CD64指數對肺結核合并肺部細菌感染的診斷價值

王顯雷，王　勇，何　聰，陳素麗，劉　銳，郭麗萍

(1.河北省胸科醫院結核三病區，河北 石家莊 050041；2.河北省人民醫院重癥醫學科，河北 石家莊 050051；

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·論著·

CD64指數對肺結核合并肺部細菌感染的診斷價值

王顯雷1，王勇1，何聰2，陳素麗1，劉銳1，郭麗萍3*

(1.河北省胸科醫院結核三病區，河北 石家莊 050041；2.河北省人民醫院重癥醫學科，河北 石家莊 050051；

3.河北醫科大學第二醫院呼吸科，河北 石家莊 050000)

目的研究CD64指數對肺結核合并肺部細菌感染的診斷價值。方法選取河北省胸科醫院結核科及呼吸科住院患者200例，其中肺結核患者(Ⅰ組)及肺結核合并肺部細菌感染患者(Ⅱ組)各100例。觀察2組48 h靜脈血CD64及降鈣素原(procalcitonin，PCT)、C反應蛋白(C-reactive protein，CRP)水平。根據2組CD64及PCT、CRP數據繪制受試者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲線，計算曲線下面積，計算得出CD64指數、PCT、CRP最佳臨界值，并計算其敏感度及特異度。結果Ⅱ組CD64指數、PCT、CRP均高于Ⅰ組，差異有統計學意義(P<0.05)。CD64、PCT及CRP數據ROC曲線下面積 CD64(0.971)>PCT(0.921)>CRP(0.825)，與標準面積0.5相比差異均有統計學意義(P<0.05)。結論CD64在肺結核合并肺部感染患者血清中含量較高，在診斷細菌感染的判定價值上與PCT相仿，優于CRP，可作為判斷肺結核合并肺部感染患者存在細菌感染的輔助檢查指標。

結核，肺；降鈣素；感染

10.3969/j.issn.1007-3205.2016.06.012

肺結核、細菌性肺炎是呼吸科常見病、多發病。有時二者難以鑒別，且常表現為肺結核基礎上合并肺部感染，給臨床診斷、治療帶來一定困難。臨床上常通過抗感染治療或試驗性抗結核、抗感染治療并行，短期復查胸部X線片、胸部CT，根據病變吸收情況作出最終診斷，這勢必造成抗生素、抗結核藥物的不合理使用，從而導致病情延誤。CD64作為感染性疾病的敏感指標在很多研究中得到證實，且特異度較高。本研究檢測CD64在肺結核繼發肺部感染中的表達水平，同時與降鈣素原(procalcitonin，PCT)及C反應蛋白(C-reactive protein，CRP)進行對比分析，旨在探討CD64在肺結核及肺結核合并肺部細菌感染中的診斷價值，以便為早期區分肺結核和細菌性肺炎以及為肺結核合并感染時早期、合理使用抗生素提供理論依據。

1　資料與方法

1.1一般資料選取2012年10月—2014年10月河北省胸科醫院結核科及呼吸科住院患者200例，其中肺結核患者(Ⅰ組)及肺結核合并肺部細菌感染患者(Ⅱ組)各100例。Ⅰ組男性44例，女性56例，年齡21～75歲，平均(50.39±12.94)歲。Ⅱ組男性47例,女性53例,年齡23～74歲，平均(49.76±10.25)歲。2組性別、年齡差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2納入標準患者年齡大于18歲、小于80歲。肺結核診斷標準：符合2001年中華醫學會結核病分會《肺結核診斷和治療指南》的診斷標準[1]，病原學或組織病理學檢查陽性，并且抗結核治療有效。肺結核合并肺部細菌感染目前仍缺乏統一的臨床診斷標準，本研究主要根據以下標準對其進行臨床診斷：①肺結核經有效抗結核藥物治療，不需使用抗生素治療，臨床癥狀明顯好轉，胸部X線或胸部CT顯示肺部陰影吸收，診斷為單純肺結核；②肺結核經有效抗結核藥物治療后，感染癥狀好轉不明顯，發熱不退或再次發熱，咯膿痰或痰量較多，實驗室檢查顯示白細胞、CRP、PCT升高，聯合使用抗生素后，患者臨床癥狀好轉，肺部陰影有吸收好轉，診斷為肺結核合并肺部細菌感染。

1.3排除標準年齡小于18歲、大于80歲；病毒性肺炎、非典型病原體肺炎；合并肺外感染；院外應用抗生素；合并肝炎、自身免疫系統疾病、肺部基礎病(如慢性支氣管肺炎、支氣管擴張)、艾滋病、糖尿病等慢性疾病的患者。

