肽菌素替代抗生素在斷奶仔豬生產(chǎn)上的應(yīng)用研究

徐海燕　周開鋒　汪官保　曹銀生　谷 巍（山東寶來利來生物工程股份有限公司　山東 泰安　271000　②山東省畜牧總站　山東 濟南）

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肽菌素替代抗生素在斷奶仔豬生產(chǎn)上的應(yīng)用研究

徐海燕①周開鋒②*汪官保①曹銀生①谷 巍①
（①山東寶來利來生物工程股份有限公司山東 泰安271000②山東省畜牧總站山東 濟南）

摘要本試驗旨在研究復(fù)合微生態(tài)制劑產(chǎn)品肽菌素對斷奶仔豬生長性能、腹瀉率及微生物菌群等的影響。試驗選取60頭定遠(yuǎn)黑斷奶仔豬，隨機分為2個組，對照組飼喂基礎(chǔ)日糧+抗生素，試驗組飼喂基礎(chǔ)日糧+0.1%的肽菌素，每個組3個重復(fù)，每個重復(fù)10頭豬。飼養(yǎng)試驗期21d。結(jié)果表明：試驗組日增重比對照組提高了22.5%，差異顯著（P＜0.05），料肉比降低了7.87%（P＜0.05）；在14d時，試驗組的大腸桿菌數(shù)比對照組低5.87%（P＜0.05）；在21d時，試驗組的乳桿菌數(shù)高出對照組4.18%（P＜0.05），大腸桿菌數(shù)比對照組低6.68%（P＜0.05）；試驗組的IgG水平分別比對照組提高了18.5%（P＜0.05）；試驗組的總蛋白含量比對照組提高了9.46%，血清尿素氮比對照組降低了22.9%（P＜0.05）；在14d時，試驗組的sIgA水平比對照組提高了27.8%（P＜0.05）；在21d時，比對照組提高了33.0%（P＜0.05）；在14d時，試驗組的蛋白酶比對照組提高了84.0%（P＜0.01），淀粉酶提高了3.98%（P＞0.05）；在21d時，試驗組的蛋白酶比對照組提高了77.4%（P＜0.01），淀粉酶提高了13.1%（P＞0.05）。由此可以得出，肽菌素能夠減少斷奶仔豬的腹瀉，提高其生長性能，還能夠改善其微生物菌群，增強其免疫功能。

關(guān)鍵詞仔豬微生態(tài)制劑生長性能腸道菌群免疫功能

項目支持：山東省農(nóng)業(yè)重大應(yīng)用技術(shù)創(chuàng)新項目《高效標(biāo)準(zhǔn)化家畜健康養(yǎng)殖模式建立與示范》

隨著規(guī)模化養(yǎng)殖快速發(fā)展，生豬日糧中添加抗生素具有顯著的促生長和抗病效果，故飼料中添加抗生素成為十分普遍的做法。然而，飼料中添加抗生素的危害日益顯現(xiàn)，受到社會廣泛關(guān)注，禁用抗生素成為社會安全需要，并將成為一種養(yǎng)殖規(guī)范［1］。越來越多的研究顯示，規(guī)模化養(yǎng)殖條件下，盡早建立和維持動物腸道菌群平衡是取代抗生素的可行途徑。微生態(tài)制劑能調(diào)控動物腸道微生物平衡、增殖有益菌、抑制有害菌、降低腸道pH、提高消化道酶的活性、提高營養(yǎng)物質(zhì)消化率和提高動物機體免疫力等方面的作用和功能［2］，具有無毒、無殘留、無副作用、安全可靠、不污染環(huán)境等特點，其開發(fā)及利用受到業(yè)界廣泛關(guān)注。仔豬斷奶是豬生長發(fā)育的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，剛斷奶仔豬面臨多重應(yīng)激，通常表現(xiàn)為食欲差、易腹瀉、生長緩慢、成活率低等，這些問題限制了集約化養(yǎng)豬效率和效益。在斷奶前后合理利用微生態(tài)制劑，減少應(yīng)激的發(fā)生，有利于仔豬的生長，可有效預(yù)防和治療仔豬腹瀉，降低生豬生產(chǎn)全程治療費用，不產(chǎn)生耐藥和肉品藥物殘留。

