control group（4.22±0.43），3 weeks，6 weeks，9 weeks and 12 weeks decreased gradually （4.18±0.26），（3.90±0.27），（3.96±0.21），（4.07±0.24），respectively.It was negatively correlated with the degree of hepatic steatosis，and the blood glucose was positively correlated.Conclusion The hepatic tissue GLUT4，serum adiponectin was significantly reduced compared to the control group，suggesting that adiponectin CLUT4 and have a role in nonalcoholic fatty liver disease.

［Key words］GLUT4；Adiponectin；Non-alcoholic fatty liver disease；Rats

隨著非酒精性脂肪性肝病的發病率也越來越高，這種疾病對肝臟的損害是慢性的最終導致不可逆性的損害，有研究表明非酒精性脂肪性肝病的發病與GLUT4和脂聯素有關［1-2］。因此在2015年6月—2015 年11月以48只SD大鼠為研究對象制造模型探究GLUT4和脂聯素與非酒精性脂肪性肝病的關系，現報道如下。

1　對象與方法

1.1研究對象

選取6周齡，體重200 g左右健康的SD大鼠48只，來源于同一個廠家，大鼠平均體重在（160±18）g，雌雄各半并將其隨機分為對照組與實驗組，兩組基本情況下P＞0.05，差異無統計學意義。其中對照組24只為正常，實驗組24只為高脂飲食到實驗結束后有嚴重的非酒精性脂肪肝。對照組喂養正常飼料即可。實驗組除食物不同外其它都相同。動物的飼養條件、護理狀況、飼料情況等都符合國際上擬定的動物公約。

1.2研究方法

將對照組與實驗組的24只大鼠隨機分為四組，分別為3、6、9、12周。在對應的時間點將對照組和實驗組的大鼠處死。處死前禁食10 h，處死后觀察大鼠肝臟病變情況，并檢測肝臟中GLUT4的含量、血清脂聯素、空腹血糖［3-4］。

大鼠處死后，一人立即取出大鼠肝臟，觀察脂肪變程度，并進行稱量計算肝指數。在低溫下將大鼠肝臟搗碎離心后測CLUT4的含量。另一人取大鼠空腹靜脈血5 mL放入離心機2000 r/min離心10 min后去取清液。用免疫學方法ELISA測血清中的脂聯素含量。

1.3統計方法

2　結果

在實驗結束前兩組大鼠均未出現死亡。對照組的肝臟質地柔軟、包膜光滑無油膩感，為暗紅色。實驗組大鼠肝臟與第六周出現明顯病變，肝臟表面有黃色改變而且有油膩感。到第12周時肝臟呈檳榔肝，有顆粒外觀見表1、2。

表1　各周監測的肝臟脂肪變面積（±s）

表1　各周監測的肝臟脂肪變面積（±s）

分組　對照組　高脂3周　高脂6周　高脂9周 高脂12周脂變面積015.21±2.9835.62±2.7745.69±3.35 65.12±8.13

對照組沒有脂變面積，而實驗組高脂飲食后出現不同面積的脂變，且P＜0.05，差異有統計學意義。

表2　測量值變化情況（±s）

表2　測量值變化情況（±s）

CLUT4　　空腹血糖　　脂聯素對照組高脂3周高脂6周高脂9周高脂12周3.65±0.08 3.32±0.07 3.13±0.11 2.96±0.08 2.31±0.19 4.96±0.21 5.59±0.25 5.61±0.23 5.63±0.15 5.65±0.21 4.22±0.43 4.18±0.26 4.07±0.24 3.96±0.21 3.90±0.27

隨著肝脂肪變面積的增加血糖值在增高，CLUT4和脂聯素含量在減少。各組P＜0.05，差異有統計學意義。

3　討論

CLUT4是肝臟的主要糖轉運子，將血液中的糖轉運到肝細胞里，加速肝糖原合成［3-5］。血液中葡萄糖含量增加刺激胰島素的分泌，最后造成胰島素抵抗。脂聯素是一種新型分子，它具有抗炎、抗粥樣硬化、增強胰島素敏感性的作用，主要是通過對胰島素受體的作用改進全身胰島素抵抗，加強對糖的利用和極低密度脂蛋白的合成在脂肪變的形成過程中脂聯素逐漸減少這些作用逐漸降低，加速肝臟脂肪變的形成［7-9］。

