一測(cè)多評(píng)法測(cè)定厚樸飲片中厚樸酚與和厚樸酚含量

鄔偉魁　　嚴(yán)倩茹（梅州市食品藥品監(jiān)督檢驗(yàn)所，廣東 梅州　514071）

一測(cè)多評(píng)法測(cè)定厚樸飲片中厚樸酚與和厚樸酚含量

鄔偉魁嚴(yán)倩茹
（梅州市食品藥品監(jiān)督檢驗(yàn)所，廣東 梅州514071）

目的：建立厚樸飲片中厚樸酚與和厚樸酚含量的一測(cè)多評(píng)方法。方法：在《中國(guó)藥典》2010年版厚樸含量測(cè)定方法的基礎(chǔ)上，測(cè)定厚樸酚與和厚樸酚間的相對(duì)校正因子，考察其重現(xiàn)性，比較計(jì)算值與測(cè)得值的差異。結(jié)果：用一測(cè)多評(píng)法對(duì)5批厚樸飲片中厚樸酚與和厚樸酚進(jìn)行測(cè)定，與外標(biāo)法實(shí)測(cè)值基本一致。結(jié)論：該方法可靠，結(jié)果準(zhǔn)確，可用于厚樸飲片的質(zhì)量控制。

一測(cè)多評(píng)；厚樸；厚樸酚；和厚樸酚

厚樸為木蘭科植物厚樸（Magnolia officinalis Rehd.et Wils.）或凹葉厚樸（Magnolia offinalis Rehd.et Wils.var.biloba Rehd.et Wils.）的干燥干皮、根皮及枝皮。功能燥濕消痰，下氣除滿。用于濕滯傷中，脘痞吐瀉，食積氣滯，腹脹便秘，痰飲喘咳。《中國(guó)藥典》2010年版收載了厚樸中厚樸酚與和厚樸酚的含量測(cè)定方法［1］。一測(cè)多評(píng)法（QAMS）可在某些對(duì)照品不易得到或不穩(wěn)定的情況下，使用一個(gè)對(duì)照品輔以相對(duì)校正因子同步測(cè)定多成分的含量，已在中藥材及飲片質(zhì)量評(píng)價(jià)中廣泛應(yīng)用［2-6］。本實(shí)驗(yàn)以厚樸酚為內(nèi)參物，用QAMS測(cè)定厚樸飲片中厚樸酚與和厚樸酚。

1　儀器與試藥

高效液相系統(tǒng)（Agilent 1100；SHIMADZU LC-20AT，檢測(cè)器SPD-20A；SHIMADZU LC-20AT，檢測(cè)器SPD-M20A）；BP 211D電子分析天平（德國(guó)Sartorius公司）。厚樸（批號(hào)：20140203、20140309，廣東聯(lián)豐中藥飲片有限公司；批號(hào)：1404004、1501001，江西樟樹(shù)天齊堂中藥飲片有限公司）；姜厚樸（批號(hào)：14081907，江西彭氏國(guó)藥堂飲片有限公司）。厚樸酚對(duì)照品（批號(hào)：110729-200310，含量以 100%計(jì)）、和厚樸酚對(duì)照品（批號(hào)：110730-201011，含量以98.4%計(jì)）購(gòu)于中國(guó)食品藥品檢定研究院。甲醇為色譜純，水為超純水。

2　方法

2.1色譜條件

色譜柱為：Agilent ZORBAX SB-C18（250 mm× 4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：甲醇-水（78∶22）；檢測(cè)波長(zhǎng)為294 nm。理論板數(shù)按厚樸酚峰計(jì)算均應(yīng)不低于3 800。

2.2對(duì)照品溶液的制備

取厚樸酚與和厚樸酚對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇分別制成每 1 mL含厚樸酚40.56 μg、和厚樸酚26.62 μg的溶液，即得。

2.3供試品溶液的制備

取本品粉末（過(guò)三號(hào)篩）約0.2 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25 mL，搖勻，密塞，浸漬 24 h，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液 5 mL，置25 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

2.4測(cè)定法

分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各4 μL，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。本實(shí)驗(yàn)參照《中國(guó)藥典》2010年版中厚樸的含量測(cè)定［1］條件，方法成熟，故不做加樣回收率試驗(yàn)等方法學(xué)考察。

3　 QAMS系統(tǒng)適用性考察

3.1不同含量考察

取厚樸酚與和厚樸酚對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成系列混合溶液，考察含量對(duì)相對(duì)校正因子的影響，見(jiàn)表1。

表1　　不同含量的相對(duì)校正因子

3.2色譜柱考察

取“2.2”項(xiàng)下的混合對(duì)照溶液，在Agilent 1100高效液相色譜儀上進(jìn)樣，以厚樸酚為內(nèi)標(biāo)，計(jì)算和厚樸酚對(duì)厚樸酚的相對(duì)校正因子，考察了柱①：Ailent ZORBAX SB-C18（250 mm×4.6 mm，5 μm），柱②：SIMADZU VP-ODS（250 mm×4.6 mm，5 μm），柱③：SHIMADZU VP-ODS（150 mm×4.6 mm，5 μm），柱④：依利特Kromasil C18（200 mm×4.6 mm，5 μm）4種色譜柱對(duì)相對(duì)校正因子的影響，結(jié)果見(jiàn)表2，不同色譜柱的相對(duì)校正因子基本一致。

