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鹽脅迫下甘蔗根際土壤微生物量及其酶活性的效應分析

2016-08-06 07:52:49莫俊杰彭詩春葉昌輝周鴻凱
廣東農業科學 2016年6期

莫俊杰,彭詩春,葉昌輝,陳 妤,周鴻凱

(廣東海洋大學農學院,廣東 湛江 524088)

鹽脅迫下甘蔗根際土壤微生物量及其酶活性的效應分析

莫俊杰,彭詩春,葉昌輝,陳 妤,周鴻凱

(廣東海洋大學農學院,廣東 湛江 524088)

研究4個鹽脅迫梯度下4個甘蔗品種根際土壤微生物種群數量、酶活性及其相關性。結果表明:在鹽脅迫水平為0.0%、0.2%、0.5%、0.8%下,甘蔗根際土壤中的細菌、放線菌和真菌的數量及其脲酶、蔗糖酶、過氧化氫酶的活性均隨著鹽脅迫強度增加而明顯降低,尤其在有鹽與無鹽之間差異極顯著,表明甘蔗根際土壤中的微生物種群對鹽分敏感,它們生長受到抑制、數量急劇減少,土壤酶的活性亦是同樣的表現;相關、偏相關和典型相關分析表明,在鹽脅迫下,甘蔗根際土壤微生物及酶活性間有顯著的直線相關性和典型相關性,放線菌數量與蔗糖酶、過氧化氫酶活性,以及脲酶活性與蔗糖酶活性間有顯著的偏相關關系。

鹽脅迫;甘蔗;土壤微生物;土壤酶活性;相關性

莫俊杰,彭詩春,葉昌輝,等.鹽脅迫下甘蔗根際土壤微生物量及其酶活性的效應分析[J].廣東農業科學,2016,43(6):103-108.

土壤鹽化是影響作物生產的主要環境問題之一,目前全球約有7%的陸地正在發生不同程度的鹽化[1],約1/3 耕地受到鹽化影響[2]。鹽漬土在我國分布也相當廣泛,從熱帶到寒溫帶、濱海到內陸、濕潤地區到極端干旱的荒漠地區,均有大量鹽漬土的分布[3]。由于鹽漬土分布廣泛、農業地位重要,我國歷來高度重視鹽漬土的調查、利用和治理方面的研究工作[4]。而如何采取措施選育耐鹽性優良品種,降低鹽脅迫對植物的毒害或提高植物的耐鹽能力,是鹽漬土生物改良中的核心問題[5]。

甘蔗是生長在亞熱帶和熱帶地區的一種經濟作物,是我國最主要的糖料作物。我國甘蔗種植區特別是廣東、廣西沿海的耕地鹽漬化趨勢日益加?。?]。甘蔗屬中度耐鹽作物,一般在土壤含鹽量0.3%以下才能生長正常[7]。鹽害延遲了甘蔗的萌芽,影響甘蔗的發芽率和生長,降低了甘蔗鮮重和干重[8]。鹽脅迫是導致甘蔗產量和糖分下降的主要因素[9]。土壤微生物作為土壤生態系統的重要組成部分,推動土壤的碳、氮循環,而且還可以參加植物營養元素的轉化。土壤微生物種類及數量在很大程度上影響著微生物的活性。土壤鹽漬化不僅可以直接影響微生物的活性,還可以通過改變土壤的理化性質影響微生物的生存環境,從而影響微生物的種類和數量,而土壤中微生物的種類、數量及其動態變化在一定程度上能反映土壤有機質礦化速度及土壤供肥狀況。土壤酶參與土壤一系列復雜的生物化學反應,其中包括腐殖質的合成與分解、有機化合物和微生物殘體的水解等[10-13]。因此近年來越來越多學者認為,積極改善土壤微環境,充分協調土壤中微生物,有利于提高作物在逆境下的耐受能力。

本研究采用溫室盆栽法,研究鹽脅迫下4個甘蔗品種根際土壤微生物數量和土壤酶活性變化規律,旨在探討鹽脅迫下甘蔗根際土壤微生物及土壤酶的響應機制,為改良、開發鹽堿地提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗于2013年在廣東海洋大學農業生物研究所玻璃溫室進行,供試4個甘蔗品種為新臺糖1626(ROC1626)、粵糖83-117(YT83-117)、海大32(HD32)、新臺糖22(ROC22)等。

