個體化飲食護理聯合阿卡波糖治療對2型糖尿病病人血糖和腸道菌群的干預作用

沈　婷，陶　瓊，王　婧，陳　紅，李　玲，何旭梅，胡　波

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個體化飲食護理聯合阿卡波糖治療對2型糖尿病病人血糖和腸道菌群的干預作用

沈婷，陶瓊，王婧，陳紅，李玲，何旭梅，胡波

摘要：[目的]探討個體化飲食護理聯合阿卡波糖治療2型糖尿病(T2DM) 病人血糖和腸道菌群變化情況。[方法]選取2013年12月—2015年12月收治的296例T2DM病人為研究對象，隨機分為兩組。對照組給予常規治療和護理，研究組在其基礎上給予個體化飲食護理和阿卡波糖治療3個月，比較兩組治療前后空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 hBG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)及腸道雙歧桿菌、乳酸桿菌、腸球菌、大腸埃希氏菌的變化情況。 [結果]治療3個月后兩組的 FBG、2 hBG、HbA1c 及腸道腸球菌、大腸埃希氏菌均低于治療前(P<0.05)，腸道雙歧桿菌高于治療前(P<0.05)，腸道乳酸桿菌治療前后比較差異無統計學意義(P>0.05)。治療后研究組 FBG、2 hBG、HbA1c及腸道腸球菌、大腸埃希氏菌均低于對照組(P<0.05)，腸道雙歧桿菌高于對照組(P<0.05)。[結論]在常規治療基礎上給予T2DM病人個體化飲食護理聯合阿卡波糖治療可以有效降低T2DM病人血糖水平，改善病人腸道菌群紊亂狀態。

關鍵詞:個體化飲食護理；阿卡波糖；2型糖尿病；血糖；腸道菌群

糖尿病目前已成為繼癌癥和心腦血管疾病之后的第三大疾病，是主要的公共衛生問題之一。糖尿病病人中2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM) 所占的比例約為95%[1-2]，腸道菌群在T2DM的發生、發展中所起到的重要作用逐漸被人們所認識[3-4]。T2DM病人不僅需要長期、有效的飲食控制、合理運動和藥物治療，而且也離不開護理人員進行有效的個體化營養飲食指導和護理[5]。本研究通過對住院的T2DM病人給予個體化飲食護理聯合阿卡波糖治療，觀察治療前后病人的空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 hBG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)及腸道雙歧桿菌、乳酸桿菌、腸球菌、大腸埃希氏菌的變化情況，現報道如下。

1　資料與方法

1.1臨床資料選擇2013年12月—2015年12月在武漢市第一醫院內分泌科確診并接受治療的296例T2DM病人，其中男168例，女128例，年齡46歲～78歲(62.15歲±11.25歲)。納入標準：①病人符合世界衛生組織(WHO)糖尿病診斷標準[6]，無腫瘤及肝、腎等臟器嚴重損害，無其他代謝性疾病，入院前1個月內無腹瀉或其他胃腸道疾病；②病人入院前1個月常規口服降糖藥物，近3個月內未服用任何降脂藥物，無需胰島素治療者；③入院前1個月內未使用過抗生素、微生態制劑等；④病人具備基本相似的生活、飲食、運動習慣。隨機將296例研究對象分為研究組187例、對照組109例，兩組病人一般情況比較差異無統計學意義，本研究獲本院醫學倫理委員會批準，病人知情同意。

