Livin基因與宮頸癌前病變及宮頸癌關系的研究

曾艷　梁桂云

【摘要】 目的 探討凋亡抑制基因 Livin與宮頸癌前病變及宮頸癌的關系。方法 64例宮頸癌、56例宮頸上皮內瘤變和 32例正常宮頸患者作為研究對象。用免疫組織化學 SABC法進行Livin 基因表達檢測， 比較三者之間表達的差異， 探討Livin 表達與正常宮頸、宮頸上皮內瘤變及宮頸癌患者的病理相關關系。結果 宮頸癌、宮頸上皮內瘤變及正常宮頸組織中 Livin的表達率分別為70.3%（45/64）、57.1%（32/56）、0（0/32）， 三者比較差異有統計學意義（P<0.05）。Livin在宮頸癌組織與宮頸上皮內瘤變組織中的表達率比較差異無統計學意義（P>0.05）。Livin基因表達與宮頸癌的淋巴結轉移及宮頸癌的臨床分期具有相關性（r=0.56、0.52， P<0.05）。Livin基因表達與宮頸癌的病理分型、病理分級、患者年齡無明顯相關性（P>0.05）。結論 Livin 基因在宮頸癌的發生中具有抑制腫瘤細胞凋亡的作用， 可以做為宮頸癌診斷及預后的相關指標。

【關鍵詞】 Livin基因；宮頸上皮內瘤變；宮頸癌

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.16.070

Livin是近年來發現的人類凋亡抑制蛋白 （IAP）家族的新成員之一， 認為與腫瘤的發生、進展及預后有密切聯系。Livin蛋白能夠與 Caspase蛋白結合， 抑制細胞凋亡， 對Livin研究在腫瘤發生、發展及預后有著重要的作用[1]。本研究擬采用免疫組化方法探討 Livin在宮頸癌組織中及正常宮頸組織中的表達， 并研究其與年齡、組織類型、病理分級、臨床分期、淋巴結轉移等臨床生物學行為及預后之間的關系和其臨床意義， 現報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取 2004～2012年本院治療的 64例宮頸癌患者， 年齡 35～72歲， 平均年齡 （51.7±6.8）歲， 組織學分型為宮頸鱗癌；臨床分期：Ⅱa期14例， Ⅱb期8例， Ⅲa期42例；病理分型：潰瘍型 8例， 結節型16例， 菜花型 24例， 混合型16例。宮頸上皮內瘤變患者56例， 另選取 32例正常宮頸組織患者作為對照。

1. 2 實驗方法 切取活組織檢查標本， 用 10%甲醛固定， 石蠟包埋后切片。采用SABC。一抗為兔抗人 Livin多克隆抗體 （武漢博士德公司）， 用 PBS液作為陰性對照。采用免疫組化染色。免疫組化方法參照 SABC試劑盒說明進行， Livin 多克隆抗體按 1∶50 稀釋， 主要試劑為 Livin 多克隆兔抗人抗體， SABC試劑盒 （武漢博士德公司）。

1. 3 評價標準 觀察宮頸上皮組織或宮頸癌組織切片病變位置染色， 參考 Kawasaki 等[2]報道的方法計算各指標表達程度， 依染色程度將陽性信號分為 3類 ：染色強度弱、染色強度強、染色強度中等。

1. 4 統計學方法 采用 SPSS19.0統計學軟件進行統計分析。計數資料以率 （%）表示， 采用 χ2檢驗；相關性采用 Spearman相關分析。P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2. 1 Livin表達情況 Livin的陽性表達為棕黃色陽性反應， 在細胞胞漿及少部分胞核也有不同程度著色。宮頸癌、宮頸上皮內瘤變及正常宮頸組織中 Livin的表達率分別為70.3%（45/64）、57.1%（32/56）、0（0/32）， 三者比較差異有統計學意義（P<0.05）。Livin在宮頸癌組織與宮頸上皮內瘤變組織中的表達率比較差異無統計學意義（P>0.05）。

2. 2 Livin的相關性 Livin基因表達與宮頸癌的淋巴結轉移及宮頸癌的臨床分期具有相關性（r=0.56、0.52， P<0.05）。Livin基因表達與宮頸癌的病理分型、病理分級、患者年齡無明顯相關性 （P>0.05）。

3 討論

Livin是新發現的人類凋亡抑制蛋白， 同其他凋亡抑制蛋白相似， Livin可通過抑制凋亡抑制通路中 Caspase 3、7的活性， 發揮抑制腫瘤細胞凋亡的作用， 在已經發現的一些腫瘤組織如乳腺癌、胃腸癌等腫瘤組織中高表達。凋亡抑制蛋白是細胞凋亡抑制因子家族新成員， 它能夠抑制細胞凋亡， 促進腫瘤細胞形成及增長[3]。

本文通過對宮頸癌 Livin基因表達與臨床病理的關系研究表明， 宮頸癌的腫瘤病理分型、病理分級與 Livin基因表達程度無明顯相關關系（P>0.05）；Livin基因表達與宮頸癌的淋巴結轉移及宮頸癌的臨床分期具有相關性（P<0.05）， 說明Livin在宮頸癌的細胞凋亡過程中產生重要抑制作用， 并促進了腫瘤細胞的不斷增殖。對于宮頸良性病變發展為上皮內瘤變的病例， 應密切監測 Livin表達情況， 有利于指導臨床早期診斷及早期治療。

在淋巴結轉移的宮頸癌病例中， 宮頸癌組織中 Livin 高表達， 提示對于宮頸癌組織中 Livin 高表達的病例， 應實施手術、化療、生物治療等綜合治療， 最大程度提高腫瘤生存率。凋亡抑制蛋白 Livin在宮頸癌的演近過程中， 抑制細胞凋亡活動增強， 對其進行檢測可以做為判定宮頸癌發生及預后的重要指標。目前對 Livin 的研究仍有許多問題尚未闡明， 通過反義阻斷或 Si-RNA技術， 降低 Livin 表達， 能否逆轉宮頸癌細胞增殖， 促進腫瘤細胞凋亡， 成為宮頸癌治療的新途徑， 有待進一步研究證實。

總之， Livin 基因在宮頸癌的發生中具有抑制腫瘤細胞凋亡的作用， 可以做為宮頸癌診斷及預后的相關指標。

參考文獻

[1] Ka H， Hunt JS. Temporal and spatial patterns of expression of inhibitors of apoptosis in human placentas. Am J Pathol， 2003， 163（2）：413-422.

[2] Kawasaki H， Altieri DC， Lu CD， et al. Inhibition of apoptosis by survivin predicts shorter survival rates in colorectal cancer. Cancer Res， 1998， 58（22）：5071-5074.

[3] 吳曉梅， 袁濤. Survivin、Livin、CD44v6在宮頸癌以及癌前病變中的表達及其臨床意義. 中國老年學雜志， 2014， 34（3）：660-662.

[收稿日期：2016-01-26]