微生態(tài)制劑肽菌素是山東寶來利來生物工程股份有限公司生產(chǎn)的微生態(tài)制劑產(chǎn)品，其生產(chǎn)菌株主要是乳酸菌、酵母菌和芽孢桿菌等。本試驗旨在研究肽菌素在斷奶仔豬上的應(yīng)用效果，為肽菌素在養(yǎng)豬生產(chǎn)的推廣應(yīng)用提供試驗依據(jù)。

1　材料與方法

1.1試驗材料

肽菌素由植物乳桿菌、產(chǎn)朊假絲酵母和枯草芽孢桿菌及其代謝產(chǎn)物等組成，活菌總數(shù)不低于5.0×108cfu/g；仔豬由山東寶來利來巴夫巴夫農(nóng)業(yè)科技有限公司提供。（1）斷奶仔豬料基礎(chǔ)飼料配方（%）：玉米59.8、膨化豆粕28、進口魚粉4、乳清粉4、磷酸氫鈣0.8、預(yù)混料1、植物油1、石粉1.2、食鹽0.2；（2）營養(yǎng)水平：消化能1380.8千焦/kg、粗蛋白20.2%、賴氨酸1.1%、蛋+胱氨酸0.701%、色氨酸0.269%、鈣0.8%、磷0.65%。基礎(chǔ)日糧未使用抗菌藥物，為粉料，由亞太中慧集團提供。

1.2試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理

試驗選用28日齡健康定遠(yuǎn)黑斷奶仔豬45頭，按體重相近、性別比一致原則隨機分成2組，即對照組（基礎(chǔ)飼料+抗生素）、試驗組（基礎(chǔ)飼料+0.1%肽菌素），每組30頭，分成3個重復(fù)，每個重復(fù)10頭。試驗期為21d。仔豬以自由采食、飲水等常規(guī)方法進行飼養(yǎng)，按常規(guī)免疫程序進行疾病預(yù)防及飼養(yǎng)管理。

1.3樣品采集及測定指標(biāo)

1.3.1生長性能測定試驗開始及結(jié)束時，對仔豬逐只進行空腹稱重，詳細(xì)記錄各組采食量，計算各處理組的平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料肉比（F/G）。

1.3.2腹瀉率測定在試驗周期內(nèi)，詳細(xì)記錄各組仔豬腹瀉情況，計算腹瀉率，計算公式如下：腹瀉率=［該圈日腹瀉仔豬頭數(shù)總和/（仔豬總頭數(shù)×天數(shù)）］×100%。

1.3.3糞中微生物菌群測定在試驗的第14d、21d早上收取每頭仔豬排出的新鮮糞樣少許（不低于5g），用無菌塑料袋封裝，選擇仔豬腸道菌群中具有代表性的乳酸桿菌、大腸埃希氏菌及腸球菌，采用平板涂布法進行細(xì)菌計數(shù)［ 5］。

1.3.4血清免疫指標(biāo)測定血液收集與處理：試驗結(jié)束（第21天）早上8：00，每重復(fù)選取1頭仔豬，前腔靜脈采血10ml，用于測定血清生化指標(biāo)。血樣于37℃靜置0.5h，3000r/min離心10min，分離血清，用于測定血清IgG、IgM、IgA、血清總蛋白（TP）及血清尿素氮（SUN），血清免疫球蛋白采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒測定，血清總蛋白（TP）及血清尿素氮（SUN）采用全自動生化測定儀（卓越330）測定。

1.3.5糞便中分泌型IgA測定在試驗的第14和21d，每重復(fù)隨機取1頭斷奶仔豬的新鮮糞便，采用豬分泌型免疫球蛋白A（sIgA）ELISA試劑盒（購自南京建成生物工程研究所）測定糞便中sIgA。

1.3.6糞便中消化酶測定分別于試驗的14和21d，每重復(fù)隨機采集1頭斷奶仔豬新鮮糞便，測定其蛋白酶及淀粉酶活性。采用福林酚試劑法［6］測定蛋白酶活性，1個蛋白酶活力單位為pH7.5、酪蛋白濃度為10mg/ml。37℃下保溫10min，產(chǎn)生1μg/min酪氨酸的酶量，以U/g表示。采用淀粉一碘顯色法［6］測定淀粉酶活性，1個淀粉酶活力單位為pH6.0、60℃下保溫5min，液化1mg/h可溶性淀粉的酶量以U/g表示。

