腦脊液培養常見細菌及耐藥狀況回顧性調查研究

魏峰

【摘要】 目的 研究腦脊液培養細菌的陽性結果， 并分析其耐藥狀況。方法 選取468份腦脊液標本， 對其進行細菌培養與鑒定， 并檢測其耐藥狀況， 統計細菌的陽性結果與藥敏情況。結果 468份腦脊液標本中， 陽性檢出率為17.7%， 以革蘭陽性菌（65.1%）為主， 其次為革蘭陰性菌（33.7%）、真菌（1.20%）。革蘭陽性菌其對利奈唑烷、萬古霉素的敏感性高， 對頭孢唑啉、氨芐西林則表現為高耐藥性。革蘭陰性菌主要為鮑曼不動桿菌， 對替加環素、阿米卡星的敏感性較高， 對亞胺培南、頭孢菌素類的耐藥性高。結論 腦脊液培養菌群中以革蘭陽性菌為主， 常見的為凝固內陰性葡萄球菌、革蘭陽性桿菌。監測并探討腦脊液常見細菌及耐藥狀況， 為抗菌藥物的治療以及中樞神經系統（CNS）感染疾病的預防做出了積極貢獻。

【關鍵詞】 中樞神經系統；耐藥性；病原菌；細菌培養

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.16.120

因顱內感染發病迅速且具有高病死率， 顱內感染的控制是CNS感染疾病的研究重點。臨床診斷治療顱內感染的重要依據是腦脊液標本的細菌培養以及藥敏試驗， 同時， 也為抗菌藥物的合理使用與規劃、臨床療效的提高提供了指導性意見[1]。本文回顧性分析了本院采集的468份腦脊液標本培養結果， 監測討論腦脊液常見細菌及耐藥狀況， 取得了較為滿意的結果， 現報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院2012年2月～2015年5月采集的468份腦脊液標本， 其中男252例， 女216例， 年齡1個月～75歲， 平均年齡（45.8±8.9）歲。通過腰椎穿刺方法采取腦脊液標本， 送至微生物室進行培養。

1. 2 試劑與儀器 采用由法國生物梅里埃公司提供的全自動微生物鑒定儀（型號為VITEK-2 ）， 以及其配套試劑， 包括GPI、GNI+、GPS-110、GNS-143、YBC鑒定卡與藥敏卡。同時采用全自動培養儀以及配套厭氧瓶與需氧瓶。而培養基、觸酶試劑、氧化酶購自秦皇島正澤公司。

1. 3 方法 無菌采集3～5 ml腦脊液， 并置入培養瓶中， 放入全自動培養儀中恒溫35℃培養24 h， 觀察記錄結果。當儀器警報系統顯示出現陽性瓶時， 用革蘭染色法涂片檢查菌群， 同時接種于血培養基， 在濃度為5%的CO2培養基中恒溫培養， 時間為18～24 h， 若菌群繼續生長則進行機鑒定與藥敏試驗；當儀器警報系統顯示出現陰性瓶時， 接種于血培養基， 在濃度為5%的CO2培養基中恒溫培養， 時間為48 h， 仍為無菌生長， 則報告為無細菌生長。參照《全國臨床檢驗操作規程》第3版操作。通過全自動微生物鑒定儀分離所得菌群對其鑒定， 同時進行藥敏試驗， 藥敏試驗結果以美國臨床與實驗室標準化協會（CLSI）制定的標準為依據。對于同一患者的相同菌種在10 d內記為一種， 藥敏試驗不需要重復。

2 結果

2. 1 病原菌陽性率與科室分布情況 468份腦脊液標本中陽性檢出率為17.7%（83株病原菌）， 其中包括54株革蘭陽性菌（65.1%）， 以凝固內陰性葡萄球菌為主， 其次為革蘭陽性桿菌、淺綠氣球菌、草綠色鏈球菌、副血鏈球菌等；28株革蘭陰性菌（33.7%）， 以鮑曼不動桿菌為主， 其次為陰溝腸桿菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌等；1株真菌（1.2%）， 主要為新型隱球菌。病原菌的分布情況如下：分布在神經外科（30株， 36.1%）， 其次為外科重癥加強護理病房（ICU）（26株， 31.3%）、內科ICU（11株， 13.3%）、神經內科（10株， 12.0%）、兒科及其他科室（6株， 7.2%）。

