正交試驗法優選疏肝和胃顆粒的水提工藝

王秀梅劉光斌毛和平任遠

（1嘉峪關市食品藥品和醫療器械檢驗檢測中心，甘肅 嘉峪關 735100；2酒鋼醫院；3甘肅中醫藥大學，蘭州 730000）

正交試驗法優選疏肝和胃顆粒的水提工藝

王秀梅1劉光斌2毛和平2任遠3

（1嘉峪關市食品藥品和醫療器械檢驗檢測中心，甘肅 嘉峪關 735100；2酒鋼醫院；3甘肅中醫藥大學，蘭州 730000）

目的：確定疏肝和胃顆粒最佳水提工藝參數，為疏肝和胃顆粒水提工藝的生產提供參考。方法：以水提液蒸干殘渣70%浸出物為評定指標，采用正交試驗設計優化疏肝和胃顆粒水提工藝參數。結果：疏肝和胃顆粒水提最佳工藝條件為：以14倍量水提取2次，每次提取1 h。結論：該提取工藝穩定、合理，對制劑生產具有指導意義。

疏肝和胃顆粒；正交試驗；水提工藝

疏肝和胃顆粒是在酒鋼醫院經驗處方基礎上自行研究開發的醫院制劑（制劑批準文號：甘藥制字Z20140067），由高良姜、香附、白芍等7味藥材組成。具有疏肝理氣、溫中和胃、治酸止痛之功效，臨床上主要用于肝胃失和所致胃脘痛的治療。為了保證該制劑的內在質量和臨床療效的穩定性，本文以水提液蒸干殘渣70%乙醇浸出物為考察指標，采用L9（34）正交試驗法對疏肝和胃顆粒水提工藝進行了考察，從而優選出最佳水提工藝。

1儀器與試藥

1.1儀器

PK-S24型電熱恒溫水浴鍋（上海精宏實驗設備有限公司）；DHG-9123A型電熱恒溫鼓風干燥箱 （上海精宏實驗設備有限公司）；AUW120D型電子分析天平（日本島津）。

1.2藥材來源

所用藥材采購于蘭州市黃河藥材市場，經甘肅中醫學院藥學院中藥鑒定教研室鑒定均為藥典品種，其結果如下：

海螵蛸為烏賊科動物無針烏賊（Sepiella maindroni de Rochebrune）的干燥內殼；浙貝母為百合科植物浙貝母（Fritillaria thunbergii Miq.）的干燥鱗莖；高良姜為姜科植物高良姜（Alpinia officinarum Hance）的干燥根莖；香附為莎草科植物莎草（Cyperus rotundus L.）的干燥根莖；白芍為毛茛科植物芍藥（Paeonialact flora Pall.）的干燥根；元胡為罌粟科植物延胡索（Corydalis yanhusuo W.T. Wang）的干燥塊莖；大黃為蓼科植物掌葉大黃（Rheum palmatum L.）的干燥根及根莖。

2方法與結果

2.1 70%乙醇浸出物含量測定

參照《中國藥典》2010版附錄中熱浸法測定。精密稱取各試驗號下浸膏細粉3 g左右（相當于原生藥材20 g左右），精密稱定，置150 mL錐形瓶中，精密加 70%乙醇 75 mL，密塞，稱定質量，靜置1 h后，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1 h，放冷后取下錐形瓶，密塞，再稱定質量，用70%乙醇補足減失質量，搖勻，用干燥濾器過濾，全部濾液置于干燥至恒重的蒸發皿中，水浴蒸干后，置烘箱中105℃烘3 h，迅速轉移至干燥器中，冷卻至室溫，精密稱定質量。

2.2提取工藝優選

2.2.1藥材吸水率測定測定藥材吸水率，以確定提取用水的最低水平值。按處方比例稱取藥材200 g，加水8倍浸泡，每隔30 min觀察一次浸透情況，直至藥材浸至透心，總浸泡時間約為6 h。濾出未被吸收的水液，稱量濕藥材，按吸水率公式：

吸水率（%）=（浸泡后藥材總質量-浸泡前藥材總質量）/浸泡前藥材總質量 ×100%。

計算出本處方藥材吸水率為160%。

2.2.2因素及水平選擇以影響水回流提取結果的主要參數提取時間（A）、加水量（B）、提取次數（C）為因素，根據吸水率結果及藥材中成分性質，設定因素水平見表1。

表1　因素水平

2.2.3試驗安排及結果采用L9（34）正交試驗表安排試驗，將需要提取的藥材按處方比例每個試驗稱取 288 g，按安排條件提取，所得提取液濃縮、真空干燥后按“2.1”項下方法測定乙醇浸出物的量，試驗安排及結果見表2。方差分析見表3。

表2　水提工藝優選正交試驗安排及結果

由方差分析結果可知：B因素（總加水量）、C因素（提取次數）影響具顯著性，A因素（總提取時間）影響無顯著性；結合直觀分析結果確定最優工藝方案為A1B2C2，即加水14倍，提取2次，每次提取60 min。

