自擬催乳湯對溴隱亭致大鼠產后缺乳的治療效果觀察

董世起,李歡歡,卞藝斐,范迎賽,Naw rasHamdan,王婷婷,高宗勤,范開,劉鐘杰

(中國農業大學動物醫學院,北京海淀100193)

自擬催乳湯對溴隱亭致大鼠產后缺乳的治療效果觀察

董世起,李歡歡,卞藝斐,范迎賽,Naw rasHamdan,王婷婷,高宗勤,范開,劉鐘杰

(中國農業大學動物醫學院,北京海淀100193)

本試驗旨在觀察自擬催乳湯對大鼠產后缺乳模型的效果.采用溴隱亭灌胃SD大鼠方法建立缺乳模型,同時用自擬的催乳湯灌胃進行治療,通過觀察母鼠每小時泌乳量、仔鼠每窩凈增重、母鼠乳腺濕重等方面的變化,評價自擬催乳湯對產后缺乳的治療效果.結果發現,自擬催乳湯能極顯著提高母鼠每小時泌乳量(P<0.01)、顯著提高仔鼠每窩凈增重(P<0.05),顯著提高母鼠乳腺濕重(P<0.05),同時方劑治療組和空白對照組相關數據也具有顯著差異性.證明自擬催乳湯可以顯著提高泌乳量,維持產后缺乳母鼠乳腺的結構,對產后缺乳具有治療作用,但其治療效果還需進一步的觀察和優化改進.

產后缺乳;溴隱亭;方劑;催乳湯

如果在母畜分娩后出現乳汁不足或無乳,仔畜因吃不到乳汁而表現饑餓、逐漸消瘦,如不及時采取治療措施,往往導致仔畜最終死亡[1-2].因此本病的防治可以提高仔畜的存活率,而對產后缺乳癥開發新的治療藥物,具有巨大的應用前景和經濟效益[3].本研究嘗試根據傳統中醫理論[4],以調理氣血,通絡下乳為主要原則自主擬定方劑[5],嘗試探索治療產后缺乳的新藥.

1　材料與方法

1.1試驗材料

1.1.1試驗藥品甲磺酸溴隱亭片,由匈牙利吉瑞大藥廠生產,生產批號:T33129A;方劑所需中藥藥材均購自北京同仁堂大藥房馬連洼店;實驗用SD大鼠由北京軍事醫學科學院實驗動物中心提供,合格證號:SCXK(軍)2012-0004,所有SD大鼠均為SPF級,體重范圍為215 g～235 g.

1.1.2催乳湯制備本研究自擬的催乳湯由黃芪、黨參、當歸、王不留行、白術、甘草等組成.用電子天平分別稱取所需中藥藥材放于陶瓷煎藥罐中,加入藥重量10倍體積的蒸餾水,浸泡30 min后大火煮沸再調至小火煎煮30 min,將藥液用8層脫脂細紗布過濾到大燒杯中后第2次加入8倍藥量體積的蒸餾水,直接大火煮沸后再調至小火煎煮20 min后,將藥液用8層脫脂細紗布過濾倒出,合并兩次過濾藥液,用24層脫脂細紗布過濾,過濾后用雙層分析濾紙加壓過濾,最后收集藥液的過濾液用旋轉蒸發儀減壓濃縮至生藥濃度1 g/m L,4℃保存待用.

1.1.3溴隱亭溶液配制取甲磺酸溴隱亭片(2.5 mg)32片置于棕色試劑瓶中,量取100 mL燒開后冷卻至室溫的蒸餾水,充分溶解即制得0.8 mg/mL的溴隱亭藥液,4℃避光保存備用.

1.2試驗方法

1.2.1實驗動物分組及給藥將未經產SD母鼠和公鼠按照3∶1比例自然配種,分娩后隨機將母鼠分成3組,每組母鼠10只,調整每只母鼠帶仔鼠12只.3組分別做為空白對照組、缺乳對照組和湯劑治療組.每天早晚對各組母鼠按以下藥量灌胃:空白對照組:2 mL蒸餾水,分兩次1 mL進行灌胃;湯劑治療組:1 mL溴隱亭溶液+1 mL催乳湯;缺乳對照組:1 mL溴隱亭溶液+1 mL蒸餾水.

1.2.2試驗結果記錄每天早晨灌胃給藥2 h后,將母鼠和仔鼠進行分離,稱量每窩仔鼠的總重,記為W1;仔鼠和母鼠隔離4 h后,再次稱量每窩小鼠的總重,記為W2;哺乳1 h后第3次稱量每窩仔鼠的總重,記為W 3.連續7 d稱量仔鼠的重量,第7天稱重結束后將母鼠處死,稱量并記錄母鼠腹部兩側乳腺的總重量.母鼠每天每小時泌乳量為:W3-W2+(W1-W2)/4;仔鼠每窩凈增重為:W3(Ⅹ)-W 1(Ⅰ),其中,W3(Ⅹ)是最后1天的仔鼠窩總重W 3,W1(Ⅰ)是第1天的仔鼠窩總重W 1.缺乳對照組在試驗后期有母鼠出現仔鼠全窩死亡,記該母鼠每小時泌乳量為0,窩凈增重為0.