1.2 試驗方法

試驗采用桶栽方法,單因素4水平隨機區組試驗設計,使用直徑60 cm、高55 cm的膠桶(統一在膠桶底部中間打孔,直徑為2.0 cm),每桶裝土10 kg,每桶種植1個雙芽苗,基施復合肥30 g,4個鹽脅迫處理,3次重復,種植時間為2013年3月10日。試驗期間每桶施用同量的自來水保持土壤于濕潤狀態。

4個鹽脅迫處理分別為0.0%(CK)、0.2%、0.5%、0.8%,將氯化鈉按設置水平(以土壤重量計算)用1 000 mL自來水溶解混合后,于2013年5 月10日均勻澆于每個試驗桶中。

1.3 測定項目及方法

當甘蔗進入伸長期,即2013年7月10日,采用抖土法采集甘蔗根際0~20 cm耕層的土壤,每桶在甘蔗植株周邊15cm范圍內按三角式設置3個取樣點,分別取樣后混勻,過篩后四分法取樣,4℃保存備用。采用梯度稀釋法制備土壤懸液,采用涂抹平板計數法測定細菌(X1)、放線菌(X2)、真菌(X3)的數量,培養基分別為牛肉膏蛋白胨培養基、馬丁氏培養基、高氏一號培養基[14]。采用苯酚鈉比色法測定脲酶(Y1)活性,硫代硫酸鈉滴定法測定蔗糖酶(Y2)活性,高錳酸鉀滴定法測定過氧化氫酶(Y3)活性[15-16]。

試驗數據應用統計分析軟件SAS10.3在PC機上進行處理,用Duncan法測定差異顯著性。

2 結果與分析

2.1 鹽脅迫下甘蔗根際土壤微生物數量分析

從表1可以看出,4個甘蔗品種的根際土壤細菌數量均隨鹽脅迫水平的提高而顯著下降。與對照相比,0.2%、0.5%、0.8%處理不同甘蔗品種的根際土壤細菌數量依次下降,其中新臺糖22由245.0× 105CFU/g下降到14.7×105CFU/g,降幅達94.0%;粵糖83-117由206.3×105CFU/g下降到48.3×105CFU/g,降幅為76.6%;新臺糖1626、海大32土壤細菌數量下降趨勢居于新臺糖22和粵糖83-117之間。

隨著鹽脅迫強度的提高,4個甘蔗品種的根際土壤放線菌的數量也均呈下降趨勢,與對照相比,0.2%、0.5%、0.8%處理土壤放線菌數量顯著降低,且下降量依脅迫強度的增加而加大,品種間降幅有明顯的差異性,其中新臺糖22的降幅明顯高于粵糖89-117,海大32、新臺糖1626的土壤細菌數量下降趨勢居于新臺糖22和粵糖83-117之間。

真菌數量隨鹽分水平的變化趨勢與細菌一致,與對照相比,0.2%、0.5%、0.8%處理土壤真菌數量依次下降,其中新臺糖22由154.7×103CFU/g下降到21.9×103CFU/g,降幅達85.8%;而新臺糖1626由120.3×103CFU/g下降到36.3×103CFU/g,降幅為69.8%;海大32和粵糖83-117的土壤細菌數量下降趨勢,居于新臺糖22和粵糖83-117之間。

總體來看,4個甘蔗品種根際土壤細菌、放線菌、真菌數量均表現出在有鹽與無鹽之間差異極顯著,同時品種間也差異明顯。

2.2 鹽脅迫下甘蔗根際土壤酶活性分析

從表1可以看出,甘蔗根際土壤脲酶的活性隨著鹽濃度的升高而逐漸降低。與對照相比,0.2%、0.5%、0.8%處理不同甘蔗品種的根際土壤脲酶的活性依次下降,其中新臺糖1626由0.501 mg/g下降到0.136 mg/g,降幅達72.9%;粵糖83-117由0.325 mg/g下降到0.159 mg/g,降幅為51.1%;新臺糖22和海大32的下降幅度居于新臺糖1626和粵糖83-117之間。

