GC—MS測定蒜頭果油中的脂肪酸含量

張茜　譚瑜　李雁群　鐘敏　胡雪瓊

摘要[目的]分析廣西特色植物蒜頭果（Malania oleifera）油脂中保健性脂肪酸的含量，探討利用蒜頭果種質資源開發保健油脂的價值。[方法]從廣西巴馬采集成熟蒜頭果果實，取新鮮的蒜頭果果仁，破碎并經凍干制成干粉，再用石油醚采用索氏提取法提取油脂，提取的油脂經硫酸-甲醇甲酯化后用GCMS分析各種脂肪酸含量。[結果]蒜頭果果仁油脂含量達65%（對果仁重）；油脂中神經酸含量高達50.71%（占總脂肪酸）；油酸和亞麻酸含量達36.56%。[結論]蒜頭果油脂含有豐富的保健性脂肪酸，具有很高的利用價值，是生產保健油脂的極好資源。

關鍵詞 神經酸；蒜頭果；脂肪酸組成；GCMS

中圖分類號 S789.5 文獻標識碼 A 文章編號 0517-6611（2016）05-015-03

Abstract[Objective]The aim was to analyze the functional fatty acid composition in Malania oleifera fruit oil， discuss development and utilization value of germplasm resources.[Method]Selecting mature fruit from Bama， Guangxi， nut of fresh fruit was smashed and lyophilized to make dry powder， and then the dried fruit powder was extracted with petroleum ether in a Soxhlet extractor. The oil was gained by distilling the solvent under reduced pressure from the extract. The extracted oil was transesterified by sulfuric acid and methanol. The fatty acid methyl esters of the oil were analyzed by GCMS.[Result]The results showed that the oil content was above 65% in the fruit nut. Particularly， the content of nervonic acid was special high reaching at 50.71% approximately； moreover， the content of oleic acid and linolenic acid reached to 36.56%.[Conclusion]Malania oleifera oil contains abundant functional fatty acid with high utilization value， which is an excellent resource for production of functional edible oil.

Key words Nervonic acid； Malania oleifera； Fatty acid composition；GCMS

蒜頭果（Malania oleifera Chun et S.Lee）為一種常綠喬木，屬于鐵青樹科（Olacaceae）蒜頭果屬，主要分布于廣西樂山、隆林、凌云、鳳山、巴馬、百色等地和云南富寧、廣南、文山一帶，是一種稀有植物，為國家二級保護植物[1]。蒜頭果油中神經酸含量很高，為總脂肪酸的65%左右[2]。了解蒜頭果油的脂肪酸組成，對于探討其作為保健性食用油脂和對其基因資源的利用具有重要意義。神經酸（nervonic acid，NA）最早發現于哺乳動物的神經組織中，化學名為順15二十四碳單烯酸（cis15tetracosenic acid），又名鯊魚酸（selacholeic acid），是一種長鏈單不飽和脂肪酸。

然而，到目前為止，在世界范圍內尚未有大規模的生產技術，少量的神經酸主要從有限的植物資源中提取，或者從菜籽油中提取含量極低的神經酸。神經酸最初是從鯊魚中大量提取。目前發現的神經酸含量較高的植物有銀扇草、琉璃苣、大麻和一些槭科植物的種子，但這些植物產量低不足以用來生產神經酸。蒜頭果種子含油量高，脂肪酸組成中神經酸含量也高[2]。隨著我國社會老齡化的到來，未來在諸如老年癡呆等涉及神經系統的老年疾病患者人數會大量增加，提高神經系統的健康狀況十分迫切。

王建民等[3]對其神經酸功能進行研究，發現神經酸可以恢復神經末梢活性，促進神經細胞的生長發育。研究表明神經酸可以在一定程度上緩解多發性硬化癥狀[4]。Oda等[5]表明，神經酸對于由肥胖引起的人體機能的紊亂具有一定的抑制作用。另外，神經酸對心血管系統疾病也有輔助治療作用。神經酸在自然界中分布較少，其中蒜頭果果實中神經酸含量遠高于其他植物果實中神經酸含量[2]。筆者通過分析廣西巴馬縣蒜頭果（Malania oleifera）油脂中保健性脂肪酸的含量，探討利用蒜頭果種質資源開發保健油脂的價值。

1 材料與方法

1.1 材料

蒜頭果采自廣西巴馬縣。

1.2 儀器

石油醚（60～90 ℃）、無水乙醇、甲醇、硫酸、氫氧化鈉均為分析純，湛江市林達化學試劑公司；正己烷、色譜醇，上海化學試劑公司；脂肪酸標準品，Sigma公司；真空冷凍干燥系統 Free 12L，LABCONCO；TSQ Quantum XLS三重四極桿氣質聯用儀，Thermo Fisher公司。