1.2試劑與儀器2×EasyTaqTM PCR Super Mix、2×TransStart Top Green qPCR SuperMix(北京TransGen Biotech公司)；Loading Buffer、DNA Marker(日本TaKaRa公司)；SanPrep柱式DNA膠回收試劑盒、SanPrep柱式質粒DNA小量抽提試劑盒(上海生物工程股份有限公司)，聚丙烯酰胺凝膠電泳(polyacrylamide gelelectrophoresis，PAGE)純化，其他試劑皆為國產分析純。ABI Step One PlusTM Real-Time PCR儀(美國ABI公司)；凝膠成像系統(英國UVItec公司)；NanoDrop2000微量紫外分光光度計(美國Thermo Fisher Scientific公司)；Hitachi 7600(日本Hitachi公司)；VARIANT-Ⅱ糖化血紅蛋白測定儀(美國Bio-Rad公司)；漩渦振蕩器、電子天平(上海精科公司)；移液器(德國Eppendorf公司)；高速冷凍離心機(長沙湘儀公司)；臺式微量離心機(江蘇其林貝爾儀器制造有限公司)；低溫冰箱(日本Sanyo公司)。

1.3治療及護理方法對照組給予二甲雙胍等常規藥物治療、適量運動和健康教育。提倡少量多餐，搭配低鹽、低脂、優質蛋白質飲食，同時戒煙、戒酒，不飲含糖飲料，控制總熱量攝入；以強度小的有氧運動為主，堅持循序漸進。研究組在對照組護理及治療的基礎上實施個體化飲食護理聯合阿卡波糖治療，阿卡波糖為拜耳醫藥保健有限公司產品(國藥準字H19990205)，服用劑量每次50 mg，每日3次，療程3個月。個體化飲食護理方法參考Ziegler 等[7]方法實施，根據病人的年齡、性別、體重、有無合并癥及季節特征計算病人每日飲食量。①糖類：來自面、米等主食的糖類占總攝入熱能的40%～50%(比正常人低10%)；②蛋白質：蛋白質總量控制在 1.5 g/(kg·d)～2.0 g/(kg·d)；③脂肪：主要來自肉類及烹調油等脂肪攝入量，控制在總攝入能量的 30%以內；④蔬菜、水果：蔬菜以綠色蔬菜為主，西紅柿和黃瓜類低熱量蔬菜不限量，蔬菜供應≥500 g/d。水果要盡量少吃或僅限于柚子和獼猴桃，以代替部分主食(250 g 的柚子和獼猴桃相當于50 g主食)；⑤鹽：攝入量控制在 5 g/d～6 g/d；⑥禁忌：禁食胡蘿卜、粥等血糖生成指數相對高的食物；⑦進餐制度：個別特殊病人采用三餐一點制，即早餐、午餐、晚餐、點心，能量攝入量分別為1d總熱量的1/5、2/5、1/5、1/5，其他病人均采取三餐制，即早餐、午餐、晚餐，能量攝入量分別為 1 d 總熱量的 1/5、2/5、2/5。同時注意每天測尿糖，定期測血糖及體重以評價飲食療法是否恰當，必要時請營養師及護理專家給予調整。

1.4血糖及糖化血紅蛋白檢測實驗前后按照要求收集每個T2DM病人血清樣品，進行FBG、PBG、HbA1c檢測，血糖采用日立7600全自動生化分析儀(日本日立公司)檢測，HbA1c采用VARIANT-ⅡHbA1c測定儀(美國伯樂公司)檢測，全部按要求規范操作，每批樣本設立質控對照，確保質控結果在控。

1.5腸道菌群檢測方法

1.5.1標本采集所有研究對象的糞便標本均于排便后2 h內收集在密閉的糞便儲存盒內，將標本迅速儲存于-80 ℃低溫冰箱中。

1.5.2糞便基因組提取將糞便標本放在冰上解凍，按TIA Namp Stool DNA Kit (TIANGEN) 產品說明書，每例糞便稱取200 mg，提取糞便基因組DNA，置于-20 ℃冰箱保存。

1.5.3PCR引物設計參考相關文獻[8-9]，根據菌群16srRNA V3序列設計雙歧桿菌屬、乳酸桿菌屬、腸球菌屬、大腸埃希菌屬特異性引物，并在BLAST基因庫(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/blast)內對比引物特異性，引物由大連寶生物科技有限公司合成，見表1。