2.2.4驗證試驗

按處方比例稱取需要提取的藥材每份288 g，5份，按最優提取工藝方案A1B2C2提取，試驗結果見表4。

表3　水提工藝方差分析

表4　水提工藝驗證結果

從驗證試驗結果可知：篩選出的水提工藝可行、穩定可靠、重現性好。

3討論

和胃止痛方由海螵蛸［1］、浙貝母［2］、高良姜［3］、香附、白芍［4］、元胡［5］、生大黃等藥組成。其中海螵蛸、浙貝母斂酸止痛；高良姜溫中和胃；香附、白芍、延胡索疏肝理氣，活血止痛；生大黃緩和海螵蛸的收澀之性；諸藥合用，共湊疏肝理氣，溫中和胃，治酸止痛之效；故對肝郁氣滯、胃失和降引起的胃脘痛，痛時可以牽連脅背，胸脘痞悶、得溫痛減、嘈雜、吐酸有顯著的療效。本方為臨床應用多年之驗方，一直以散劑給藥（用法為每次 5 g，每日3次），療效顯著。由于原劑型口感較差，因此患者的順應性差，嚴重影響本處方的臨床使用。鑒于顆粒劑載藥量較大、口感較好，屬于固體制劑穩定性也不錯，加之該劑型開水沖服的服用方法不影響原散劑速效的特點，為兼顧制劑工藝的簡單性和臨床用藥的方便性決定將該處方的劑型選為顆粒劑。

由于處方中海螵蛸、浙貝母，高良姜、香附、白芍［6］、元胡、生大黃［7-8］等藥材中的生物堿、苷類、黃酮類、蒽醌類、無機鹽類成分在水中均有一定溶解度，因此選用水作為溶媒回流提取，當水的用量較大時可有效浸出處方有效成分，但由于水的溶解范圍較廣，水回流提取可將淀粉、蛋白、果膠等大分子雜質提出，因此用出膏率高低作為評價指標不太科學。鑒于生物堿、苷類、黃酮類、蒽醌類等成分在乙醇中均有較好的溶解性，而淀粉、蛋白、果膠等大分子雜質不溶于乙醇，用乙醇浸出物作為提取工藝評價指標，可溶解多種物質，不但有較好的代表性，又由于含有雜質較少而具有一定的科學性。

高良姜、香附等藥的主要有效成分中有一大類為揮發油，海螵蛸中含有制酸成分且為君藥，鑒于目前采用的蒸餾法提取揮發油工藝復雜、收油率極低的現狀，因此將海螵蛸取40%、高良姜、香附各取50%粉碎以原粉入藥，3味藥的其余部分與其他藥材共同回流提取，這樣處理既可在醫院制劑條件下較好地保留這3味藥的有效成分、減少服用劑量，又可兼顧到制劑工藝的簡潔性、降低制劑吸潮性，制劑的最終形式為混懸型顆粒劑。

［1］ 于靜，顧青青，繆瀟瑤，等.海螵蛸質量標準研究［J］.中成藥，2015，37（3）：583-587.

［2］ 孫華娟.浙貝母不同炮制品質量的實驗研究［J］.中外健康文摘，2013，10（6）：177.

［3］ 李洪福，李永輝，王勇，等.高良姜化學成分及藥理活性的研究［J］.中國實驗方劑學雜志，2014，20（7）：236-244.

［4］ 高小榮，田庚元.白芍化學成分的研究進展［J］.中國新藥雜志，2006，15（6）：416-418.

［5］ 劉浪琪，吳慶光，劉四軍，等.元胡止痛膏的抗炎鎮痛作用［J］.廣東藥學院學報，2015，31（2）：231-234.

［6］ 劉光斌，毛和平，劉效栓，等.高效液相色譜法測定和胃散中芍藥苷含量［J］.中國實用醫藥，2009，4（5）：50-51.

［7］ 劉光斌，李懷彪.大黃通氣口服液的穩定性研究［J］.西部中醫藥，2013，26（11）：25-29.

［8］ 劉光斌，李懷彪，謝六生，等.大黃通氣口服液的質量標準研究［J］.中國中醫藥信息雜志，2011，18（7）：47-49.

Optimization of Water Extraction Process of Shugan Hewei Granules by Orthogonal Experiment

Wang Xiumei1，Liu Guangbin2，Mao Heping2，Ren Yuan3（1 Jiayuguang Institute for Food and Drug and Medical Device Control，Gansu Jiayuguang 735100，China；2 Jiugang Hospital；3 Gansu Chinese Traditional Medical College，Lanzhou 730000）

Objective：To provide a reference for the industrial production of water extract of shugan hewei granules by optimization the technological parameters of water extraction process.Methods：The technological parameters of water extraction process of shugan hewei granules was optimized by orthogonal experiment using 70% ethanol extract of dry residues of water extract as an indicater.Results：The process for water extraction was optizimed as extraction with 14 times of volumes of water for 2 times，1 hour for each.Conclusion：The optimized extraction process is stable and rational，which is of a guiding signifiance in the production of the drug.

Shugan Hewei Granules；Orthogonal Experiment；Water Extraction Process

10.3969/j.issn.1672-5433.2016.06.006

甘肅省嘉峪關市科技計劃項目（2014-38）

王秀梅，女，主管藥師。主要從事藥品檢驗工作。E-mail：867150917@qq.com

劉光斌，男，主任藥師。研究方向：醫院制劑、臨床藥學。通訊作者E-mail：jgyylgb@sina.com

2015-12-25）