甘蔗根際土壤蔗糖酶活性也是隨著鹽濃度的升高而逐漸降低。與對照相比,0.2%、0.5%、0.8%處理不同甘蔗品種的根際土壤蔗糖酶活性依次下降,其中新臺糖1626由7.23 mg/g下降到2.62 mg/g,降幅達63.8%;粵糖83-117由7.11 mg/g下降到4.75 mg/g,降幅為33.2%;新臺糖22和海大32的下降幅度居于新臺糖1626和粵糖83-117之間。

表1 鹽脅迫下甘蔗根際土壤微生物數量(CFU/g)和土壤酶活性(mg/g)的變化

表2 鹽脅迫下甘蔗根際土壤微生物數量、土壤酶活性間的直線相關及其偏相關系數

甘蔗根際土壤過氧化氫酶的活性與脲酶和蔗糖酶的活性變化趨勢一致,也是隨著鹽脅迫強度的增高而隨之下降的。4個甘蔗品種根際的過氧化氫酶活性變化趨勢大體相似,且品種間的差異也較大。

2.3 鹽脅迫下甘蔗根際土壤微生物種群數量與土壤酶活性的相關性分析

鹽脅迫下土壤細菌、真菌、放線菌(X1、X2、X3)種群數量和土壤脲酶、蔗糖酶、過氧化氫酶(Y1、Y2、Y3)活性間的直線相關性及其偏相關性分析結果見表2。從表2可以看出,鹽脅迫下4個甘蔗品種根際土壤細菌、放線菌、真菌數量之間,土壤脲酶、蔗糖酶、過氧化氫酶活性之間,土壤細菌、放線菌、真菌數量與土壤脲酶、蔗糖酶、過氧化氫酶活性之間均呈直線正相關關系,且其相關性均達顯著水平。然而,偏相關分析表明,只有放線菌數量與蔗糖酶、過氧化氫酶活性以及脲酶活性與蔗糖酶活性間的偏相關系數分別為0.626、0.617和0.581,才達到顯著水平,其他12個偏相關系數均未達顯著水平。這是由于偏相關分析消除了自變數相關的混淆,因而能夠表現出各個自變數和依變數的真實關系。這一結果表明,鹽脅迫條件下甘蔗根際土壤中的放線菌種群數量與土壤中的蔗糖酶、過氧化氫酶的活性及脲酶活性與蔗糖酶活性間有密切的正相關性和偏相關性。

表3表明,鹽脅迫下土壤微生物量因子與土壤酶活性因子組間有極顯著典型相關關系,其典型相關系數λ1=0.9524**,達極顯著水平。其典型變量構成中,U1以X1的權重系數的絕對值明顯大于X1、X1,V1以Y1的權重系數的絕對值獨大。說明鹽脅迫下土壤微生物量因子與土壤酶活性因子組間所具有的極顯著典型相關性,主要是由于土壤中放線菌數量與過氧化氫酶活性間相互作用所產生的相關效應。

表3 鹽脅迫甘蔗根際下土壤微生物量與土壤酶活性因素組間的典型相關性

3  結論與討論

3.1 鹽脅迫下甘蔗根際土壤微生物數量變化效應

近年來有許多植物相關微生物促進植物對鹽漬地的抗逆能力的研究報道,這種方法不僅能促進植物在鹽漬地上的生長,有些還能緩解土壤鹽漬化的程度[17-22]。周德平等[23]研究表明,在鹽脅迫試驗強度條件下,蔬菜地土壤細菌種群遭遇鹽脅迫后,生長受抑、數量減少,放線菌種群抗逆性強、數量上升,土壤真菌種群數量因細菌種群數量的減少而出現暫時性增長現象,但隨脅迫時間延長也呈現毒害效應,數量下降;鹽脅迫造成土壤微生物優勢種群演替和微生態失衡,細菌比例降低,真菌比例上升。張峰峰等[24]采用離體培養的方法研究表明,鹽脅迫并未影響紅絨蓋牛肝菌的生長,在高濃度( 0.6~0.8 mol/L ) 鹽脅迫下,該菌的生長速度和生物量顯著高于灰環粘蓋牛肝菌和灰鵝膏菌。這些研究都證明,部分種類的土壤微生物能夠耐受鹽脅迫的壓力,在一定的鹽分濃度范圍內能夠很好地存活,同時并能提高植物的耐鹽性。

