2種檢測方法對不同年齡組涂陰肺結核病診斷價值的對比分析

李玉靜，吳海峰，孫志平，馬京華，王　亮，呂翠環*

(1.河北省胸科醫院檢驗科，河北 石家莊 050041；2.河北中醫學院護理學院,河北 石家莊 050200；3.河北省胸科醫院呼吸科，河北 石家莊 050041)

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·論著·

2種檢測方法對不同年齡組涂陰肺結核病診斷價值的對比分析

李玉靜1，吳海峰1，孫志平1，馬京華2，王亮3，呂翠環1*

(1.河北省胸科醫院檢驗科，河北 石家莊 050041；2.河北中醫學院護理學院,河北 石家莊 050200；3.河北省胸科醫院呼吸科，河北 石家莊 050041)

目的探討γ干擾素釋放試驗(T-SPOT.TB)及結核蛋白芯片檢測對不同年齡組抗酸染色涂片陰性肺結核病的診斷價值。方法分別選取已確診的涂陰肺結核病例191例、肺炎病例91例,分為3組：青少年組(7～40歲)，中年組(>40～65歲)，老年組(>65歲)，均進行T-SPOT.TB 及結核蛋白芯片檢測。結果青少年組和中年組2種檢測方法敏感度差異有統計學意義(P<0.05)、特異性差異無統計學意義(P>0.05)，而老年組敏感度、特異度差異均無統計學意義(P>0.05)。結論T-SPOT.TB方法對青少年及中年涂陰肺結核的診斷有一定的價值，對老年涂陰肺結核的診斷則應視具體情況選擇。

結核,肺；干擾素γ釋放試驗；蛋白質芯片

10.3969/j.issn.1007-3205.2016.06.019

目前臨床常用診斷肺結核的方法有結核菌培養、抗酸染色涂片、熒光定量PCR、結核抗體檢測、 γ干擾素釋放試驗(T-SPOT.TB)等。改良羅氏結核菌培養是診斷肺結核的“金標準”，但培養時間長，一般為4～8周，影響結核病的及時診斷。痰涂片抗酸染色能快速檢測結核菌，但對于涂片陰性的患者診斷很困難。T-SPOT.TB與結核蛋白芯片檢測結核抗體是快速輔助診斷肺結核的方法。國內既往鮮見年齡對結核患者免疫機制影響[1]的報道。本研究通過對這2種檢測方法進行對比分析，探討其對不同年齡組涂陰肺結核病的診斷價值。

1　資料與方法

1.1一般資料選取河北省胸科醫院2013年10月—2014年10月確診為肺結核[2]且經痰涂片抗酸染色結果陰性的患者191例分為3組：青少年組(7～40歲)98例，男性57例，女性41例,年齡8～39歲，平均(23.78±6.01)歲；中年組(>40～65歲)67例，男性44例，女性23例，年齡41～65歲，平均年齡(53.55±7.08)歲；老年組(>65歲)26例，男性18例，女性8例，年齡61～82歲，平均(75.04±4.74)歲。選擇同期住院的肺炎患者91例為對照組，同樣分為3組：青少年組(7～40歲)39例，男性20例，女性19例，年齡8～38歲，平均(22.90±7.92)歲；中年組(>40～65歲)37例，男性22例，女性15例，年齡41～63歲，平均(52.76±6.59)歲；老年組(>65歲)15例，男性8例，女性7例，年齡66～87歲，平均(73.73±7.27)歲。

1.2方法對結核組和肺炎組282例患者進行T-SPOT.TB及結核蛋白芯片檢測。

1.2.1T-SPOT.TB法①外周血單個核細胞的分離、收集與計數。②體外抗原刺激與孵育。③結果判定：陰性對照孔斑點數為0～5個，抗原A和抗原B檢測孔任一孔計數-陰性孔計數≥6判為陽性；如果陰性對照孔斑點數≥6,檢測孔斑點數≥2倍陰性孔斑點數判為陽性。操作過程嚴格按照說明書進行。

1.2.2結核蛋白芯片法嚴格按照南京大淵結核分枝桿菌IgG抗體檢測試劑盒(蛋白芯片)說明書進行操作，檢測脂阿拉伯甘露聚糖抗體、38 000抗體、16 000抗體。結果用南京大淵生物技術公司生產的PBT-X2型生物識別儀自動判讀。一種抗體陽性，則判斷該患者結核分枝桿菌抗體陽性。

1.3統計學方法應用SPSS 17.0對所得數據進行統計學分析，計數資料比較采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2　結　　果

青少年組和中年組T-SPOT.TB法與結核蛋白芯片法檢測敏感度差異有統計學意義(P<0.05)、特異度差異無統計學意義(P>0.05)，而老年組敏感度、特異度差異均無統計學意義(P>0.05)，見表1～3。

表1　青少年組敏感度及特異度比較

表2　中年組敏感度及特異度比較

表3　老年組敏感性度特異度比較

3　討　　論

痰涂片抗酸染色是檢測結核菌的快速方法，患者可以快速取得檢驗結果，痰涂片抗酸染色陽性患者則可快速診斷和治療，但其敏感度低[3]；而對涂陰患者的診斷則相對困難。T-SPOT.TB及結核蛋白芯片法是近幾年發展起來的快速結核病實驗診斷的新技術，可以快速檢測結核菌[4-7]。本研究收集涂陰肺結核191例,按國家年齡劃分標準分為3組,分別進行T-SPOT.TB及結核蛋白芯片檢測，并進行對比分析。