2　結(jié)果與分析

2.1肽菌素對斷奶仔豬生長性能的影響（結(jié)果見表1）

表1　肽菌素對斷奶仔豬生長性能的影響　　（kg/頭）

由表1可知：試驗組與對照組相比，日增重和日采食量分別提高了22.5%和12.9%（P＜0.05）；料肉比降低了7.87%（P＜0.05）。

2.2肽菌素對仔豬腹瀉率的影響（結(jié)果見表2）

表2　肽菌素對仔豬腹瀉率的影響　　　　　　（%）

由表2可知：在第1周內(nèi)，試驗組的腹瀉率略高于對照組；在第2周內(nèi)，腹瀉率與第一周相比均呈下降趨勢，并且試驗組下降幅度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于對照組的；在第3周內(nèi)，對照組的腹瀉率較第2周有所上升，且高于試驗組，試驗組的腹瀉率與第2周相比呈下降趨勢。由試驗期的觀察可知，在試驗前期，試驗組的腹瀉率與對照組相差不大，而中后期試驗組的腹瀉較輕，對照組的腹瀉較為嚴(yán)重。結(jié)果表明微生態(tài)制劑肽菌素對于減輕仔豬的腹瀉癥狀有明顯的作用。

2.3肽菌素對糞中微生物菌群的影響（結(jié)果見表3）

表3　肽菌素對仔豬微生物菌群的影響　　（lgcfu/g鮮樣）

由表3可知，在14d時，試驗組的乳桿菌數(shù)高出對照組1.08%，糞腸球菌數(shù)高出對照組0.77%，差異不顯著，大腸桿菌數(shù)比對照組低5.87%（P＜0.05）；在21d時，試驗組的乳桿菌數(shù)高出對照組4.18%（P＜0.05），糞腸球菌數(shù)高出對照組1.72%（P＜0.05），大腸桿菌數(shù)比對照組低6.68% （P＜0.05）。

2.4肽菌素對仔豬血清免疫指標(biāo)的影響（結(jié)果見表4）

表4　肽菌素對仔豬血清免疫指標(biāo)的影響

由表4可以看出，對IgG來說，試驗組比對照組提高了18.5% （P＜0.05）；對IgM來說，試驗組有提高的趨勢，但差異不顯著（P＞0.05）；對IgA來說，基本無變化。對總蛋白來說，試驗組對照組提高了9.46%（P＜0.05）；對血清尿素氮來說，試驗組比對照組降低了22.9%（P＜0.05）。

2.5肽菌素對仔豬糞便中分泌型IgA的影響（結(jié)果見表5）

表5　肽菌素對仔豬糞便中分泌型IgA的影響　　　（μg/g）

由表5可以看出，在14d時，試驗組比對照組提高了27.8%，差異顯著（P＜0.05）；在21d時，試驗組比對照組提高了33.0%，差異顯著（P＜0.05）。

2.6肽菌素對仔豬糞便中消化酶的影響（結(jié)果見表6）

表6　肽菌素對仔豬糞便中蛋白酶及淀粉酶的影響　　（U/g）

由表6可以看出，在14d時，試驗組的蛋白酶比對照組提高了84.0%（P＜0.01），淀粉酶提高了3.98%（P＞0.05）；在21d時，試驗組的蛋白酶比對照組提高了77.4%（P ＜0.01），淀粉酶提高了13.1%（P＞0.05）。

3　討論

3.1肽菌素對斷奶仔豬生長性能的影響

本試驗中肽菌素組仔豬平均日增重比對照組提高了22.5%，料肉比降低了7.87%。結(jié)果表明飼料中添加肽菌素能夠促進斷奶仔豬的生長發(fā)育，提高日增重，降低飼料增重比，這與武英等（1998）［7］報道的結(jié)果一致。肽菌素通過改善仔豬胃腸道微生態(tài)環(huán)境，保證了動物對飼料具有良好的消化和利用效率，從而獲得良好的飼養(yǎng)效果。

3.2肽菌素對斷奶仔豬腹瀉率的影響

本試驗結(jié)果表明，在飼料中添加肽菌素能夠有效防治仔豬的腹瀉。研究認(rèn)為特定原因引起腸道菌群失調(diào)是斷奶仔豬腹瀉發(fā)生主要原因，致病菌大量增殖，有益菌減少，最終導(dǎo)致腹瀉。進入動物體內(nèi)的益生菌可通過定植繁殖來維持消化道有益菌的優(yōu)勢作用，并與有害菌競爭營養(yǎng)物質(zhì)來維持微生物區(qū)系的平衡，從而提高機體的抗應(yīng)激能力［8］。

