李碧婷,劉玫,賀詩乾,李韶清,張洪彬,李守軍,2,3
(1.華南農業大學獸醫學院,廣東廣州510642;2.廣東省獸醫臨床重大疾病綜合防控重點實驗室,廣東廣州510642;3.廣東省寵物工程技術研究中心,廣東廣州510642)
探究貯存式自體輸血在犬身上的應用
李碧婷1,劉玫1,賀詩乾1,李韶清1,張洪彬1,李守軍1,2,3
(1.華南農業大學獸醫學院,廣東廣州510642;2.廣東省獸醫臨床重大疾病綜合防控重點實驗室,廣東廣州510642;3.廣東省寵物工程技術研究中心,廣東廣州510642)
輸血是臨床出血性疾病常用的治療方法,包括異體輸血和自體輸血.目前,國際上僅有少數發達國家建立了犬血庫,大多數國家包括我國尚未建立犬血庫,血源極其有限.另外,目前已發現的犬血型系統超過12個[1],經國際標準確定的血型為8種[2],加上犬品種和血型鑒定技術的原因.使得犬異體輸血難以實施,尤其像我國這樣發展中國家.
自體輸血是采集自身的血液或血液成分,以在手術中或緊急情況下回輸給機體的一種輸血方法.目前在我國人醫方面,自體輸血近10年來已被廣泛應用,其技術已相對成熟,而在國內動物醫療方面仍較為少見,其臨床應用價值未得到充分體現.適當的自體輸血能刺激骨髓造血干細胞分化,促進紅細胞生成,有利于術后恢復[3],本試驗從貯存式自體輸血在犬的大量失血后至恢復期的血液生化以及血常規的變化,探討自體輸血在犬臨床診療中的可行性,為動物臨床輸血治療提供參考.
1.1主要試劑和儀器全自動生化分析儀:日立高新技術株式會社生產,型號為日立7180-ISE;血球計數儀:Wien Austria,Serial NO.802443;頸靜脈采血針,一次性使用塑料血袋(費森尤斯卡比醫療用品有限公司,85FK18AC00);電子天平.
1.2血液采集、貯存及動物分組試驗犬共8只,品種為普通土犬,1~2周歲,體重9~15 kg內.臨床體格檢查健康,免疫齊全,定期驅蟲,無輸血經歷.物理保定犬后,無菌蛙跳式頸靜脈采血,每次采血量低于總血量的10%,每周1次,連續采3周.注意不能使用可導致血壓顯著下降的藥物,采血速度不宜過快,邊采集邊緩緩搖晃血袋,并密切監測動物的基本生命體征.采集的血液存放于4℃冰箱內,每次使用前觀察貯存血是否發生變性,并取血樣在顯微鏡下觀察.記錄采血量、血細胞變化和試驗犬出現的不良反應等.采血后加強營養并觀察犬的恢復情況.試驗分組及每只試驗犬每次采血量和最后所得貯存血量結果見表1.

表1 各個試驗犬每次采血量
1.3急性失血模型犬及自體輸血第3次采血后,間隔1周進行1次采血量約為其體重的20%,期間監測犬的心率、呼吸、血壓、脈搏、可視黏膜情況、精神狀態等臨床表現致急性失血狀態.采集至1次性使用塑料血袋中的血液于4℃保存備用.
自體輸血組采集到的血液保存于4℃冰箱內,以蛙跳式方法采集血液直至所采集的血液完全滿足手術預計手術失血所需回輸的量,于最后1次采血后1周進行手術并回輸貯存的血液.術前講貯存血液從冰箱取出后恢復至室溫備用,輸血前和輸血中將血液緩緩搖勻.輸血需無菌操作,一般選用頭靜脈回輸,輸血速度前15 min應慢,以便觀察其反應,隨后可根據情況加快,通常犬以5 mL/min為宜.實際情況輸血量應根據病情需要和體重決定,通常犬輸血量為5 mL~10 mL/kg體重[3].
使用血細胞計數全自動分析儀和血液生化儀分別在采血前、回輸后第1天和第3天檢測各個試驗犬的血液生化以及血液組份等指標.各指標變化指數為=(檢測數據-采血前數據)/采血前數據,用SPSS13軟件對數據進行統計學分析.
2.1自體輸血后血液生化指標輸血治療常發生急性輸血反應,例如溶血,溶血后各種血液生化指標發生大幅度變化.貯存式自體輸血后,從血液生化指標值(見表2)和變化指數(見圖1)分析各種指標均在正常范圍內,輸血組與對照組差異不顯著(P>0.05),表明貯存血液活性良好;自體輸血后未發生溶血現象.

表2 自體輸血后血液生化指標
2.2自體輸血對血常規的影響急性失血后,血容量迅速下降,血液的各組分減少.貯存式自體輸血后,血常規檢測(見表3)和變化指數(見圖2)分析,雖然輸血組血液各組分較對照組恢復快,但差異不顯著(P>0.05).
犬的血型復雜,輸血后會發生輸血反應幾率高[4],其中犬紅細胞抗原(DEA1.1、DEA1.2、DEA7)血型的抗原性強,對可能需要進行重復輸血的犬只來說危險性極高,容易引起強烈的輸血反應[5].在犬的大型擇期手術中,如髖關節置換術等,預計會出現大量失血的情況下,可考慮進行貯存式自體輸血,即在術前預先采集并保存適量的自體血,在術中或術后回輸[6-9]血液治療法是搶救動物的一種用以補充紅細胞等血液成分、維持血壓、增強血液攜氧能力和凝血性的有效措施[10].
本次試驗的貯存式自體輸血不需要特殊的設備,采血和回輸方法簡單,且不延長手術麻醉時間.只要嚴格遵循無菌操作,不會引起動物明顯的炎癥反應,可以讓動物更快地從疾病中康復過來.經分析,犬的自體輸血對于其自身肝腎功能基本無影響,對于血液成分的盡快恢復有著明顯的幫助.而且經過對兩組動物的觀察比較也看出,尤其是對血細胞的含量的影響,自體回輸組的各項生理表現恢復迅速,體現出自體輸血的優越性.

圖1 自體輸血后血液生化指標

圖2 自體輸血后血常規

表3 自體輸血后血常規
綜上所述,貯存式自體輸血對犬的大型擇期手術是十分有益的,既有異源輸血療法的優點,又不會產生其所帶來的不良反應.但在我國動物醫療方面自體輸血的臨床應用價值未得到充分體現,隨著現在寵物行業的飛速發展,在小動物臨床上應該得到合理的推廣,貯存式自體輸血值得在動物診療中進一步研究和普及.
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S829.2文獻標志碼:B
0529-6005(2016)02-0078-03
2014-09-29
廣東省獸醫臨床重大疾病綜合防控重點實驗室(2013A061401013);寵物疫病快速診斷與疫苗研究與示范(201303042);華南農業大學大學生科技創新基金
李碧婷(1991-),女,本科生,從事犬血液學研究, E-mail:1309075159@qq.com
李守軍,E-mail:shoujunli@scau.edu.cn