本研究結果表明,在鹽脅迫水平為0.0%、0.2%、0.5%、0.8%情況下,甘蔗根際土壤中的細菌、放線菌和真菌的數量隨著鹽脅迫強度增加而明顯減少,尤其在有鹽與無鹽之間的差異極為顯著。shuoming 甘蔗根際土壤中的微生物種群對鹽分濃度變化十分敏感,土壤鹽脅迫改變了土壤微生物的生長繁殖環境,從而使其種群數量受到了影響,在鹽脅迫下,它們生長受到抑制、數量急劇減少。不同甘蔗品種間其根際土壤中的微生物數量之間也存在明顯的差異性。說明有的甘蔗品種其根際分泌物有利于土壤微生物種群的生長繁殖,改善土壤結構,促使甘蔗能更好地吸收養分而提高產量和蔗糖分,即可以通過選育一些能分泌有利于土壤微生物種群的生長繁殖的甘蔗品種,達到在獲得甘蔗高產的同時也改善土壤結構,而擴大甘蔗種植區域的效果。

3.2 鹽脅迫下甘蔗根際土壤酶活性的效應

土壤酶的來源、性質、活性特征及其影響因素等研究一直是土壤酶學研究的重點[25],土壤酶主要來自微生物和植物根系的分泌等途徑。土壤酶的活性催化動力學特征是土壤質量表征的重要量度,也是植物營養的土壤供應能力的主要指標,如土壤酶催化動力系數Km和Vax的變化與土壤理化性質、土壤肥力密切相關,可作為土壤肥力的指標等[26]。土壤中鹽分的增加不僅影響到植物的生長發育,而且對土壤自身的物理、化學性狀也產生不良效應[27]。土壤中酶活性的變化可以從一個方面反映土壤性狀的改變,原因是鹽分影響了土壤的理化性狀以及生長在其間的植株根系、枝葉對土壤產生一定的影響,包括土壤酶、微生物、腐殖質含量、肥力狀況等。周德平等[23]采用外源投加鹽分培養室模擬方法,研究發現鹽脅迫明顯抑制土壤脲酶和蛋白酶活性,抑制程度與外加鹽量呈正比,即鹽脅迫強度越大,土壤蛋白酶和脲酶活性越低;而土壤轉化酶和過氧化氫酶的活性在低鹽脅迫強度(外加鹽量為1 g/kg)時略高于對照組,但隨鹽脅迫強度的加重,轉化酶和過氧化氫酶活性相應降低,鹽含量越高,酶活性越低;土壤鹽脅迫強度與土壤脲酶、蛋白酶、轉化酶和過氧化氫酶活性均呈高度線性負相關,其中蛋白酶和轉化酶與鹽脅迫程度的相關性高且穩定。

本研究結果表明,在NaCl鹽脅迫濃度為0~0.8% 時,4個參試甘蔗品種根際的土壤脲酶、蔗糖酶和過氧化氫酶的活性均表現為隨著脅迫濃度的增大而降低,尤其是在有鹽與無鹽之間及脲酶活性表現更加明顯。而4個甘蔗品種根際土壤酶活性之間的差異也較為明顯,粵糖83-117的各種酶活性下降趨勢明顯較緩,新臺糖22的各種酶活性下降幅度較大,海大32和新臺糖1626受抑制程度相差不大,居于前兩者之間。

3.3 鹽脅迫下甘蔗根際土壤微生物種群數量與土壤酶活性的相關性

土壤酶活性是土壤生物性能的一種最穩定和最敏感的指標[28]。韓新忠等[29]研究表明,水稻產量與脲酶、過氧化氫酶、微生物碳、全氮和速效氮呈極顯著相關,表明土壤酶活性和微生物量碳在一定程度上能夠反應土壤肥力和土壤質量狀況,是描述土壤質量的良好指標。而胡海波等[30]的研究表明,土壤微生物數量與土壤酶活性之間存在著一定的相關性,因為土壤酶絕大多數來自于土壤微生物。其中,真菌數量對磷酸酶、脲酶和蛋白酶的影響很大,細菌和放線菌數量對蔗糖酶(轉化酶)有顯著影響。孫海等[31]對林下參土壤養分和酶活性的研究表明,林下參土壤中蔗糖酶和過氧化氫酶活性較高,這是因為森林土壤中有機質含量較高,連年的枯枝落葉向著腐殖化方向進行,這個過程必然導致土壤中酶活性升高,而蔗糖酶活性與微生物數量以及土壤呼吸強度都有關系。