3.3肽菌素對斷奶仔豬糞中微生物菌群的影響

本試驗結(jié)果表明，肽菌素能明顯促進仔豬糞便中乳桿菌等厭氧菌的增殖，并且能抑制腸道內(nèi)需氧菌大腸桿菌的繁殖。乳桿菌等益生菌是動物腸道中的優(yōu)勢菌種，它能在腸道中迅速生長繁殖，產(chǎn)生大量酸，使腸道的pH值和Eh下降，既可抑制病原微生物的生長繁殖，又能促進腸道中其它厭氧菌的生長繁殖。腸道中酸性環(huán)境有利于營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，也有利于提高飼料利用率。仔豬出生后盡早攝入乳酸菌等益生菌可以幫助其盡早形成優(yōu)勢乳酸菌、雙歧桿菌等菌群，有助于動物提高抵抗力，避免外來有害細(xì)菌的感染。

3.4肽菌素對血清免疫指標(biāo)的影響

（1）本試驗研究結(jié)果表明，添加肽菌素能顯著提高血清IgG的水平（P＜0.05），但對其他免疫球蛋白影響較小或無顯著影響。這與吳石金等［9］在北京鴨上的研究結(jié)果一致。其機理可能是微生態(tài)制劑中有益微生物菌群在體內(nèi)的活動大大地改善了機體有益菌生長的內(nèi)環(huán)境，各種有益微生物代謝產(chǎn)生大量活性物質(zhì)，如超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）［10］等，增強了機體生理機能，提高了機體的體液免疫水平。（2）血清總蛋白是多種蛋白質(zhì)的混合物，有營養(yǎng)、運輸及參與機體免疫等功能，同時有利于維持機體的代謝，一定程度上反映機體的蛋白質(zhì)代謝狀況和營養(yǎng)狀況。同時尿素作為蛋白質(zhì)和氨基酸在哺乳動物體內(nèi)的代謝終產(chǎn)物，對照組仔豬血清尿素含量比試驗組高，說明進入對照組仔豬體內(nèi)的蛋白質(zhì)和氨基酸有更多被轉(zhuǎn)化為尿素而損失，因此，可以這樣認(rèn)為肽菌素有利于提高仔豬對蛋白質(zhì)和氨基酸的利用。其機理可能是微生態(tài)制劑有利于飼料氨基酸的平衡性吸收，使進入機體的各種氨基酸的組成與機體的需要更一致，更有利于合成動物機體的蛋白質(zhì)。

3.5肽菌素對仔豬糞便中分泌型IgA的影響

試驗表明，益生菌可維持健康的胃腸道微生態(tài)平衡，有助于粘膜免疫正確區(qū)分病原體和潛在過敏性抗原并加以清除，促進sIgA分泌。動物腸道與外界環(huán)境相通，長期與大量的病原微生物接觸，為抵抗病原體感染，粘膜免疫系統(tǒng)構(gòu)成了機體抵抗病原體入侵的第1道屏障［11］。粘膜相關(guān)淋巴組織主要部位是腸道相關(guān)淋巴組織（GALT），且GALT是構(gòu)成這道屏障的主要物質(zhì)基礎(chǔ)，而黏膜免疫的主要效應(yīng)因子是分泌型免疫球蛋白A（sIgA）。消化道粘膜表面定植、生長的大量的有益菌，則是粘膜免疫系統(tǒng)中的重要組成部分。

3.6肽菌素對仔豬糞便中消化酶的影響

國內(nèi)相關(guān)研究認(rèn)為微生態(tài)制劑具有消化酶活性［12-14］。本試驗中試驗組斷奶仔豬糞便中中性蛋白酶活性明顯高于對照組，淀粉酶活性較對照組也有所提高，是肽菌素促生長的一個重要因素。其原因可能是由于所添加芽孢桿菌、乳酸菌等益生菌刺激動物腸道，或是仔豬攝入的益生菌引起了腸道的適應(yīng)性分泌所致，也可能是某些益生菌本身所產(chǎn)生的胞外酶所致［15］。

4　結(jié)論

本試驗結(jié)果表明，在基礎(chǔ)日糧中添加適量的肽菌素能夠促進斷奶仔豬的生長發(fā)育，提高飼料的吸收利用率和轉(zhuǎn)化率，有效防治仔豬的腹瀉，提高斷奶仔豬的免疫力，是目前飼用抗生素的理想替代品之一。

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中圖分類號：S816.76

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1007-1733（2016）06-0001-03

*通訊作者

收稿日期：（2016-03-20）