HDAC3和HDAC5在乳腺癌中的表達與臨床病理特征意義

林俊杰,楊昭婷,玄延花,倪衛東,王麗強

(1.延邊大學 2013級口腔醫學專業，吉林 延吉133002；2.延邊大學醫學院 病理學教研室；3.吉林大學中日聯誼醫院)

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HDAC3和HDAC5在乳腺癌中的表達與臨床病理特征意義

林俊杰1,楊昭婷2,玄延花2,倪衛東2,王麗強3*

(1.延邊大學 2013級口腔醫學專業，吉林 延吉133002；2.延邊大學醫學院 病理學教研室；3.吉林大學中日聯誼醫院)

近幾年來,我國乳腺癌患者以每年21萬例的增長速度成為女性最常見惡性腫瘤中的第一位[1]。有效的治療乳腺癌,對于保障女性的生命與健康意義重大。準確的估計乳腺癌患者的預后情況，對于指導乳腺癌患者的個體化靶向治療具有很大幫助。所以，研究乳腺癌患者預后的相關影響因素迫在眉睫。

研究發現組蛋白去乙酰化酶(HDACs)在乳腺癌的發生、演進過程中具有重要作用。其中HDAC3屬于Ⅰ類HDACs，HDAC5屬于Ⅱ類HDACs，HDAC3和HDAC5均可通過催化生理過程中的關鍵蛋白,從而影響腫瘤的發生與發展。研究表明HDAC3在浸潤性乳腺癌組織中高表達[2]，為進一步研究HDAC3和HDAC5在乳腺癌組織中的表達情況與患者預后的關系，本研究共選取29例乳腺組織和124例乳腺癌組織，通過免疫組化EnVision法測定HDAC3和HDAC5在乳腺癌組織中表達的情況，并從表觀遺傳學角度探討其與臨床病理特征及預后的關系。

1材料與方法

1.1材料本研究選取延邊大學醫院病理科1998-2008年的正常乳腺組織29例和乳腺癌組織存檔蠟塊標本124例。124例乳腺癌組織中患者年齡≤50歲84例，年齡>50歲40例；根據AJCC 2009年腫瘤的分期標準，124例乳腺癌組織中TNM分期：Ⅰ期31例；Ⅱ期54例；Ⅲ期39例；124例乳腺癌組織中,淋巴結轉移陽性的有64例,淋巴結轉移陰性的有60例。依據在第十三屆St.Gallen國際專家共識推薦的乳腺癌分子分型標準,本組124例乳腺癌病變組織分4型,Luminal A型22例,Luminal B型72例,HER-2過表達型21例,三陰性型9例。

1.2免疫組織化學染色免疫組織化學染色采用EnVision法,免疫組化EnVision檢測試劑盒購自DAKO公司,HDAC3、5均購自 Cell Signaling Technology公司。染色步驟按免疫組化DAB染色常規操作步驟進行。為證明免疫組化檢測的特異性,實驗中應用了兔IgG代替一抗作為對照,結果為陰性。

1.3染色結果判定標準棕褐色的陽性顆粒位于細胞核和(或)細胞質中。以陽性染色細胞數所占的百分比作為主要分類依據,將染色結果分為兩類:陽性和陰性。陽性細胞數超過20%為陽性，陽性細胞數低于20%為陰性。

1.4統計學方法統計學分析采用SPSS19.0軟件進行，實驗數據之間的參數比較采用χ2檢驗，同時應用Kaplan-Meier法繪制HDAC3和HDAC5的表達與患者術后生存時間曲線的關系圖，P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

HDAC3和HDAC5主要表達于乳腺癌組織的細胞核及細胞質中。HDAC3和HDAC5在正常乳腺組織和乳腺癌組織中的表達見表1，與臨床病理特征的關系見表2。HDAC3(P=0.004)和HDAC5(P=0.012)表達陽性的乳腺癌患者的總生存率明顯低于陰性者(圖1)。

表1　HDAC3和HDAC5在正常乳腺組織及乳腺癌組織中的表達情況

表2　HDAC3和HDAC5在乳腺癌組織中的表達與臨床病理特征的關系

3討論

表觀遺傳學(Epigenetics)是指在基因編碼的DNA序列不變的前提下，通過某些機制而產生的可遺傳的細胞表型或基因表達改變的科學。組蛋白的修飾是引起表觀遺傳學改變的主要機制之一，組蛋白的乙酰化修飾在腫瘤的發生發展過程中扮演著重要角色。組蛋白的乙酰化修飾離不開HDACs,而HDACs可以影響多種癌基因或抑癌因子的表達，進而導致細胞的惡性增殖和腫瘤的發生[3]。在本研究中，我們發現HDAC3和HDAC5在乳腺癌組織中高表達，并且二者的表達跟乳腺癌患者淋巴結轉移及較差的預后有關系。