1.4實驗試劑及主要儀器異硫氰酸熒光素(FITC)標記的小鼠抗人CD64抗體(購于美國BD公司)，CD64-FITC同型陰性對照試劑(購于美國BD公司)，溶血劑(0.83%的氯化銨溶液)。微量血 CRP 檢測儀(雅培Ⅰ2000)，PCT 檢測儀(羅氏Cobas e601)，流式細胞儀(BD FACSCalibur)。

1.5觀察指標所有入組患者均于入組48 h內抽取靜脈血查CD64、PCT、CRP。

1.6CD64指數、PCT及CRP檢測

1.6.1CD64指數檢測待檢測標本制成單細胞懸液，經過熒光素標記的CD64-FITC單抗與細胞表面CD64抗原相結合，經激光照射，被標記上的熒光素發出一定波長的光，被探測器檢測，并將不同波長的熒光信號進行區分，送到不同的光電倍增管中，經過信號轉換、放大、數字化處理等流程，通過計算機直觀地統計染各種熒光染料的細胞的百分比。

1.6.2PCT檢測應用羅氏cobase e601全自動生化分析儀，采用電化學發光檢測法進行檢測。EDTA-K2管采靜脈血2 mL顛倒混勻后即刻1 300r/min離心10 min分離血漿，儀器會自動計算每個樣本中的分析物濃度，由專人操作并質控，嚴格按說明書操作。

1.6.3CRP檢測應用雅培Ⅰ2000全自動生化分析儀，采用超敏免疫比濁法測定，由專人操作并質控，全部采用雙標準雙管測量，嚴格按說明書操作。

1.7統計學方法應用SPSS 18.0統計軟件進行分析。計量資料比較采用t檢驗；繪制受試者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲線，計算曲線下面積，計算得出CD64指數、PCT、CRP的最佳臨界值，并計算其敏感度及特異度。P<0.05為差異有統計學意義。

2　結　　果

肺結核合并肺部感染組CD64指數、PCT、CRP均高于肺結核組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

根據肺結核組、肺結核合并肺部感染組的 CD64、PCT及CRP數據繪制ROC曲線，可見曲線下面積 CD64(0.971)>PCT(0.921)>CRP(0.825)，與標準面積0.5相比差異均有統計學意義(P<0.05)(圖 1)。計算得出血清 CD64、PCT、CRP的最佳截斷值，當CD64取臨界值為 3.930時，診斷肺結核合并肺部感染的敏感度為86.2%，特異度為98.3%;當PCT取臨界值為0.395 μg/L時，敏感度為 80.5%，特異度為 95.3%；當 CRP 取 26.25 mg/L 為臨界值時，敏感度為 88.0%，特異度為 84.6%。見表2。

表12組CD64、PCT及CRP比較

組別CD64PCT(μg/L)CRP(mg/L)Ⅰ組2.916±1.5910.258±0.09914.400±6.588Ⅱ組6.424±2.1220.482±0.16630.963±14.845t9.19811.55110.198P<0.010.021<0.01

表2　CD64、PCT、CRP對診斷肺結核合并肺部感染的意義

圖1　CD64、PCT、CRP的ROC曲線

3　討　　論

肺結核本身是一種由結核分枝桿菌引起的肺部感染，與其他病原體引起的肺部感染比較，在癥狀，體征及影像學上并無絕對特征性的表現，如沒有可靠的病原學依據，肺結核合并肺部細菌感染的診斷很難成立，但細菌性肺炎患者痰標本容易受口咽部菌群的污染，因此很難從常規的痰標本的分離培養結果來確定真正的病原體，故肺結核合并肺部細菌感染的診斷有很大難度。

PCT主要由甲狀腺C細胞分泌，是降鈣素的前肽，為一種無激素活性的糖蛋白。正常人血清中PCT含量極低，在體外穩定性很好。當機體發生感染后，脂多糖及各種炎癥因子，如白細胞介素1、白細胞介素2、白細胞介素6和腫瘤壞死因子α等對機體PCT表達為正刺激效應，在短時間內誘導產生大量PCT。在全身性炎癥反應的2～3 h PCT即可升高，因此，PCT具有早期診斷膿毒癥的價值[2-3]。近年來研究表明，PCT是與感染相關性較好的生物學標記物，它與感染所致的全身炎癥反應綜合征、膿毒癥等全身性感染的嚴重程度和預后具有較好的相關性[4]。重癥肺炎時，血清PCT濃度明顯增高，經抗菌藥物治療，感染被控制后，血清PCT濃度會逐漸下降，故有學者認為PCT可反映全身炎癥反應的活躍程度[5]。目前臨床上認為PCT是現有的實驗室指標中早期診斷膿毒癥最有效的指標，也是鑒別細菌感染與其他非細菌性全身炎癥反應的最佳標志物之一[6]。