1.3結果處理對獲得的各組數據,使用IBM SPSS Statistics 20版軟件進行單因素方差分析,多重比較時,如果方差齊則采用LSD法,如果方差不齊則采用Tamhane法,以P<0.05認為差異具有統計學意義[6].試驗結果用平均值±標準差(X±s)表示(小數點后保留兩位有效數字).

2　試驗結果與分析

2.1母鼠每小時泌乳量比較如表1、圖1所示,湯劑治療組的每小時泌乳量比缺乳對照組高,但低于空白對照組.對于各組間比較的統計學結果顯示,與空白對照組相比,缺乳對照組和湯劑治療組在前兩日的每小時泌乳量均不具有差異性,缺乳對照組的每小時泌乳量在第3天極顯著性降低(P<0.01),而湯劑治療組的每小時泌乳量在第3天出現顯著性降低(P<0.05),到第5天才出現極顯著性降低(P<0.01);與缺乳對照組相比,湯劑治療組的每小時泌乳量在第5天出現了顯著性升高(P<0.05),在第6天就出現極顯著性升高(P<0.01).而對于各組內,空白組自第3天起每小時泌乳量不再線性增加,而是保持穩定,略有增加;缺乳對照組的每小時泌乳量自第3天起急劇下降,到第7天的時候每小時泌乳量極小,母鼠泌乳幾乎停止;湯劑治療組的母鼠每小時泌乳量在第3天略有下降,此后保持穩定,略有下降后呈上升趨勢.由于溴隱亭的作用是抑制催乳素的分泌,而催乳素的作用則是啟動和維持泌乳,因此,本試驗的自擬催乳湯可以促進催乳素的分泌,對抗溴隱亭的抑制作用,并且其促進作用具有穩定性.

表1　母鼠每小時泌乳量

2.2仔鼠每窩凈增重比較對各組母鼠的仔鼠每窩凈增重分析如表2,湯劑治療組的仔鼠每窩凈增重比缺乳對照組高,但低于空白對照組.統計學結果顯示,與空白對照組相比,湯劑治療組和缺乳對照組的仔鼠每窩凈增重均極顯著性的降低(P<0.01);與缺乳對照組相比,湯劑治療組的仔鼠每窩凈增重具有顯著性增高(P<0.05).

圖1　母鼠每小時泌乳量C:空白對照組;T:湯劑治療組;M:缺乳對照組

2.3母鼠乳腺(腹部)重量對各組母鼠的乳腺(腹部)重量分析,如表3,湯劑治療組的母鼠乳腺(腹部)重量比缺乳對照組高,但低于空白對照組.統計學結果顯示,與空白對照組相比,湯劑治療組和缺乳對照組的乳腺(腹部)重量均極顯著性降低(P<0.01);與缺乳對照組相比,湯劑治療組的母鼠乳腺(腹部)重量具有顯著性增加(P< 0.05).

表2　仔鼠每窩凈增重

表3　母鼠乳腺(腹部)重量

3　討論

母鼠泌乳的調節是催乳素依存型調節,乳腺組織在催乳素的作用下分泌乳汁并排入乳腺管內[7].溴隱亭可以降低催乳素的分泌,阻止和減少乳汁的分泌[8],因此單純灌服溴隱亭的缺乳對照組,其每小時泌乳量在第3天與空白對照組出現了顯著性差異,并且從第3天起每小時泌乳量持續急劇降低,缺乳對照組的仔鼠也由于母鼠乳汁分泌不足而生長嚴重不足,每窩凈增重與空白對照組相比極顯著性降低,說明用甲磺酸溴隱亭片制備溴隱亭藥液經口灌服獲得了差異性極顯著的產后缺乳大鼠模型.催乳素在哺乳期能夠維持乳腺的發育結構,催乳素分泌不足會導致母鼠在孕期發育成熟的乳腺結構退化.缺乳對照組母鼠的泌乳量隨給藥天數急劇降低,第7天的乳腺重量也和空白對照組有了顯著性差異,有效證明了溴隱亭抑制母鼠催乳素分泌的作用,引起了缺乳對照組的乳腺退化.具體的乳腺結構和乳腺中的催乳素分布變化,還需要通過免疫組化等研究方法進一步研究.