蔗糖酶(轉化酶)是絕大多數微生物所固有的,與微生物數量的多少有直接關系。湯樹得[32]研究白漿土生物活性發現,脲酶、蔗糖酶(轉化酶)、過氧化氫酶與微生物的活動有直線型關系。孫翠玲等[33]對不同混交類型的楊樹混交林土壤微生物與酶活性關系的研究中發現,土壤細菌、真菌與脲酶、過氧化氫酶活性呈極顯著的負相關關系。

本研究結果表明,在鹽脅迫下甘蔗根際土壤細菌、放線菌、真菌數量、土壤脲酶、蔗糖酶、過氧化氫酶活性之間均呈達到了顯著水平以上的直線正相關關系。然而,偏相關分析表明,只有放線菌數量與蔗糖酶、過氧化氫酶活性,以及脲酶活性與蔗糖酶活性間的偏相關性才達到顯著水平,其他12個偏相關系數均未達顯著水平。說明在鹽脅迫下,甘蔗根際土壤放線菌數量與蔗糖酶、過氧化氫酶活性,以及脲酶活性與蔗糖酶活性間才呈現出真正的相關性,其他所表現出的相關顯著性是由于自變數相關的混淆所引起的,不是各個自變數和依變數的真實關系。進一步的典型相關分析表明,鹽脅迫下甘蔗土壤微生物量因子與土壤酶活性因子組間具有極顯著典型相關性,且主要是由于土壤中放線菌數量與過氧化氫酶活性間相互作用所產生的相關效應。

甘蔗品種間其根際土壤微生物數量和酶活性都存在較大的差異性,均對土壤鹽分脅迫反應非常敏感,因此,通過選擇適當的甘蔗品種可以提高鹽堿地土壤微生物數量和酶活性。相關、偏相關和典型相關分析表明,在鹽脅迫下,甘蔗根際土壤放線菌數量與蔗糖酶、過氧化氫酶活性,以及脲酶活性與蔗糖酶活性間才呈現出真正的相關性。因此,在作物施肥和實施土壤改善措施時,要充分考慮這些土壤生態指標的相關性,而達到良好的生態和經濟效果。

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(責任編輯 鄒移光)

Effects of salt stress on microbial biomass and enzyme activities in rhizospheric soil of sugarcane

MO Jun-jie,PENG Shi-chun,YE Chang-hui,CHEN Yu,ZHOU Hong-kai
(College of Agronomy,Guangdong Ocean University,Zhanjiang 524088,China)

This study measured the microbial population size,enzyme activity and their relationship in rhizospheric soil of sugarcane at four different salt stress levels with four sugarcane varieties as materials.The results showed that,under the salt stress levels of 0.0%,0.2%,0.5%,0.8%,the sugarcane rhizospheric soil bacteria,actinomycetes,fungi number and urease,sucrase,catalase enzyme activity reduced significantly with the increase of salt stress,especially the differences between salt stress and no salt stress were extremely significant.These indicated that the sugarcane rhizospheric soil microbial population was sensitive to salt stress,their growth inhibited,a sharp reduction was found in the number,and the soil enzyme activities had the same performances.Correlation,partial correlation and canonical correlation analysis showed that under saline stress,there was a significant linear correlation and canonical correlation between sugarcane rhizospheric soil microbial biomass and enzyme activity.There was a significant partial correlation between actinomycetes number and invertase,catalase activity,as well as urease activity and invertase activity.

salt stress;sugarcane;soil microbe;soil enzyme activity;correlation

S566.1;S154

A

1004-874X(2016)06-0103-06

10.16768/j.issn.1004-874X.2016.06.018

2016-01-05

國家自然科學基金(41073059);廣東省科技計劃項目(2013B020301005,2013B020301008)

莫俊杰(1980-),男,助理研究員,E-mail:104750343@qq.com

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