川崎病患兒外周血淋巴細胞亞群變化及臨床意義

祝　絢，王雪梅，劉成桂，曹登成

(成都市婦女兒童中心醫院，四川成都 610091)

·臨床研究·

川崎病患兒外周血淋巴細胞亞群變化及臨床意義

祝絢，王雪梅，劉成桂，曹登成

(成都市婦女兒童中心醫院，四川成都 610091)

摘要:目的通過檢測川崎病(KD)患兒不同階段外周血中淋巴細胞亞群絕對值的變化，分析其臨床意義。方法采用流式細胞術分別檢測31例KD急性期(急性期組)，30例KD恢復期患兒(恢復期組)和35例健康兒童(對照組)外周血中CD3+、CD4+、CD8+、CD19+和CD56+水平，并對結果進行比較。結果急性期組CD3+、CD4+、CD8+明顯低于對照組，CD19+明顯高于對照組，差異具有統計學意義(P<0.05)；恢復期組CD3+、CD8+明顯低于對照組，CD19+明顯高于對照組，差異具有統計學意義(P<0.05)；恢復期組CD3+、CD8+明顯高于急性期，CD19+明顯低于急性期，差異具有統計學意義(P<0.05)；CD4+/CD8+和CD56+在三組間差異無統計學意義(P>0.05)。結論檢測淋巴細胞亞群對評估KD患兒免疫狀況、診斷和治療具有重要的臨床價值。

關鍵詞:川崎病；淋巴細胞亞群；流式細胞術

川崎病(KD)是一種急性、自限性全身血管炎性疾病，1967年首次被日本川崎富所報道，好發于6個月至5歲的嬰幼兒，臨床表現為高燒、皮疹、淋巴結腫大和結膜充血，其發病機制尚不明確[1]。川崎病可引起免疫紊亂，累及冠狀動脈，誘發心血管疾病和后天性心臟病等嚴重后遺癥，是導致嬰幼兒死亡的重要因素之一。隨著發病率的日益增長，長期以來KD缺乏特異、有效的診斷方法[2]。本文通過對KD患兒急性期、恢復期外周血淋巴細胞亞群的測定，并和正常兒童進行比較，評估KD患兒免疫功能變化，為臨床對KD診斷、治療和預后提供一定幫助。

1資料與方法

1.1一般資料選取2012年1月至2014年12月本院兒科收治的KD患兒61例，其中男39例，女22例，年齡5個月至8歲，平均(4.1±1.3)歲。采用2002年日本川崎病研究委員會第5次修訂的診斷標準[3]，按病程將61例KD患兒分為急性期組(病程10 d內未經治療)和恢復期組(病程21～28 d)，急性期組31例，恢復期組30例；對照組35例為同期門診健康體檢兒童，兩組性別和年齡差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2方法分別于急性期和治療恢復期檢測外周血淋巴細胞亞群。

1.3儀器和試劑采用美國BECKMAN COULTER公司CYTOMICS FC 500流式細胞儀檢測CD3+、CD4+、CD8+、CD19+和CD56+水平。試劑盒由美國BECKMAN COULTER公司提供，嚴格按照操作說明進行。

2結果

研究結果顯示，急性期組CD3+、CD4+、CD8+明顯低于對照組，CD19+明顯高于對照組，差異具有統計學意義(P<0.05)；恢復期組CD3+、CD8+明顯低于對照組，CD19+明顯高于對照組，差異具有統計學意義(P<0.05)；恢復期組CD3+、CD8+明顯高于急性期，CD19+明顯低于急性期，差異具有統計學意義(P<0.05)；CD4+/CD8+和CD56+在三組中差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1　　外周血細胞亞群比較±s)

*：P<0.05，與對照組比較；△：P<0.05，與急性期組比較。

3討論

川崎病是一種以高燒、皮疹、黏膜炎、淋巴結腫大伴冠狀動脈損害和免疫紊亂為特征的嬰幼兒急性血管炎，可誘發冠狀動脈擴張、心肌炎、后天性心臟病等嚴重并發癥，是威脅嬰幼兒健康的重要疾病之一。日本和美國做了大量流行病學調查發現，發病率呈逐年上升趨勢，但其發病機制至今尚未清楚，也沒有特異性的檢測手段[2,4]，這對KD患兒的疾病診斷、病程評估、治療和預后造成一定困擾。