T-SPOT.TB原理是結核分枝桿菌感染機體后使其產生記憶性T細胞，結核分枝桿菌特異性抗原再次刺激機體時使其釋放γ干擾素，可以在體外對釋放的γ干擾素水平或能有效釋放γ干擾素的T細胞進行定量，從而判斷機體是否是結核分枝桿菌的感染者。結核蛋白芯片以微孔濾膜為載體，利用微陣列技術將純化的脂阿拉伯甘露聚糖、經基因工程重組DNA技術生產純化的結核菌16 000和38 000特異性抗原固定在特制的載體上，利用微孔濾膜的滲濾、濃縮、凝集作用，捕捉被檢樣品中特異性抗體,使抗原抗體反應在固相膜上快速進行，復合物再與膠體金標記的兔抗人IgG作用,在膜上形成紫紅色的斑點。然后通過芯片識別系統進行結果分析。結核蛋白芯片法可分別檢測結核菌的特異性細胞壁脂阿拉伯甘露聚糖抗體、16 000抗體和38 000抗體，以快速診斷結核菌感染情況。

本研究結果顯示，青少年組、中年組及老年組T-SPOT.TB檢測的敏感度分別為85.7%、77.6%和76.9%，結核蛋白芯片檢測的敏感度分別為67.3%、58.2%和57.7%，青少年組及中年組T-SPOT.TB檢測敏感度明顯高于結核蛋白芯片檢測，差異有統計學意義(P<0.05)，而老年組2種檢測方法差異無統計學意義。本研究T-SPOT.TB檢測的敏感度高于Yan等[8]的研究結果，而Yan等的研究未對所選病例進行痰菌抗酸染色檢測結果分類，且病例來源為肺結核與肺外結核；與Dai等[9]和劉艷等[10]的分析結果基本相符，但其均未對患者進行年齡分組。本研究結核蛋白芯片檢測的敏感度與吳友根等[11]和楊群等[12]相符。

本研究結果還顯示，青少年組、中年組及老年組T-SPOT.TB檢測的特異度分別為89.7%、70.3%和80.0%，結核蛋白芯片檢測的特異度分別為74.4%、73%和86.7%，2種檢測方法差異無統計學意義。本研究T-SPOT.TB檢測的特異度低于劉艷等[10]的報道，原因可能與年齡和樣本例數有關。

本研究青少年組及中年組T-SPOT.TB檢測的敏感度明顯高于結核蛋白芯片檢測；而老年組2種檢測方法的敏感度差異無統計學意義，可能與研究本年齡組樣本量偏少及老年人的免疫功能低下有關。2種檢測方法在3個年齡組中的特異度差異均無統計學意義。筆者認為臨床在選擇診斷涂陰肺結核檢測方法時，對于青少年及中年人應優選T-SPOT.TB檢測，老年人應根據具體情況而定。

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[8]Yan L,Xiao H,Han M,et al. Diagnostic value of T-SPOT.TB interferon-γ release assays for active tuberculosis[J]. Exp Ther Med,2015,10(1):345-351.

[9]Dai Y,Feng Y,Xu R,et al. Evaluation of interferon-gamma release assays for the diagnosis of tuberculosis: an updated meta-analysis[J]. Eur J Clin Microbiol Infect Dis,2012,31(11):3127-3137.

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[12]楊群，江曉靜. 結核蛋白芯片對肺結核及肺外結核的診斷價值[J].西安交通大學學報:醫學版,2012,33(1):130.

(本文編輯：劉斯靜)

Comparative analysis of the diagnostic value of smear negative pulmonary tuberculosis in different age groups by two methods

LI Yu-jing1, WU Hai-feng1, SUN Zhi-ping1, MA Jing-hua2, WANG Liang3, LV Cui-huan1*

(1.Depertment of Clinical Laboratory, the Chest Hospital of Hebei Province, Shijiazhuang 050041, China;2.Nursing college of Hebei Traditional Chinese Medical College, Shijiazhuang 050200, China;3.Depertment of Respiratory, the Chest Hospital of Hebei Province, Shijiazhuang 050041, China)

ObjectiveTo evaluate the diagnostic value of T-SPOT.TB and tuberculosis protein chip test for difference age patients with smear-negative pulmonary tuberculosis. MethodsOne hundred and ninety-one tuberculosis patients(smear-negative pulmonary tuberculosis) and 91 pneumonia patients were enrolled in our test. They were divided into three groups: the teenage group(7～40 years old), the middle-aged group(>40～65 years old) and the gerontism group(more than >65 years old). The three groups were examined with T-SPOT.TB and tuberculosis protein chip test. ResultsThe sensitivity of T-SPOT.TB and tuberculosis protein chip test in teenage group and middle-aged group were significant difference between the two methods(P<0.05)， but the specificity of two methods was no significant difference(P>0.05). The sensitivity and specificity in gerontism group were no significant difference(P>0.05). ConclusionT-SPOT.TB was important in the diagnosis for teenage and middle-aged patients with smear-negative pulmonary tuberculosis. The diagnosis of smear negative pulmonary tuberculosis in the elder patients should be selected according to the specific status.

tuberculosis, pulmonary； interferon-gamma release tests； protein chip

2015-08-17；

2015-09-02

河北省科學技術研究與發展指導計劃(132777269)

李玉靜(1982-),女,河北新樂人,河北省胸科醫院主管技師,醫學學士,從事臨床檢驗學研究。

R446.9

A

1007-3205(2016)06-0690-03