圖1　HDAC3和HDAC5蛋白表達與乳腺癌患者總生存率之間的關系

Mariadason等[4]研究報道證實與鄰近的正常組織相比，HDAC3在腫瘤組織中高表達，并且下調HDAC3的水平將導致腫瘤細胞存活的減少。在本研究中，我們發現HDAC3在乳腺癌組織中的陽性表達率明顯高于正常的乳腺組織，這說明HDAC3可能是乳腺腫瘤形成與發展的一個重要危險因素。Wilko等[5]研究表明HDAC3在胃癌組織中高表達，并且其預示與淋巴結轉移和較差的預后顯著相關。以上研究結果與本研究結果相近，HDAC3在乳腺癌組織中高表達，與淋巴結轉移和較差的預后具有相關性，提示HDAC3可以作為評價乳腺癌患者預后的一個重要參考因素。但是，Krusche等[6]研究報道認為 HDAC3的表達與乳腺癌患者預后無關，并不影響患者的無病生存期和總生存期。其結果與本研究結果不一致，HDAC3 在腫瘤組織中的表達在不同的研究中存在較大差異,他們真正的關系還需要進一步去研究揭露。

Milde等[7]的研究報道與低風險的髓母細胞瘤相比,HDAC5在高風險的髓母細胞瘤高表達，并且與較差的預后具有相關性。我們也發現，HDAC5在乳腺癌組織中的陽性表達率高于正常的乳腺組織，并且HDAC5表達陽性的乳腺癌患者其總生存率也明顯低于陰性者。在體外胃癌細胞系研究中，Lee等[8]發現HDAC5在促進胃癌的侵襲及轉移方面具有重要作用。通過本實驗，我們推測HDAC5可能參與乳腺癌的遷移，因為它在淋巴結轉移陽性的乳腺癌患者中的陽性表達率明顯比陰性組高，具體機制需要進一步研究。以上結果說明HDAC5在乳腺癌患者中高表達，并且與患者淋巴結轉移、較差的預后具有相關性。

綜上所述，HDAC3和HDAC5在乳腺癌組織中過表達，并與患者淋巴結轉移、較差的預后密切相關。因此，對于乳腺癌患者,分析HDAC3和HDAC5的表達情況對評價患者的預后具有一定的參考價值。

參考文獻：

[1]陳萬青，張思維，曾紅梅，等.中國 2010 年惡性腫瘤發病與死亡[J].中國腫瘤,2014,23(1):1.

[2]Müller BM，Jana L，Kasajima A,et al.Differential expression of histone deacetylases HDAC1，2 and 3 in human breast cancer-overexpression of HDAC2 and HDAC3 is associated with clinicopathological indicators of disease progression[J].BMC Cancer,2013,13:215.

[3]Cress WD,Seto E.Histone deacetylases,transcriptional control,and cancer[J].Cell Physiol,2000,184(1):1.

[4]Mariadason JM.Dissecting HDAC3-mediated tumor progression[J].Cancer Biol Ther,2008,7(10):1581.

[5]Weichert W R,Ske A,Gekel V,et al.Association of patterns of class I histone deacetylase expression with patient prognosis in gastric cancer:a retrospective analysis[J].Lancet Oncology,2008,9(2):139.

[6]Krusche CA,Wülfing P,Kersting C,et al.Histone deacetylase-1 and-3 protein expression in human breast cancer:a tissue microarray analysis[J].Breast Cancer Res Treat,2005,90(1):15.

[7]Milde T,Oehme I,Korshunov A,et al.HDAC5 and HDAC9 in medulloblastoma:novel markers for risk stratification and role in tumor cell growth[J].Clin Cancer Res,2010,16(12):3240.

[8]Lee KH,Choi EY,Kim MK,et al.Inhibition of histone deacetylase activity down-regulates urokinase plasminogen activator and matrix metalloproteinase-9 expression in gastric cancer[J].Mol Cell Biochem,2010,343(1-2):163.

*通訊作者

文章編號：1007-4287(2016)06-1001-03

(收稿日期：2015-08-21)