表1　腸道細菌擴增引物信息

1.5.4實時熒光定量PCR將質粒標準品連續10倍稀釋，獲得101～107系列拷貝數的標準品作為模板，構建標準曲線。應用Roche LightCyclel480定量PcR儀、Roche LightCyclel480 SYBR Green Master Mix試劑盒進行定量擴增。反應體系20 μL：SYBR Green Master Mix10 μL、上下游引物各1 μL、模板DNA 5 μL、ddH20 3 μL。反應條件為：①預變性，95 ℃ 5 min 1個循環；②擴增，變性95 ℃10 s、退火溫度20 s、延伸72 ℃30 s共45個循環。反應完畢后進行熔解曲線分析。將待測糞便DNA稀釋為5 ng/μL濃度作為定量PCR反應模板，在上述反應體系、反應條件下進行熒光定量擴增，結果以細菌拷貝數的常用對數lg/g糞便表示。

2　結果

2.1兩組治療前后血糖比較(見表2)

表2　兩組治療前后血糖及相關生化指標的比較±s)

2.2兩組治療前后腸道細菌數的比較(見表3)

表3　兩組腸道細菌數比較[M(P25～P75)]　lg copies/g糞便

3　討論

研究表明：在降低T2DM病人的體重和控制血糖方面，僅通過膳食調整就有明顯作用[10]，然而目前大多數T2DM病人的飲食主要采用統一處方飲食，該方法雖然簡便易行，但未考慮病人身高、體重、活動、病程等因素對疾病的影響。近年來，有些學者提出個體化處方飲食模式，由于該方法充分考慮到病人的個體化差異問題，已逐漸成為T2DM病人飲食護理研究的新方向[10-11]。本研究在常規治療的基礎上給予T2DM病人個體化飲食護理，治療3個月后兩組病人FBG、2 hBG、HbA1c顯著低于治療前，差異均有統計學意義(P<0.05)。治療后研究組FBG、2 hBG、HbA1c顯著低于治療后對照組，差異均有統計學意義，提示個體化飲食護理在控制T2DM病人血糖方面明顯優于單一處方飲食模式，提示在臨床常規治療的基礎給T2DM病人予個體化飲食護理可以顯著降低病人血糖水平。已有研究認為，腸道菌群與肥胖和T2DM密不可分，腸道菌群失調會抑制腸道緊密連接蛋白的表達，腸道上皮通透性增加，使得脂多糖不斷積累而進入血液循環，產生代謝性內毒素血癥。進一步研究發現：脂多糖能誘導全身性慢性炎癥發展，慢性炎癥可能引起胰島β細胞凋亡，最終引起T2DM[12-14]。另有研究顯示：腸道菌群可把不溶性的營養物質如蛋白質、糖類等轉化成可溶性物質以方便人體吸收，同時可把難吸收的多糖轉變為單糖，分解葡萄糖形成乳酸，對營養物質在腸道內的代謝具有重要的干預作用，腸道菌群失調可能是直接和/或間接促進胰島素抵抗的一個重要因素[15-17]。早期的觀念認為：阿卡波糖的作用機制是通過競爭性抑制小腸黏膜刷狀緣α-葡萄糖苷酶活性，阻礙腸道內多糖、低聚糖或雙糖的降解，減緩腸道糖類的吸收，從而降低餐后高血糖[18]。現有研究發現：阿卡波糖能改善T2DM病人腸道菌群及其引起的代謝紊亂，這可能是阿卡波糖獨立于降糖之外的心血管獲益機制之一[19-20]。