2. 2 革蘭陽性菌藥敏率 革蘭陽性菌以凝固酶陰性葡萄球菌為主， 其對利奈唑烷、呋喃妥因以及萬古霉素的敏感性高， 分別為93.6%、85.1%、100.0%， 而對于頭孢唑啉、氨芐西林則表現為100.0%的耐藥性。

2. 3 革蘭陰性菌藥敏率 革蘭陰性菌主要為鮑曼不動桿菌， 其對替加環素、阿米卡星的敏感性較高， 分別為86.2%、72.5%， 而對于亞胺培南、哌拉西林、慶大霉素、左氧氟沙星、頭孢菌素類的耐藥性在71.4%～100.0%。其他革蘭陰性菌有陰溝腸桿菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌。陰溝腸桿菌對阿米卡星、頭孢他啶、碳青霉烯類、頭孢吡肟、左旋氧氟沙星、慶大霉素的敏感性較高， 均為100.0%， 而對頭孢唑啉以及氨芐西林的耐藥性達到了100.0%；大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對阿米卡星、碳青霉烯類、頭孢他啶、頭孢吡肟的敏感性較高， 而對氨芐西林的耐藥性達到了100.0%。

3 討論

CNS感染疾病因病死率高， 早期診斷治療對患者來說意義重大。腦脊液標本的培養結果是否呈陽性是CNS感染的重要診斷依據。在流行病學的分布上， 病原菌隨著地區、機構的不同而不同[2]。近年來， 因濫用抗菌素導致病原菌的耐藥性普遍提高， 知曉本地區病原菌流行病學特征對臨床合理使用抗生素不可或缺。本次研究結果顯示， CNS感染的主要病原菌為大腸埃希菌、鮑曼不動桿菌與凝固內陰性葡萄球菌， 表明了分離菌主要是在醫院通過獲得性感染。在本次研究結果中， 腦膜炎奈瑟菌、肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌的陽性率低， 但并不代表其感染率低， 可能與其體外培養條件嚴苛有關。

本研究結果顯示， 病原菌的主要分布場所為神經外科， 這可能與此區患者手術操作較多， 更容易感染病原菌有關。外科ICU的病原菌多為耐藥性較強， 可能與此區患者長期應用抗生素治療有關。革蘭陽性菌中主要的凝固酶陰性葡萄球菌對多種抗生素的耐藥性嚴重， 應在臨床應用中控制其使用， 并正確選擇抗生素。而陰性菌中以鮑曼不動桿菌為主， 其次為陰溝腸桿菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌， 表現為多重耐藥性， 機制復雜。其中陰溝腸桿菌可產生Ⅰ類頭菌素酶與超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs）[3]， 可通過轉導與轉化的方式引起ESBLs類細菌的泛濫。

綜上所述， 腦脊液培養菌群中以革蘭陽性菌為主， 常見的為凝固內陰性葡萄球菌、革蘭陽性桿菌。監測并探討腦脊液常見細菌及耐藥狀況， 為抗菌藥物的治療以及CNS感染疾病的預防做出了積極貢獻。

參考文獻

[1] 林曉， 黃東煜， 張昕， 等. 2008-2010年住院患者不發酵糖菌分布及耐藥性分析.國際呼吸雜志， 2013， 33（8）：583-586.

[2] 楊秀芬， 王彥霞， 張征， 等. 2005-2010年我院感染細菌分布特點及變遷分析.臨床薈萃， 2011， 26（19）：1704-1706.

[3] 安寶清， 王金俠， 唱麗敏. 320株鮑曼不動桿菌的臨床分布及耐藥性分析.臨床薈萃， 2011， 26（17）：1534-1536.

[收稿日期：2015-12-30]