關(guān)于薄層色譜鑒別丹參五味子片的效果

陳桂遠

（廣西清川仁源藥業(yè)有限公司 廣西南寧 530007）

關(guān)于薄層色譜鑒別丹參五味子片的效果

陳桂遠

（廣西清川仁源藥業(yè)有限公司 廣西南寧 530007）

目的：研究薄層色譜鑒別丹參五味子片的效果，進而將制劑的質(zhì)量標準有效提高。方法：采用薄層色譜法對丹參五味子片中含有的五味子和丹參進行鑒別，研究其鑒別效果。結(jié)果：在五味子與丹參酮ⅡA供試品色譜中，和對照品色譜互相對應(yīng)位置上出現(xiàn)了顏色相同的半點，并且陰性對照沒有受到干擾。結(jié)論：薄層色譜鑒別丹參五味子片的效果顯著，并且具有快速、簡單、良好重現(xiàn)性等諸多優(yōu)點，可以將其用在丹參五味子片的質(zhì)量控制。

薄層色譜；鑒別；丹參五味子片；效果

前言

臨床上，丹參五味子片主要被用來治療慢性肝炎、神經(jīng)衰弱、冠心病等疾病，田七、刺五加、甘草、五味子、丹參扥中藥材為該制劑的主要組成部分。該制劑在臨床上具有開竅理氣、祛邪扶正、化瘀活血等諸多功效。丹參五味子片中的丹參中含有丹酚酸B、丹參素、丹參酮ⅡA、ⅡB、丹參酮Ⅰ等成分，它們?yōu)樗苄曰蛘咧苄远苹衔锘蛘叻铀犷愋偷幕衔铩Ｔ诘⑺乃谐煞种校⑼駻屬于一種能夠?qū)毎麅?nèi)脂質(zhì)過氧化物以及核糖核酸之間的相互作用進行有效抑制的因子。其次，五味子也屬于丹參五味子片一個重要組成部分，脂肪油、揮發(fā)油、有機酸、多糖以及木脂素等均屬于五味子的重要組成部分。研究顯示，五味子能夠?qū)C體中樞進行有效抑制，具有較廣的作用范圍，能夠用發(fā)揮出與鎮(zhèn)靜安定相類似的效果。丹參五味子片中最重要的成分為五味子與丹參酮ⅡA，采用一種科學(xué)合理的方法對丹參五味子片中含有的五味子和丹參進行鑒別，不僅能夠有效控制丹參五味子片的藥物質(zhì)量，而且能夠有效控制與監(jiān)督藥物臨床使用的安全性與有效性。本研究主要采用的是薄層色譜法對丹參五味子片進行鑒別，將五味子甲素與丹參酮ⅡA進行對照，以此來鑒別制劑中的五味子與丹參，通過研究分析獲得了一些體會，現(xiàn)將其總結(jié)如下：

1 儀器與方法

1.1 儀器

儀器：由杭州子新華紙業(yè)有限公司提供的定性濾紙；由青島譜科分離材料有限公司提供的硅膠GF254薄層板、硅膠G板；由廣州市藥品檢驗所提供的5μl與2μl定量毛細管；由上海市實驗儀器總廠提供的理化干燥箱；由寧波自動化儀表廠提供的電熱恒溫水浴鍋；由上海市安亭電子儀器廠提供的三用紫外儀；由廣州經(jīng)濟開發(fā)區(qū)明珠電器有限公司提供的超聲波清洗器，其功率為150W；來自瑞士的電子分析天平。

1.2 藥物

藥物：甲酸乙酯、石油醚（溫度在30～60℃之間）、甲苯、乙酸乙酯、三氯甲烷、五味子甲素、丹參酮ⅡA、純凈水。

2 方法與結(jié)果

2.1 五味子薄層色譜鑒別方法與結(jié)果

丹參五味子片溶液的制備方法：選取10片丹參五味子片，將其研細，然后加入20mL三氯甲烷，采用超聲對其進行30min的提取，將其過濾，蒸干濾液，將2mL三氯甲烷加入到殘渣中進行溶解，將其作為供試品溶液。

五味子甲素對照品溶液制備方法：對五味子甲素對照品進行稱取，在其中加入三氯甲烷進行溶解，將其配制成為每1mL五味子甲素對照品溶液含1mg五味子甲素的溶液，并且將其當作對照品溶液。

五味子陰性對照品溶液制備方法：以處方工藝為依據(jù)，對缺五味子陰性對照品溶液進行制備，以薄層鑒別方法中的供試品溶液制備方法為標準，制備出陰性對照溶液。

薄層鑒別方法：以《中國藥典》中薄層色譜試驗為依據(jù)，吸取5μl供試品溶液與2μl對照品溶液，將其分別點在相同的一塊硅膠GF254薄層板上，展開劑為甲酸（15：5：1）-甲酸乙酯-石油醚（溫度為30～60℃）的上層溶液，按照展開→取出→晾干→置紫外燈下的步驟，對其進行檢視。

結(jié)果：在供試品色譜中，和對照品色譜互相對應(yīng)位置上出現(xiàn)了顏色相同的半點，并且陰性對照沒有受到干擾。具體色譜圖見圖1。

圖1 五味子薄層色譜鑒別圖譜

2.2 丹參薄層色譜鑒別方法與結(jié)果

丹參五味子片溶液的制備方法：選取10片丹參五味子片，將其研細，然后加入20mL三氯甲烷，采用超聲對其進行30min的提取，將其過濾，蒸干濾液，將2mL三氯甲烷加入到殘渣中進行溶解，將其作為供試品溶液。