川崎病的早診斷、早治療對減少川崎病及其并發癥具有重要意義。雖然川崎病的發病機制尚不清楚，但很多研究都顯示KD發病與淋巴細胞感染密切相關。近年研究發現，病毒、細菌、超抗原、遺傳因素等都可能參與了KD的病理機制[1]。Burns等[4]認為，KD患兒的血管炎和免疫紊亂可能與親淋巴細胞性病毒同時對內皮細胞和淋巴樣細胞存在親和性有關。通過檢測KD患兒和健康兒童外周血單個核細胞培養的上清液顆粒部分發現，KD患兒的外周血單個核細胞上清液顆粒部分有逆轉錄病毒活化，而這種逆轉錄病毒的活化傳達到固定的T細胞系，從而證明了KD與淋巴細胞的外源感染有關。丙種球蛋白是目前治療KD的主要方法之一[2]，其作用機制可能與延緩了淋巴細胞的凋亡時間，降低了淋巴細胞凋亡比例和DNA片段有關，提示KD與自身免疫性疾病和無功能淋巴細胞凋亡相關[5]。而Lee等[6]的研究表明，免疫球蛋白和阿司匹林聯合治療組的患者比單獨用阿司匹林治療組的患者CD4+、CD8+和T細胞總數上升更明顯，B細胞下降更明顯，認為丙種球蛋白對KD患兒的治療可修復T、B細胞的紊亂，特別是B細胞的紊亂。因此，外周血淋巴細胞水平變化與KD患兒病程發展密切相關，不容忽視。

淋巴細胞是機體免疫系統功能中最重要的細胞群，是反映機體免疫狀態的重要指標。當淋巴細胞亞群的數量和功能發生異常或變化時，就會導致機體免疫紊系統亂并產生病理變化，尤其是T淋巴細胞以及T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+的數量和相對比值的變化在免疫系統中占主導地位[7]。本研究結果顯示，KD急性期與恢復期CD3+、CD8+明顯低于正常組，CD19+明顯高于對照組。CD3+的降低說明了T淋巴細胞總數的減少導致了KD患兒T細胞的異常，免疫應答使機體免疫系統處于失衡狀態，特別是CD8+的明顯減少，提示作為Ts細胞減少可能導致機體免疫系統的過度激活，引起細胞免疫的紊亂。另一方面，Th細胞和Ts比例在機體正常情況下維持一個相對平衡狀態，一旦這個平衡打破，機體免疫系統也會出現紊亂。雖然三組中CD4+/CD8+的差異無統計學意義(P>0.05)，但在急性期CD4+是明顯低于正常組，到了恢復期CD4+與正常組并無差別，說明CD4+降低的速度相對CD8+速度慢，說明Th細胞相對Ts細胞增加，B細胞的激活又依賴于Th細胞和Ts細胞的調節，CD19+的明顯增高可能與Ts的減少伴有Th的增加有關，從而造成B細胞抑制降低，活化增加，導致B淋巴細胞功能亢進，并產生大量抗體，使得患兒的體液免疫發生紊亂。此外，處于恢復期的患兒CD3+、CD8+明顯高于急性期，CD4+恢復到正常，CD19+也明顯降低，說明細胞免疫和體液免疫的紊亂無論在T淋巴細胞總數，還是Th/Ts細胞的比例以及B淋巴細胞的總數在恢復期都處于一個逐漸修復平衡的狀態，這對病程的判斷和治療有重要意義。

綜上所述，動態檢測淋巴細胞亞群對對評估患兒的免疫狀況、病理進程、療效和預后有一定的幫助。

參考文獻

[1]Ashrafi AH,Wang J,Stockwell CA,et al.Kawasaki disease:four case reports of cardiopathy with an institutional and literature review[J].Pediatr Dev Pathol,2007,10(6):491-499.

[2]Pinna G,Kafetzis D,Tselkas O,et al.Kawasaki disease:an overview[J].Curr Opin Infect Dis,2008,21(3):263-270.

[3]Levison ME,Thomas M,Pallasch J,et al.Diagnosis,treatment,and long-term management of Kawasaki disease:a statement for health professionals from the Committee on Rheumatic Fever,Endocarditis,and Kawasaki Disease,Council on Cardiovascular Disease in the Young,American Heart Association[J].Pediatrics,2004,114(6):1708-1733.

[4]Burns JC,Geha RS,Schneeberger EE,et al.Polymerase activity in lymphocyte culture supernatants from patients with Kawasaki disease[J].Nature,1986,323(6091):814-816.

[5]Yi QJ,Li CR,Yang XQ.Effect of intravenous immunoglobulin on inhibiting peripheral blood lymphocyte apoptosis in acute Kawasaki disease[J].Acta Paediatr,2001,90(6):623-627.

[6]Lee HK,Kim DS,Noh GW,et al.Effects of intravenous immune globulin on the peripheral lymphocyte phenotypes in Kawasaki disease[J].Yonsei Med J,1996,37(5):357-363.

[7]Santana MA，Esquivel-Guadarrama F.Cell biology of T cell activation and differentiation[J].Int Rev Cytol,2006,250(250):217-274.

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.10.039

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)10-1393-03

(收稿日期：2016-01-23)