HPLC對感冒靈膠囊中對乙酰氨基酚的含量測定研究

許樂，王媛媛，侯婭妮西安培華學院

HPLC對感冒靈膠囊中對乙酰氨基酚的含量測定研究

許樂，王媛媛，侯婭妮
西安培華學院

目的：建立測定感冒靈膠囊中對乙酰氨基酚含量的方法。方法：采用高效液相色譜法，Kromasil C18柱（200 mm×4.6 mm，5 μm），以甲醇：水：冰醋酸（25:75:0.5）為流動相，檢測波長：244 nm，流速：1.0 mL·min-1。結果：對乙酰氨基酚在50-200 μg·mL-1濃度范圍內呈良好的線性關系（r=0.9993），平均回收率為99.318%，RSD為0.21%（n=6）。結論：用高效液相色譜法測定對乙酰氨基酚含量快速準確，重現性良好，適用于感冒靈膠囊中對乙酰氨基酚的定量分析。

感冒靈膠囊；對乙酰氨基酚；含量；高效液相色譜

感冒靈膠囊是中西復方制劑，由三叉苦、野菊花、崗梅、金盞銀盤、薄荷油等中藥以及對乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏等化學藥組成，具有辛熱解表，清熱解毒的作用，主要用于治療風熱感冒，頭和身體疼痛，咽喉紅腫疼痛，等癥狀。由于感冒靈膠囊現行質量標準中對乙酰氨基酚含量測定的方法存在一些問題，如測定方法專屬性較差、實驗的重現性差、代表性不佳，且操作時間較長等。本研究在現行標準檢的基礎上，建立了一種簡單、快速、準確的HPLC的檢測方法。

一、儀器與試藥

上海舜宇恒平高效液相色譜儀、LC1620A高壓恒流泵、LC1620A紫外檢測器、N2000色譜工作站(浙江大學智能信息研究所)。對乙酰氨基酚標準品（中國食品藥品檢定研究院，批號：100018-200408，純度按100%計算）；感冒靈膠囊兩批分別為：華潤三九醫藥股份有限公司（批準文號：國藥準字Z44021939，批號：1509008s）；廣西嘉進藥業有限公司（批準文號：國藥準字Z20055271，批號：1512301）；甲醇為色譜純；冰醋酸為分析純；水為重蒸餾水。

二、實驗方法與結果

1色譜條件：色譜柱為Kromasil C18柱（200 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相為甲醇：水：冰醋酸=25：75：0.5；檢測波長為244 nm；流速為1.0 mL·min-1；進樣量：20 μL。

2對照品溶液的配制：將對乙酰氨基酚對照品在105℃干燥2小時至恒重，精密稱定，加流動相制成濃度為80 μg·mL-1對乙酰氨基酚溶液。

3供試品溶液的配制：取感冒靈膠囊去殼研細，精密稱量0.2 g，于50 mL容量瓶中，加流動相溶解，超聲處理5 min，冷卻后加流動相定容，混勻即得。

4陰性溶液的制備：按照處方組成，取感冒靈膠囊中除對乙酰氨基酚之外的其余成分，研細，精密稱量適量，以流動相溶解，定容即得。

5線性范圍的考察：精密稱取經干燥恒重處理的對乙酰氨基酚對照品，用流動相溶解，配制成濃度為0.25 mg/mL的對乙酰氨基酚溶液，量取適量配制成終濃度為200、160、120、80、50 μg·mL-1的對照品溶液，分別取20 μL進樣，記錄色譜圖，將對乙酰氨基酚的峰面積與濃度進行回歸分析，繪標準曲線，得回歸方程為:Y= 1614.3X-12758(r=0.9993)。結果表明對乙酰氨基酚在50-200 μg· mL-1濃度范圍與吸收峰面積線性關系良好。

6系統適用性實驗：分別取陰性對照溶液、對照品溶液和供試品溶液，各進樣20 μL，記錄色譜圖，如圖1所示（A：隱形對照，B:對照品，C:供試品）。結果顯示：供試品中對乙酰氨基酚峰的分離度比較好，而且陰性對照溶液在相同條件下未見干擾色譜峰。

圖1　對乙酰氨基酚PHLC色譜圖

7精密度實驗：取同一批次的感冒靈膠囊制備成供試品溶液，重復進樣6次，測定峰面積，計算RSD=0.10%。

8重現性實驗：分別取華潤三九醫藥股份有限公司三九感冒靈膠囊樣品6份，按2.3項下方法配制。依法測定對乙酰氨基酚的峰面積，計算RSD=0.36%。

9回收率實驗：取同一批次的感冒靈膠囊樣品0.1 g，精密稱定，加入濃度為0.220 mg·mL-1的對乙酰氨基酚對照品溶液10 mL，置于50 mL容量瓶中，加流動相超聲處理，冷卻定容，搖勻后制成，測定平均回收率為99.318%，RSD=0.21%（n=6）。

10穩定性實驗：取同一供試品溶液,每隔2 h測定1次,在0、2、4、6、8、10、12 h各進樣20 μL，記錄色譜圖，計算RSD=0.59%(n=6)，結果表明對乙酰氨基酚在12 h內基本穩定。

11含量測定：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20 μl，按上述色譜條件進樣測定，計算樣品中對乙酰氨基酚的含量，結果顯示批號為為1509008s的對乙酰氨基酚含量（標示量）為101.2%；批號為1512301的對乙酰氨基酚含量（標示量）為103.4%。

三、結論

本實驗用高效液相色譜法測定感冒靈膠囊中對乙酰氨基酚的含量，對其線性范圍進行了考察、測定精密度實驗、重現性實驗、系統適用性實驗、回收率實驗、穩定性實驗和含量測定，結果顯示對乙酰氨基酚在50-200 μg·mL-1濃度范圍內與吸收面積呈良好的線性關系，平均回收率99.318%，RSD為0.21%，方法快速準確，重現性良好，適用于感冒靈膠囊中對乙酰氨基酚的定量分析。

[1]張黎莉.感冒靈膠囊質量標準中檢測方法的研究[D].福建農林大學,2014.

[2]孫晶,薛壯.常用解熱鎮痛藥中對乙酰氨基酚含量測定[J].科技視界,2014,No.9205:184-185.