丹參酮ⅡA對照品溶液制備方法：對丹參酮ⅡA對照品進行稱取，在其中加入子酸乙酯進行溶解，將其配制成為每1mL丹參酮ⅡA對照品溶液中含1mg丹參酮ⅡA的溶液，并且將其當作對照品溶液。

缺丹參陰性對照品溶液制備方法：以處方工藝為依據(jù)，對丹參陰性對照品溶液進行制備，以薄層鑒別方法中的供試品溶液制備方法為標準，制備出陰性對照溶液。

薄層鑒別方法：以《中國藥典》中薄層色譜試驗為依據(jù)，吸取5μl供試品溶液，將其分別點在相同的一塊硅膠GF254薄層板上，展開劑為甲甲苯—乙酸乙酯（19：1），在展開缸上放置薄層板，并將其展開，然后取出，再晾干。

結(jié)果：在供試品色譜中，和對照品色譜互相對應(yīng)位置上出現(xiàn)了顏色相同的半點，并且陰性對照沒有受到干擾。具體色譜圖見圖2。

3 討論

薄層色譜法是把涂布在支持板上的支持物當成固定相，并且采用恰當?shù)娜軇┳鳛榱鲃酉啵M而分離、鑒定與定量混合樣品，它屬于一種層析分離技術(shù)[1]。這種方式能夠以加快的速度對生物堿、核苷酸、氨基酸、類固醇以及脂肪酸等多種物質(zhì)進行層析。薄層色譜法屬于一種吸附薄層色譜分離方法，它對各個成分對相同吸附劑具有不同吸附能力這一特點進行充分利用，進而使得流動相溶液在流過吸附劑的過程中，會出現(xiàn)連續(xù)性的吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的現(xiàn)象，通過這樣方式能夠促使各個成份之間進行相互分離[2]。以薄層層析固定相不同支持物為依據(jù)，可以分為薄層凝膠層析、薄層離子交換層析、薄層分配層析以及薄層吸附層析等。通常情況下，薄層吸附層析使用的頻率最高。物體表面一個十分重要的性質(zhì)便為吸附，不同相之間均可以有表面形成，吸附指的是一個相中的物質(zhì)在表面表現(xiàn)出密集的現(xiàn)象。在氣體與吸附液體、液體與固體、氣體與固體之間的表面上均可能有吸附現(xiàn)象的出現(xiàn)。固體表面之所以能夠停留物質(zhì)分子，就是因為固體內(nèi)部分子以及固體表面分子的吸引力存在差異性，固體內(nèi)部分子之間有著對稱的相互作用，所以通常會抵消力場。但是固體表面分子所受的力具有不對稱性，如表面層力的作用小，向內(nèi)一面的作用力大，進而會促使溶質(zhì)分子或者氣體在進行運動的過程中，在與固體表面相遇時，因為受到了剩余力影響，所以便會停留下來。

圖2 五味子薄層色譜鑒別圖譜

本研究主要是在參考藥典的基礎(chǔ)上，將石油醚當成提取溶劑，對其超聲之后10min、20min、以及30min所獲得的結(jié)果進行對比分析，研究結(jié)果顯示，采用石油醚進行10min的超聲提取之后，能夠?qū)⒌⑼駻斑點有效顯示出來，但是卻不能將五味子甲素斑點顯示出來，將超聲提取時間延長到30min之后，也還是不能將斑點清楚的顯示出來。在采用三氯甲烷作為提取劑之后，便能夠?qū)⑽逦蹲右约暗唿c均清楚顯示出來。因此本研究將三氯甲烷當成丹參以及五味子的提取溶液，將其當成質(zhì)量標準，具有更大便利性。其次，為了選擇更好的丹參展開系統(tǒng)，本研究對環(huán)己烷一乙酸乙酯（17：3）以及甲苯一乙酸乙酯（19：1）進行了對比性的研究分析，研究結(jié)果顯示甲苯一乙酸乙酯（19：1）具有更好的展開效果。

綜上所述，丹參五味子片在臨床上屬于一種復(fù)方制劑，成分具有較大復(fù)雜性，薄層色譜法能夠?qū)ζ溥M行有效鑒別，具有快速、簡單、良好重現(xiàn)性等諸多優(yōu)點，可以將其用在丹參五味子片的質(zhì)量控制，在臨床上具有良好的推廣價值。

[1]秦建平，吳建雄，畢宇安，林夏，趙賓江，王振中，蕭偉.HPLC同時測定益心舒片中五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素和丹參酮Ⅱ_A的含量[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2012，18（02）：77～80.

[2]李廣生，王凌波，筆雪艷，李慧勇，林林，張清波.HPLC法同時測定益心舒片中丹酚酸B、五味子醇甲和丹參酮Ⅱ_A的含量[J].黑龍江醫(yī)藥，2016，29（01）：1～3.

R286.0

A

1004-7344（2016）26-0307-02

2016-8-26

陳桂遠（1984-），男，大專，主要從事藥品生產(chǎn)、研究等工作。