1.3 方法

1.3.1 原料處理。取蒜頭果果仁，將果仁破碎，加適量冰塊，將果仁打成漿狀，果漿置于-80 ℃冰箱中凍結，再用真空冷凍干燥機干燥，得到凍干的粉末，用于油脂提取。

1.3.2

蒜頭果油脂提取。準確稱取一定量的果仁凍干粉，用干燥濾紙包好放入索氏提取器中，用石油醚在75～85 ℃水浴中提取7 h左右，取提取液，蒸發回收溶劑石油醚，得到蒜頭果粗油。

1.3.3

果仁粗油的皂化和甲酯化。稱取1 g NaOH溶解于10 mL無水乙醇中，加入2 g粗油至上述溶解后的溶液中，75 ℃水浴皂化1 h，取出加水，再加入HCl中和；取上述提取液200 μL于另一干凈的試管中，加入2 mL正己烷，取上清；再用1 mL正己烷再洗滌一次，將得到的上清液合并，蒸干；在得到的上清液中加入2 mL 1%硫酸-甲醇溶液后于75 ℃水浴30 min；取出后加入2 mL正己烷，取其上清液后，加入1 mL正己烷洗滌一次，合并得到的上清液，待有機溶劑揮發后取1 mL左右的液體待測。

1.2.4

果仁脂肪酸的GCMS分析條件。TSQ Quantum XLS三重四極桿氣質聯用儀，Thermo Fisher公司生產；HP5MS，30.00 m×0.25 mm×0.25 μm色譜柱；程序升溫：初溫40 ℃保留3 min，以10 ℃/min升至150 ℃，保留5 min，再以2 ℃/min升至250 ℃，再換成10 ℃/min升至300 ℃，保留5 min；進樣口溫度280 ℃，色譜-質譜接口溫度280 ℃；載氣為氦氣；載氣流速1.0 mL/min；電離方式EI；電離能量70 eV；進樣量1 μL。

2 結果與分析

2.1 蒜頭果果仁干粉制備

采集的新鮮蒜頭果果實質量約60%為果皮和果肉，約40%為核。果核外面包裹一層堅硬的殼，去除果核殼可得到果仁（圖1）。經過冷凍干燥100 g新鮮果仁可得干粉52.96 g。

2.2 蒜頭果油脂的提取率

果仁油為黃色液體（圖2）。與果皮果肉油脂相比，果仁油純度高，雜質少，具良好流動性，有芳香味，油脂提取得率為65%（對果仁干物質）。

2.3 蒜頭果果仁脂肪酸的GCMS分析

蒜頭果油經甲酯化，用GC-MS儀分析，總離子流圖見圖3。通過與脂肪酸標準品的色譜與質譜圖相結合比較，辨識色譜峰，其中油酸和亞麻酸峰重疊，二十碳烯酸和二十碳三烯酸峰重疊，因此將它們的含量合并計算，但不影響神經酸含量的計算。各脂肪酸定量按照標準品的色譜圖計算。

通過GC-MS分析，蒜頭果油各脂肪酸的含量見表1。由表1可知，神經酸含量達50.71%，油酸和亞麻酸含量達36.56%。

3 結論與討論

研究表明，神經酸可以作為多發性硬化癥、腎上腺髓質萎縮癥[6]、視神經脊髓炎癥[7]、急性彌漫性腦脊髓炎癥等脫髓鞘疾病以及Zellweger綜合癥[8]的輔助治療藥物或營養補充劑[9]。血清中神經酸水平低與突發性感音神經性聾（SSNHL）具有顯著關系[10]，精神分裂癥[11]、精神病[12]、注意力缺失[13]等精神疾病與神經酸水平過低也密切相關。

蒜頭果分子量較高，黏度較大，采用傳統壓榨法進行提油，出油率較低。丁俊峰等[14]采用微波輔助法進行蒜頭果油的提取，具有副產物少、產率較高等優點。黃開響等[15]采用超臨界CO2萃取的方法，對蒜頭果葉進行油脂提取，結果表明該方法適用于揮發性油脂的提取。該研究采用索氏抽提法，分別對蒜頭果仁、果皮、果肉進行油脂提取，相較于其他方法，成本低，操作簡單，對設備要求較低，出油率較高，更適用于實驗室階段的研究。從蒜頭果脂肪酸組成可知，蒜頭果油中不僅神經酸含量很高，油酸、亞麻酸含量也很高，具有作為保健食用油脂原料的良好前景，但也含有較高含量的芥酸，所以不能直接用于食用和藥用油脂，需做適當的精煉。

該研究表明，蒜頭果果仁中油脂含量高，達65%（占果仁干物質），神經酸含量高達50.71%，是極好的神經酸資源。但蒜頭果是國家二級保護植物，資源極其有限，目前尚不能推廣種植。另外，目前尚未有對蒜頭果仁和油脂進行全面的成分分析和安全性評價的研究，對于蒜頭果油的藥用、食用安全性尚為得到論證，因此不能直接用于食品或藥品。

參考文獻

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