表2　　不同色譜柱的相對(duì)校正因子

3.3高效液相色譜儀考察

考察了 Agilent 1100、SHIMADZU LC-20AT（檢測(cè)器SPD-20A）、SHIMADZU LC-20AT（檢測(cè)器SPD-M20A）3臺(tái)高效液相色譜儀對(duì)相對(duì)校正因子的影響，結(jié)果見(jiàn)表3，不同液相色譜系統(tǒng)所得相對(duì)校正因子基本一致。

表3　　不同液相色譜的相對(duì)校正因子

3.4色譜峰專屬性考察

利用相對(duì)保留時(shí)間進(jìn)行定位，即以和厚樸酚色譜峰與厚樸酚色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間來(lái)確定，厚樸酚與和厚樸酚峰相對(duì)保留時(shí)間的平均值為1.37，RSD為1.3%，見(jiàn)表4。

表4　2種成分的相對(duì)保留時(shí)間

4　樣品測(cè)定

用QAMS對(duì)5批樣品中厚樸酚與和厚樸酚進(jìn)行測(cè)定，用3種方法對(duì)計(jì)算值與外標(biāo)法實(shí)測(cè)值進(jìn)行比較：①Q(mào)AMS計(jì)算值和實(shí)測(cè)值之間的夾角余弦值［2］為0.999 999，表明兩種方法測(cè)得結(jié)果沒(méi)有顯著性差異。②用配對(duì)t檢驗(yàn)［7］比較兩種方法所得結(jié)果，P=0.1＞ 0.05，表明結(jié)果沒(méi)有顯著性差異。③兩種方法測(cè)定5批樣品結(jié)果的RSD在0.0～2.0%，認(rèn)為結(jié)果基本一致。見(jiàn)表5。

表5　　厚樸酚與和厚樸酚的測(cè)定（n=2）

5　討論

QAMS同時(shí)測(cè)定黃連［1］中小檗堿等5個(gè)成分含量、丹參［8］中3個(gè)丹參酮類成分含量的方法已被《中國(guó)藥典》2010年版收載。部分對(duì)照品不易得到、不穩(wěn)定或價(jià)格昂貴，QAMS給質(zhì)量控制帶來(lái)便利，可降低檢驗(yàn)成本。中藥材及飲片生產(chǎn)與監(jiān)督環(huán)節(jié)中每年需要消耗大量的對(duì)照品。厚樸酚對(duì)照品（20 mg/支）為 164元，和厚樸酚對(duì)照品（20 mg/支）為252元。基于現(xiàn)行《中國(guó)藥典》含量測(cè)定方法，建立厚樸的QAMS，對(duì)照品耗費(fèi)可降低約60%。本實(shí)驗(yàn)以厚樸酚為內(nèi)參物，采用QAMS測(cè)定厚樸中厚樸酚與和厚樸酚的含量，方法可行，降低了檢驗(yàn)成本。

［1］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（一部）［S］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：235，285.

［2]王智民，高慧敏，付雪濤，等.“一測(cè)多評(píng)”法中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)模式方法學(xué)研究［J］.中國(guó)中藥雜志，2006，31（23）：1925-1928.

［3］高慧敏，宋宗華，王智民，等.適合中藥特點(diǎn)的質(zhì)量評(píng)價(jià)模式——QAMS研究概述［J］.中國(guó)中藥雜志，2012，37（4）：405-416.

［4]陳建維，劉圓，劉晟楠，等.一測(cè)多評(píng)法測(cè)定枳實(shí)中4種黃酮類成分［J］.中草藥，2015，46（9）：1374-1377.

［5］劉圓，魏惠珍，龔建平，等.一測(cè)多評(píng)法測(cè)定健脾丸中4種黃酮類成分［J］.中成藥，2015，37（5）：995-999.

［6]王智民，錢(qián)忠直，張啟偉，等.一測(cè)多評(píng)法建立的技術(shù)指南［J］.中國(guó)中藥雜志，2011，36（6）：657.

［7］柏冬，范斌，牛曉紅，等.HPLC-系統(tǒng)內(nèi)標(biāo)法測(cè)定桂枝湯中芍藥苷、甘草苷、肉桂酸、桂皮醛和甘草酸［J］.中草藥，2010，41（3）：387-390.

［8］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典2010年版第三增補(bǔ)本［S］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2014：63.

Content Determination of Magnolol and Honokiol in Magnoliae Officmalis Cortex by Quantitative Analysis of Multi-components by Single-marker

Wu Weikui，Yan Qianru（Meizhou Institute for Food and Drug Control，Guangdong Meizhou 514071，China）

Objective：To develop a method of quantitative analysis of multi-components by single marker （QAMS）for determination of magnolol and honokiol in magnoliae officmalis cortex.Methods：Based on the method in Chinese Pharmacopoeia（2010 edition），the relative correction factor of honokiol was determined using magnolol as an internal reference substance，the method was evaluated for reproducibility，and the difference between calculated and measured values was compared.Results：The quantitative results of five batches of magnoliae officmalis cortex by QAMS was basically consistent with that by external standard method.Conclusion：The QAMS method was reliable and accurate，which might be used for the quality control of magnoliae officmalis cortex.

Quantitative Analysis of Multi-components by Single Marker（QAMS）；Magnoliae Officmalis Cortex；Magnolol；Honokiol

10.3969/j.issn.1672-5433.2016.01.005

鄔偉魁，男，碩士，主管中藥師。主要從事藥品質(zhì)量研究工作。E-mail：weikuiwu@qq.com

2015-08-12）