中醫認為乳汁是由氣血津液化生,資于沖任,乳汁減少或不足是由于氣血虧虛、津液不足或因乳脈不行而致[1].而分娩則會導致母畜氣血虧損,津液丟失,而應激或者環境的影響又往往導致母畜經脈淤壅,乳血滯行,所以產后缺乳的治療臨床上以調理氣血,通絡下乳為主.本研究中擬定的湯劑中黃芪、黨參、當歸等是補益氣血的藥物,王不留行是疏經解郁,通絡下乳的常用藥物,因此在方劑中各味藥物的綜合作用下,湯劑治療組母鼠的每小時泌乳量在第3天略有下降后保持穩定,并逐漸呈上升趨勢,出現此種情況可能是由于溴隱亭的抑制泌乳作用直接作用于垂體,見效快,而中藥的調理和通絡下乳治療則在于綜合調整機體的生理狀態,因此產生臨床可見效果的時間會比溴隱亭較長,因此出現了湯劑治療組的母鼠每小時泌乳量先降后升的變化情況.而湯劑治療組的每小時泌乳量在第3天和空白對照組相比出現顯著性降低,到第5天才出現極顯著性降低,隨后的差異性開始呈下降趨勢,也說明了本研究中的催乳湯劑可以增加乳汁的分泌,但由于中藥的藥效顯現需要時間,本研究是在7 d內進行,所以更多天數的作用效果和影響還需要進一步的研究論證.

溴隱亭的化學名稱為2-溴-α麥角環肽,是一種單成分化學合成物,可以直接激活多巴胺受體而產生作用[8],而中藥湯劑的治療作用則多是通過多組分調整恢復機體平衡,增強機體部分器官或者組織的機能來達到治療恢復,因此湯劑治療組和空白對照組的差異性提醒我們要關注中藥方劑治療的藥效時間問題,并提醒我們應參考現代化學藥的研究思路對傳統中藥治療進行成分研究和現代化研究.

4　結論

本試驗中自擬的催乳湯具有顯著促進乳汁的分泌和排泄,提高缺乳母鼠泌乳量的功能,能夠用于產后缺乳證的治療;但其用于產后缺乳證的治療效果還需要進一步觀察.

[1]花麗茹.中草藥在治療母豬產后疾病的應用[J].養殖技術顧問,2010(7):113-114.

[2]萬鵬,聶慧,鄧時貴.歸芪通乳合劑對溴隱亭誘導大鼠產后缺乳的催乳作用[J].中藥新藥與臨床藥理,2013(1):42-44.

[3]張明海,張虹虹.母豬產后缺乳癥的防治辦法[J].今日養豬業,2012(1):22-24.

[4]楊小紅,杜靜,王玉強,等.缺乳的中醫藥治療現狀[J].中國中醫藥現代遠程教育,2010(6):175-176.

[5]毛成榮.辯證施治母豬產后缺乳[J].山東畜牧獸醫,2011 (1):69-70.

[6]黃波.尼古丁對敲除小鼠調節性細胞及對人臍靜脈內皮細胞凋亡的影響[D].廣州:南方醫科大學,2012.

[7]唐立剛.激動素對大鼠乳腺的作用及相關機制研究[D].楊凌:西北農林科技大學,2012.

[8]馬愛團,鐘秀會,孟立根,等.溴隱亭對小鼠生育的影響及其作用機理[J].動物學,2006(3):536-541.

Observation on the Effect of self-made lactogenic decoction on Postpartum Hypogalactia Rats Induced by Bromocriptine

DONG Shi-qi,LI Huan-huan,BIAN Yi-fei,FAN Ying-sai,Nawras Hamdan, WANG Ting-ting,GAO Zong-qin,FAN Kai,LIU Zhong-jie
(College Of Veterinary Medicine,China Agricultural University,Beijing 100193,China)

The object is to observe the effect of self-made lactogenic decoction on model rats with postpartum hypogalactia. SD rats were given bromocriptine by gavage to establish the hypogalactia model,and were treated with self-made lactogenic decoc?tion.And then,the changes of maternal milk production per hour,weight increment of rat pups per nest,maternal galactophore(ab?domen)weight were observed to evaluate the effect of self-made lactogenic decoction on postpartum hypogalactia.It was found that Self-made lactogenic decoction could significantly increase the amount of maternal milk production per hour(P<0.01),improve weight increment of rat pups per nest(P<0.05),increased maternal galactophore(abdomen)weight(P<0.05),at the same time the related data between treatment group and blank control group also has significant difference.Conclusion was that Self-made lacto?genic Decoction can significantly improve maternal milk production,reduce the degradation of galactophore in mothers with hypo?galactia,and has a therapeutic effect on postpartum hypogalactia,but the effect still needs further observation and improvement with optim ization.

Postpartum hypogalactia;Bromocriptine;Prescription;Lactogenic decoction

LIU Zhong-jie

R 271.44

A

0529-6005(2016)02-0053-03

2014-05-28

"十二五"國家科技支撐計劃重點課題"防治母豬胎產病與提高免疫力中獸藥創制"(2011BAD34B02-02)

董世起(1986-),男,博士,從事中獸藥方劑研究, E-mail:dsq@cau.edu.cn

李歡歡(1988-),女,碩士,從事中獸藥方劑研究,E-mail: 1HH198861@163.com

注:李歡歡與董世起對本文具有同等貢獻

劉鐘杰,E-mai:liuzhongjiecau@163.com