CD64是一種相對分子質量為72 000的跨膜糖蛋白，屬免疫球蛋白超家族中的成員，在細胞吞噬、抗原遞呈、釋放炎癥介質、清除免疫復合物中起重要作用，起連接細胞免疫和體液免疫的橋梁作用[7]。

CD64主要分布于單核巨噬細胞、樹突狀細胞等抗原遞呈細胞表面，是巨噬細胞和嗜酸性粒細胞表面的最基本成分。生理情況下，CD64在中性粒細胞表面呈低水平表達，當機體發生感染時，在細菌細胞壁內毒素、集落刺激因子、白細胞介素12、干擾素γ等因子的刺激下，CD64在中性粒細胞表面表達明顯增加[8]。CD64介導中性粒細胞和單核巨噬細胞對免疫球蛋白的Fc段進行識別和結合，從而增強免疫球蛋白的生理功能及殺傷能力，同時可調控多種炎癥反應，在抗感染過程中發揮重要作用[9]。

一般情況下，CD64在機體感染或內毒素入侵等刺激后4～6 h即可明顯升高，CD64與其配體結合后，可啟動并放大免疫反應，主要包括吞噬病原微生物、抗體依賴的細胞毒性作用及大量細胞因子的釋放[10]。有研究顯示，感染發生后24 h內，CD64表達水平明顯增高，為細菌感染尤其是全身性感染早期敏感的指標[11-13]。目前國內外關于肺結核合并肺部感染患者CD64表達水平研究較少。本研究結果顯示，肺結核合并肺部感染組患者CD64指數較肺結核組明顯升高，肺結核組、肺結核合并肺部感染組CD64、PCT、CRP的ROC曲線提示CD64診斷肺結核合并肺部感染的特異度均較PCT及CRP高。

綜上所述，CD64可作為一種敏感的監測感染狀態的指標，尤其是當細菌培養結果陰性或結果回報延遲時，根據CD64指導抗生素應用尤為重要。實際臨床工作中結合患者的臨床表現及聯合檢測、動態觀察CD64、PCT、CRP的變化，對肺部感染情況進行綜合評估，可判斷患者的疾病狀態，這對于系統管理和治療肺結核合并肺部感染患者具有重要意義。

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(本文編輯：劉斯靜)

Diagnostic value of CD64 on pulmonary tuberculosis with bacterial infection

WANG Xian-lei1, WANG Yong1, HE Cong2, CHEN Su-li1, LIU Rui1, GUO Li-ping3*

(1.Department of Tuberculosis Ⅲ Ward, the Chest Hospital of Hebei Province, Shijiazhuang 050041，China; 2.Department of Critical Care Medicine, the General Hospital of Hebei Province, Shijiazhuang 050041，China; 3.Department of Respiration, the Second Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050000，China)

ObjectiveTo investigate the diagnostic value of CD64 on pulmonary tuberculosis with bacterial infection. MethodsA total of 200 patients, hospitalizing at the departments of respiration and tuberculosis in Hebei Chest Hospital were divided into two groups:Group Ⅰ(n=100), patients with pulmonary tuberculosis; Group Ⅱ(n=100), patients suffering pulmonary tuberculosis with bacterial infection. Firstly, we detected the level of CD64, procalcitonin(PCT), and C-reactive protein(CRP) invenous blood drawn within 48 h after patients were enrolled in group. Secondly, ROC curves could be plotted based on the data of CD64，PCT and CRP. Finally, it was essential to account the area under curve, the best borderline of CD64, PCT and CRP. Then the sensitivity and specificity were caculated. ResultsCompared with Group Ⅰ，CD64 index，PCT and CRP in Group Ⅱ were increased significantly(P<0.05). The area under curves plotted basing on the data from two groups were 0.971(CD64)>0.921(PCT)>0.825(CRP), respectively. Compared with the standard area of 0.5, there were statistical significance(P<0.05). ConclusionCD64 is highly expressed in infectious patients with pulmonary tuberculosis, whose diagnostic value is similar to PCT, whereas better than CRP. These results indicate that CD64 might be an assistant marker in diagnosing pulmonary tuberculosis with bacterial infection.

tuberculosis, pulmonary； calcitonin； infection

2015-10-21；

2016-02-28

河北省醫學科學研究指導性課題(20130441)

王顯雷(1981-)，男，滿族，河北豐寧人，河北省胸科醫院主治醫師，醫學學士，從事呼吸系統疾病診治研究。

R521

A

1007-3205(2016)06-0663-04