此實驗用非酒精性脂肪肝的形成過程中測量大鼠的CLUT4和脂聯素來確定這兩種物質與肝脂肪變形成的關系。由實驗結果可知隨著脂肪變程度的增加CLUT4和脂聯素含量在逐步減少，表明這2種物質在肝脂肪變形成過程中有一定作用。鮑秀琦，朱捷，張曉波的類似實驗也有相似的結果，肝組織中GLUT4的濃度由對照組的3.64±0.09逐漸降為12周的2.42± 0.23［10］。其它研究GLUT4和脂聯素在大鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用的實驗也都采取飼養SD大鼠的方法，利用高脂飲食來制造脂肪肝，同時觀察大鼠CLUT4的濃度，實驗具有相似處。而且我們實驗中采用對照組和實驗組同時處死進行對照，減少了一些因素造成實驗誤差，加強了實驗的準確性與真實性。

此實驗是在非酒精性脂肪肝形成過程中由病情的不斷發展來檢測肝臟中CLUT4和血清中脂聯素的濃度變化，可以具體的呈現這兩種物質在非酒精性脂肪性肝病發展過程的逐步變化，讓數據跟加具有說服性。綜上所述，非酒精性脂肪性肝病形成過程中與CLUT4、脂聯素有關。

［1］陳海平，張斌，朱曉駿，等.非酒精性脂肪性肝病中的胰島素抵抗的研究進展 ［J］.世界最新醫學信息文摘，2015，10（25）：41-42.

［2］楊婕，劉朝奇.microRNA在非酒精性脂肪性肝病中的作用［J］.生命的化學，2014，12（15）：65-66.

［3］張麗慧，趙文霞.脂聯素在非酒精性脂肪性肝病中的作用及中藥對其的影響［J］.中醫臨床研究，2014，6（10）：35-36.

［4］吳曉艷.GLUT4和UCP2在非酒精性脂肪性肝病中的作用以及小檗堿對GLUT4和UCP2表達的影響［D］瀘州醫學院，2014，4（1）：65-66.

［5］蔡冰，周永健，李瑜元，等.脂聯素基因啟動子區甲基化狀態對大鼠實驗性非酒精性脂肪性肝病的影響［J］.臨床和實驗醫學雜志，2015，2（10）：614-615.

［6］侯鵬高，呂長淮.非酒精性脂肪性肝病成因及相關因素研究進展［J］.齊齊哈爾醫學院學報，2014，11（28）：36-37.

［7］游國平.二甲雙胍或飲食干預對NAFLD大鼠肝臟脂聯素及其受體表達的影響［J］.福建醫科大學2014，5（1）：58-59.

［8］鞏萱.脂肪細胞因子及脂聯素受體在大鼠非酒精性脂肪性肝病發病中的作用研究［J］.福建醫科大學2010，5 （1）：80-81.

［9］張良登.非酒精性脂肪肝橫斷面調查及清熱祛濕化痰法干預的脂肪因子機制［J］北京中醫藥大學2014，5（1）：40-41.

［10］鮑秀琦，朱捷，張曉波.CLUT4及瘦素在大鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用［J］.黑龍江醫藥科學，2011，3（12）：91-92.

The Role of GLUT4 and Adiponectin in Nonalcoholic Fatty Liver Disease

GUO Wei LI Song，GUO Jian-li，SONG Ya-qiong，SUN Yang-yang，ZHANG Hong-jia
Department of digestive diseases，Affiliated Hospital of Qiqihar Medical，Qiqihar，Heilongjiang Province，161021 China

R575.5

A

2096-1782（2016）05-0009-02

郭威（1972.9-），女，黑龍江齊齊哈爾人，碩士，主任醫師，研究方向：肝臟代謝障礙及相關研究。

2016-02-24）