本研究在常規治療的基礎上給予T2DM病人個體化飲食護理聯合阿卡波糖治療，兩組治療3個月后雙歧桿菌顯著高于治療前，且治療后研究組雙歧桿菌顯著高于治療后對照組，這與劉海霞等[19，21-22]的研究結論一致，阿卡波糖可顯著提高腸道雙歧桿菌的數目，提高胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)的水平，降低病人腸道炎癥[19-20]。兩組治療后乳酸桿菌與治療前比較差異無統計學意義，兩組治療后乳酸桿菌比較差異也無統計學意義，這與相關研究結論有差異。Karlsson等[23]研究了T2DM病人及健康歐洲女性的腸道菌群，發現T2DM病人腸道乳酸桿菌數量增多，分析其原因可能與細菌的多樣性及個體差異有關，吳曉康等[24]利用聚合酶鏈反應-變性梯度凝膠電泳(PCR-DGGE)指紋圖譜分析了T2DM病人腸道擬桿菌和雙歧桿菌的多樣性及其與健康個體的差異，結果顯示T2DM病人腸道擬桿菌及雙歧桿菌的個體差異性大于正常人群，這可能與人種、飲食、地域、年齡等因素都有關。本研究兩組治療后腸球菌低于治療前，治療后研究組腸球菌顯著低于對照組，這與劉海霞等[19，21-22]的研究結論一致。本研究兩組治療后大腸埃希氏菌顯著低于治療前，治療后研究組大腸埃希氏菌顯著低于對照組，這與Musso等[25-26]的研究結論一致，T2DM病人腸道腸桿菌科細菌數量增加會引起其細胞壁脂多糖升高，脂多糖能誘導全身性慢性炎癥反應，不斷積累的氧化應激反應和慢性炎癥可引起病人胰島β細胞的凋亡[27]。

總之，在常規治療的基礎上給予T2DM病人個體化飲食護理聯合阿卡波糖治療可以有效降低T2DM病人血糖水平，改善病人腸道菌群紊亂狀態，但這種治療作用的具體機制以及與其臨床指標之間的關系，尚有待進一步深入研究。

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(本文編輯張建華)

基金項目教育部第44批留學回國人員科研啟動基金，編號：教外司留[2012]940。

作者簡介沈婷，主管護師，本科，單位：430022，湖北省武漢市第一醫院；陶瓊、王婧、陳紅、李玲、何旭梅、胡波單位：430022，湖北省武漢市第一醫院。

中圖分類號：R473.58

文獻標識碼：A

doi:10.3969/j.issn.1009-6493.2016.23.013

文章編號：1009-6493(2016)08B-2858-05

(收稿日期：2016-01-19；修回日期：2016-07-10)

Intervention effect of individualized diet nursing combined with acarbose on blood glucose and intestinal flora of patients with type 2 diabetes

Shen Ting,Tao Qiong,Wang Jing,et al

(First Hospital of Wuhan of Hubei Province,Hubei 430022 China)

AbstractObjective: To probe into the change situation of blood glucose and intestinal flora of T2DM patients who received the treatment of individualized diet nursing combined with acarbose.Methods:A total of 296 T2DM patients who received and cured from December 2013 to December 2015 were selected as the study subjects and randomly divided into two groups.The patients in control group were given the conventional treatment and nursing,while the patients in research group received the treatment of individualized diet nursing combined with acarbose on the basis of conventional treatment and nursing for 3 months,then to compare the change situation of the fasting blood glucose(FBG),postprandial 2 h blood glucose(2 hBG),glycosylated hemoglobin(HbA1c) and intestinal bifidobacterium,milk acid coli,Enterococcus,Escherichia coli between the two groups before and after treatment.Results:After the treatment for 3 months,the FBG,2 hBG,HbA1c and intestinal Enterococcus,Escherichia coli in two groups were lower than those before treatment(P<0.05),but intestinal bifidobacterium was higher than that before treatment(P<0.05),and there was no statistically significant difference in intestinal lactic acid bacteria before and after the treatment(P>0.05).After the treatment,the FBG,2 hBG,HbA1c and intestinal Enterococcus,Escherichia coli in research group were lower than those in control group(P<0.05),but the intestinal bifidobacterium was higher than those in control group(P<0.05).Conclusion:The treatment of individualized diet nursing combined with acarbose on the basis of the conventional treatment could effectively reduce the blood glucose level in T2DM patients and improve the disordered state of intestinal flora in patients.

Key wordsindividualized diet nursing;acarbose;type 2 diabetes;blood glucose;intestinal flora